本发明专利技术公开了一种纯化猪皮的制作方法，该制作方法是选用健康的新鲜猪皮为原料，在维持猪皮的三维构造不变的前提下，对猪皮进行反复清洗，并采用多种酶制剂和碱性材料交替处理，除去猪皮中的非胶原成分和小分子物质，得到具有良好生物相容性和生物活性的纯化猪皮。这种纯化猪皮可以用于提取医用胶原、制备组织工程支架材料和修复与重建材料等。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及，属于生物医学材料的制备领域。
技术介绍
近些年来，随着科学技术的不断发展进步，生物医学材料也得到了前所未有的发展，动 物皮胶原在生物医学材料中的应用日益广泛。胶原广泛地存在于哺乳动物的骨、腱、软骨和皮肤及其它结缔组织中，约占哺乳动物蛋 白总量的1/3，是构成人体重要的细胞外基质成分。胶原具有较好的生物相容性，较弱的抗 原性，且亲水性好，对细胞的吸附作用强。由于它本身就是一种细胞外基质成分，还兼具诱 导细胞增殖和分化的作用。因此，长期以来，人们利用胶原的性能特点，研究开发系列胶原 基生物医学材料，如生物敷料、人工皮肤、生物医用膜、止血海绵、脱细胞真皮基质材料、 可注射胶原溶液、胶原基复合医用纤维以及组织工程支架材料等等，部分胶原基生物医学材 料己应用于临床，并被证明具有一定的疗效(但卫华，王坤余，曾睿，等.胶原的医学应用及 其发展前景.生物医学工程与临床.2004， 8 (1): 45-48)。胶原是世界上资源存量最大的可再生动物生物质资源，来源广泛、价廉易得，具有很高 的医学利用价值。令人遗憾的是，胶原在医学应用方面，由于胶原基生物医学材料的生物相 容性在制造过程中难于控制，导致材料在使用过程中常常出现可靠性和安全性的问题。出现 这些问题的根本原因就是由于所使用的胶原蛋白的纯度达不到要求。根据我们的研究，解决胶原基生物医学材料的生物相容性的关键是提高胶原蛋白的纯 度，尽量地清除原料中的非胶原成分和小分子物质；在纯化提取的过程中，既要确保胶原的 生物活性，又要清除抗原物质，消除其免疫原性。现有技术往往忽略了这些关键问题，有的 技术是使用氯化钠溶液除去原料中的非胶原成分，再进行提纯(傅燕凤，沈月新，杨承刚， 等.淡水鱼鱼皮胶原蛋白的提取.上海水产大学学报.2004， 13 (6): 146-150);有的技术则是 进行一些简单的预处理就进行提取(李开雄，赵志远，刘霞.猪皮中胶原蛋白的提取及应用. 肉类研究.1996， 4: 43-48);从总体上来看，己有技术侧重于胶原提取的居多，而直接对动 物皮胶原进行纯化的甚少(胡胜，李志强，陈敏.皮胶原蛋白的酶法提取及在高附加值领域的 应用.皮革科学与工程.2002， 12 (5): 38-42)。综上所述，现有技术存在以下不足1.以资源相对有限的牛腱、鼠尾腱为原料提取胶原蛋白，忽略了原料的选择及其纯化对于制备医用胶原蛋白的极端重要性；2. 以牛腱为原料提取胶原蛋白，存在携带疯牛病病毒的风险；3. 以猪皮、牛皮、羊皮及鱼皮等提取胶原蛋白，工艺过于简单，无法达到纯化的目的。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对已用技术存在的不足而提供一种针对猪皮的高效纯化方法，其特点 是以价廉易得的猪皮为原料，制备具有医学利用价值的纯化猪皮。 纯化猪皮的制作方法包括以下步骤(1) 机械去肉采用去肉机去肉，清除猪皮的皮下组织层。(2) 第一次清洗选取健康猪皮100重量份装入转鼓中，加水调节液比2.0-4.0，转动 30-120min，控干废液，加水调节液比2. 0-4. 0，转动30-120min，控干废液。(3) 第二次清洗加水调节液比2.0-4.0，转动30-120min，控干废液，加水调节液比 2.0-4.0，转动30-120min，控干废液。(4) 第三次清洗加温度为30-45。C的热水，调节液比2.0-4.0，浴温30-35°C，加入 平平加0.2-3.0重量份，转动30-180min，控干废液。(5) 水洗:加水调节液比2.0-6.0，流水洗10-30min。(6) 浸水加水调节液比2. 0-6. 0，加入平平加0. 2-3. 0重量份、食盐1. 0-6. 0重量份， 转动30-180min，停鼓过夜。次晨转动30-60min，控干废液。(7) 水洗加水调节液比2.0-6.0，流水洗10-30min。(8) 第一次脱脂加入40—45。C的热水调节液比1.0~4.0，浴温为30—38。C，加入平 平加0.3—2.0重量份，洗衣粉0. 5—3. 0重量份，转动60—180min,控干废液。(9) 第二次脱脂加入40—45。C的热水调节液比1.0—4.0，浴温为30—38°C，加入平 平加0. 3—3. 0重量份，洗衣粉0.5—3.0重量份，转动60—180min，控干废液。(10) 第三次脱脂加入40—45。C的热水调节液比1.0—4.0，浴温为30—38。C，加入 平平加0. 3—3. 0重量份，洗衣粉0.5—3.0重量份，转动60—180min，控干废液。(11) 水洗加温度为35—40。C的热水，调节液比2.0-6.0，闷水洗15-30min，然后加 温度为35—40。C的热水，调节液比2. 0-6. 0，闷水洗10-20min，再加温度为35—4(TC的热水， 调节液比2.0-6.0，闷水洗10-20min。