【技术实现步骤摘要】
靶向TIGIT的抗体和双特异性抗体及其应用
[0001]本专利技术属于生物医药领域,具体涉及一种靶向TIGIT的抗体和双特异性抗体及其应用。
技术介绍
[0002]TIGIT(含Ig和ITIM结构域的T细胞免疫受体)是一种抑制性受体蛋白,也称为WUCAM、Vstm3或VSIG9,与CD155等蛋白结构相似,统称为CD155家族。TIGIT是Ⅰ型跨膜蛋白,在T细胞(包括活化的T细胞、记忆T细胞、调节性T细胞和滤泡性T辅助细胞)和NK细胞上表达,在抑制T细胞和NK细胞介导的抗肿瘤免疫功能活性方面起着重要作用。成熟人TIGIT的氨基酸序列含有223个氨基酸(aa)残基(NCBI登录号:NM_173799)。成熟人TIGIT的细胞外结构域(ECD)由以下组成:120个氨基酸残基,其具有V型Ig样结构域、随后是21个氨基酸跨膜序列、和具有基于免疫受体酪氨酸的抑制性基序(ITIM)的82个氨基酸细胞质结构域。在ECD内,人TIGIT分别与小鼠和食蟹猴具有59%和87%的序列同源性。
[0003]已知TIGIT与脊髓灰质炎病毒受体(PVR;CD155)、nectin2(CD112)CD96、CD226之间保持着一种“多对多”的相互作用关系。TIGIT参与了一个复杂的调控网络,设计多个受体、一个竞争性共刺激受体(CD226)和多个配体(如CD155、CD112)。这些配体主要在APC(如树突细胞和巨噬细胞)和肿瘤细胞上表达。作为免疫“检查点”分子,Tigit在被其配体CD155和CD112结合时启动免疫细胞中的抑制性信号传导 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种靶向TIGIT的抗体或抗原结合片段,其包括轻链可变区和/或重链可变区;所述抗体或其抗原结合片段结合人TIGIT,并具有阻断PVR和TIGIT结合的功能;所述轻链可变区包含:如SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列的CDR1、如SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列的CDR2和如SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列的CDR3;所述重链可变区包含:如SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列的CDR1、如SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列的CDR2和如SEQ ID NO:10所示的氨基酸序列的CDR3。2.如权利要求1所述的靶向TIGIT的抗体或抗原结合片段,其特征在于,所述轻链可变区包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:23
‑
25或其突变所示的氨基酸序列;所述重链可变区包含如SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:26
‑
27或其突变所示的氨基酸序列;优选地,所述轻链可变区包含如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列,所述重链可变区包含如SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列;或,所述轻链可变区包含如SEQ ID NO:23所示的氨基酸序列,所述重链可变区包含如SEQ ID NO:26所示的氨基酸序列;或,所述轻链可变区包含如SEQ ID NO:24所示的氨基酸序列,所述重链可变区包含如SEQ ID NO:26所示的氨基酸序列;或,所述轻链可变区包含如SEQ ID NO:25所示的氨基酸序列,所述重链可变区包含如SEQ ID NO:26所示的氨基酸序列;或,所述轻链可变区包含如SEQ ID NO:23所示的氨基酸序列,所述重链可变区包含如SEQ ID NO:27所示的氨基酸序列;或,所述轻链可变区包含如SEQ ID NO:24所示的氨基酸序列,所述重链可变区包含如SEQ ID NO:27所示的氨基酸序列;或,所述轻链可变区包含如SEQ ID NO:25所示的氨基酸序列,所述重链可变区包含如SEQ ID NO:27所示的氨基酸序列。3.如权利要求1或2所述的靶向TIGIT的抗体或抗原结合片段,其特征在于,其是抗体、Fab、Fab
’
、F(ab
’
