枯草芽孢杆菌及其在制备预防大口黑鲈虹彩病毒感染的饲料添加剂中的应用制造技术

本发明专利技术公开了枯草芽孢杆菌及其在制备预防大口黑鲈虹彩病毒感染的饲料添加剂中的应用。首先克隆出大口黑鲈虹彩病毒主要衣壳蛋白编码基因MCP，将该基因构建于枯草芽孢杆菌表达载体pEB03

【技术实现步骤摘要】
枯草芽孢杆菌及其在制备预防大口黑鲈虹彩病毒感染的饲料添加剂中的应用


[0001]本专利技术属于饲料
，具体涉及一种枯草芽孢杆菌及其在制备预防大口黑鲈虹彩病毒感染的饲料添加剂中的应用。

技术介绍

[0002]大口黑鲈(Largemouth bass,Micropterus salmoides)，俗称加州鲈，隶属于鲈形目(Perciformes)、鲈亚目(Porcoidei)、太阳鱼科(Cehtrachidae)、黑鲈属(Micropterus)。大口黑鲈源于北美洲，其适应性强、易起捕、养殖周期短、生长快，深受养殖和消费者的欢迎，我国台湾省于上世纪70年代末从国外引进大口黑鲈并于1983年人工繁殖成功，同年大口黑鲈从台湾省引进广东省，如今已推广至全国各地。随着大口黑鲈养殖密度的不断加大，水产病害问题也越发严重。其中大口黑鲈虹彩病毒(Largemouth bass ranavirus，LMBV)给大口黑鲈的养殖带来了严重的经济损失，该病毒是大口黑鲈的重要致病病原，其极易感染大口黑鲈，且流行广泛，致使苗期大口黑鲈成活率低，成鱼养殖在高温期容易爆发本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种预防大口黑鲈虹彩病毒感染的枯草芽孢杆菌的芽孢，其特征在于，是首先克隆出大口黑鲈虹彩病毒主要衣壳蛋白编码基因MCP，将该基因构建于枯草芽孢杆菌表达载体pEB03
‑
CotC中，连接于CotC基因片段下游，获得重组表达质粒pEB03
‑
CotC
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MCP，然后将重组表达质粒pEB03
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CotC
‑
MCP转化入枯草芽孢杆菌，然后通过诱导表达，即可获得在芽孢表面展示大口黑鲈虹彩病毒主要衣壳蛋白MCP的芽孢，所述的主要衣壳蛋白编码基因MCP的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌的芽孢，其特征在于，所述的枯草芽孢杆菌的芽孢，其制备方法为：(1)以大口黑鲈虹彩病毒基因组DNA为模板，以LMBV
‑
F和LMBV
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R克隆获得大口黑鲈虹彩病毒主衣壳蛋白编码基因MCP；引物序列如下：LMBV
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F：5`
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CATAAAAAACACTACAAGCTTATGTCTTCTGTTACGGGTTCTGG
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3`；LMBV
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R：5`
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AGTGGCAAAGTGCTAGAGCTCTTACAGGATGGGGAAACCCA
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3`。(2)将基因MCP与经过相同限制性内切酶切割的质粒pEB03
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CotC以无缝克隆技术进行连接，获得重组质粒pEB03

【专利技术属性】
技术研发人员：周胜，王权，梁霞，宁运尚，刘士佳，梁增健，陈应静，梁浚嘉，张泽妙，黄艳，黄友华，秦启伟，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：