最后，加水调节液比2. 0_6. 0，流水洗30min。将皮 出鼓，沥水3h。(12) 涂酶先称取复合酶皮胶原处理剂A 3.0-6.0重量份，复合酶皮胶原处理剂B2.0-4.0重量份，水l.O-4.0重量份，调成糊状。然后，将皮肉面朝上，平铺于工作台上，用鬃刷蘸酶糊，均匀涂于皮的肉面上，涂好后，沿皮的脊背线对折，堆置30-72h。5(13) 手工推毛用推毛板推去松动的针毛和绒毛，尽量推净。(14) 水洗加常温水调节液比2. 0-6. 0,流水洗10-30min。然后加水调节液比2. 0-6. 0， 流水洗10-30min。再加水调节液比2. 0_6. 0，流水洗10-30min。控干废液将皮出鼓。(15)浸碱加入纯度为60%的Na2S 1.0-4. 0重量份，浓度为30%的NaOll 0. 3-1. 0重 量份，水10-15重量份，转动20-40min，再将皮放进转鼓中，转动30-120min，检査脱毛情 况，毛脱净后，扩大液比至2. 0-5. 0，转动120min，停鼓过夜。次日晨，转动30-60min， 控干废液。(16) 水洗加水调节液比2.0-6.0，闷水洗10-30min，控干废液。然后，加水调节液 比2. 0-6.0，流水洗10-30min，控干废液。(17) 第一次脱碱加温度为38-42'C的热水调节液比1.0-4.0，浴温30-35'C，加入氯 化铵1. 0-5. 0重量份，平平加0. 3-1. 5重量份，转动30-90min。(18) 水洗加水调节液比2.0-6.0，流水洗30-90min,控干废液。再加水调节液比 2.0-6.0，流水洗30-90rain，控干废液。(19) 第二次脱碱加温度为38-42'C的热水调节液比1.0-4.0，浴温30-35'C，加入氯 化铵1. 0-5. 0重量份，平平加0. 3-1. 5重量份，转动30-90min。(20) 水洗加常温水调节液比2. 0-6. 0，流水洗30-90min，控干废液。再加常温水调 节液比2.0-6.0,流水洗30-90min，控干废液。(21) 酶消化加入温度为40-44。C的热水，预热，调节液比至1.0-3.0，浴温为30-36 。C，然后，加入活力为l: 25的工业胰酶O. 10-1.20重量份，平平加0. 3-3. 0重量份，转动 60-180min后本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种纯化猪皮的制作方法，其特征在于该纯化方法含有以下步骤： （１）机械去肉：采用去肉机去肉，清除猪皮的皮下组织层； （２）第一次清洗：选取健康猪皮１００重量份装入转鼓中，加水调节液比２．０－４．０，转动３０－１２０ｍｉｎ，控干废 液，加水调节液比２．０－４．０，转动３０－１２０ｍｉｎ，控干废液； （３）第二次清洗：加水调节液比２．０－４．０，转动３０－１２０ｍｉｎ，控干废液，加水调节液比２．０－４．０，转动３０－１２０ｍｉｎ，控干废液； （４）第三次清洗 ：加温度为３５－４５℃的热水，调节液比２．０－４．０，浴温３０－３５℃，加入平平加０．２－３．０重量份，转动３０－１８０ｍｉｎ，控干废液； （５）水洗：加水调节液比２．０－６．０，流水洗１０－３０ｍｉｎ； （６）浸水：加水调节液 比２．０－６．０，加入平平加０．２－３．０重量份、食盐１．０－６．０重量份，转动３０－１８０ｍｉｎ，停鼓过夜，次晨转动３０－６０ｍｉｎ，控干废液； （７）水洗：加水调节液比２．０－６．０，流水洗１０－３０ｍｉｎ； （８）第一次脱 脂：加入４０－４５℃的热水调节液比１．０－４．０，浴温为３０－３８℃，加入平平加０．３－２．０重量份，洗衣粉０．５－３．０重量份，转动６０－１８０ｍｉｎ，控干废液； （９）第二次脱脂：加入４０－４５℃的热水调节液比１．０－４．０，浴温 为３０－３８℃，加入平平加０．３－３．０重量份，洗衣粉０．５－３．０重量份，转动６０－１８０ｍｉｎ，控干废液； （１０）第三次脱脂：加入４０－４５℃的热水调节液比１．０－４．０，浴温为３０－３８℃，加入平平加０．３－３．０重量份，洗衣 粉０．５－３．０重量份，转动６０－１８０ｍｉｎ，控干废液； （１１）水洗：加温度为３５－４０℃的热水，调节液比２．０－６．０，闷水洗１５－３０ｍｉｎ，然后加温度为３５－４０℃的热水，调节液比２．０－６．０，闷水洗１０－２０ｍｉｎ，再加 温度为３５－４０℃的热水，调节液比２．０－６．０，闷水洗１０－２０ｍｉｎ，最后，加水调节液比２．０－６．０，流水洗３０ｍｉｎ，将皮出鼓，沥水３ｈ； （１２）涂酶：先称取复合酶皮胶原处理剂Ａ ３．０－６．０重量份，复合酶皮胶原处理剂Ｂ２ ．０－４．０重量份，水１．０－４．０重量份，调成糊状，然后，将皮肉面朝上，平铺于工作台上，用鬃刷蘸酶糊，均匀涂于皮的肉面上，涂...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：但年华，但卫华，林海，王坤余，李志强，陈敏，曾睿，廖隆理，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：90[中国|成都]
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