)2、Fv、scFv、双特异性抗体、多特异性抗体、单域抗体或单区抗体,或由上述抗体制得的单克隆抗体或多克隆抗体;优选地,其包括人源抗体轻链恒定区和人源抗体重链恒定区;更优选地,所述人源抗体轻链恒定区为κ或者λ型轻链恒定区,和/或,所述人源抗体重链恒定区为hIgG1、hIgG2、hIgG3、hIgG4的重链恒定区或其突变。4.如权利要求3所述的靶向TIGIT的抗体或抗原结合片段,其特征在于,其轻链包含如SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:30或SEQ ID NO:32所示的氨基酸序列或其突变,和/或,其重链包含如SEQ ID NO:29或SEQ ID NO:31所示的氨基酸序列或其突变;优选地,所述轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO:28所示;所述重链的氨基酸序列如SEQ ID NO:29所示;或,所述轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO:30所示;所述重链的氨基酸序列如SEQ ID NO:29所示;或,所述轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO:30所示;所述重链的氨基酸序列如SEQ ID NO:31所示;或,所述轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO:32所示;所述重链的氨基酸序列如SEQ ID NO:31所示。5.一种靶向TIGIT的双特异性抗体或多特异性抗体,其包括第一蛋白功能区和第二蛋白功能区,其中,所述第一蛋白功能区为如权利要求1
‑
4中任一项所述的靶向TIGIT的抗体或抗原结合片段;所述第二蛋白功能区为非靶向TIGIT的抗体;优选地,所述第一蛋白功能区和第二蛋白功能区分别选自免疫球蛋白、scFv、Fab、Fab
’
或F(ab
’
)2,且所述第一蛋白功能区和第二蛋白功能区中至多只有一个蛋白功能区为免疫球蛋白;更优选地,当所述第二功能区的结构为免疫球蛋白时,所述免疫球蛋白的恒定区包括人源抗体轻链恒定区和人源抗体重链恒定区;进一步更优选地,所述人抗体轻链恒定区为κ链或者λ链,所述人抗体重链
恒定区为hIgG1、hIgG2、hIgG3、hIgG4或其突变。6.如权利要求5所述的靶向TIGIT的双特异性抗体或多特异性抗体,其特征在于,所述第一蛋白功能区为免疫球蛋白,所述第二蛋白功能区为一个或多个scFv,所述scFv包括重链可变区与轻链可变区,所述重链可变区与轻链可变区通过连接子连接;优选地,所述scFv通过连接子与所述免疫球蛋白连接,所述连接子优选为(G4S)
w
,所述w优选为0~10之间的整数,更优选为1、2、3或者4;更优选地,所述scFv为轻链可变区
‑
连接子
‑
重链可变区,其轻链可变区N末端或重链可变区C末端通过连接子相应地连接在所述的免疫球蛋白轻链和/或重链的C末端或N末端;或所述scFv为重链可变区
‑
连接子
‑
轻链可变区,其重链可变区N末端或者轻链可变区C末端通过连接子相应地连接在所述的免疫球蛋白轻链和/或重链的C末端或N末端。7.如权利要求6所述的靶向TIGIT的双特异性抗体或多特异性抗体,其特征在于,所述连接子为(G4S)3,和/或,所述scFv的数量为两个,且两个scFv对称地连接在所述的免疫球蛋白轻链和/或重链的C末端或N末端;所述scFv连接免疫球蛋白的重链;优选地,所述scFv为轻链可变区
‑
连接子
‑
重链可变区结构,所述scFv的轻链可变区的C末端与连接子连接,所述连接子再与重链可变区的N末端连接,所述scFv的重链可变区的C末端通过所述连接子与所述免疫球蛋白重链的N末端连接;或,所述scFv为重链可变区
‑
连接子
‑
轻链可变区结构,所述scFv的轻链可变区的N末端与所述连接子连接,所述连接子再与重链可变区的C末端连接,所述scFv的重链可变区的N末端与所述免疫球蛋白重链的C末端连接。8.如权利要求5
‑
7中任一项所述的靶向TIGIT的双特异性抗体或多特异性抗体,其特征在于,所述第二蛋白功能区靶向PD
‑
1/PD
‑
L1、Claudin18.2、TIM
‑
3或LAG
‑
3;优选地,所述第二蛋白功能区为靶向PD
‑
1/PD
‑
L1的抗体;更优选地,所述靶向PD
‑
1/PD
‑
L1的抗体为Nivolumab、Atezolizumab、Pembrolizumab、Durvalumab或Avelumab;进一步更优选地,当所述scFv连接在所述免疫球蛋白的两条重链的C末端时,所述重链的C末端由K突变为A;和/或,所述第二蛋白功能区为两个相同的scFv或其突变,其中,所述scFv的轻链可变区为Nivolumab、Atezolizumab、Pembrolizumab、Durvalumab或Avelumab的轻链可变区,所述scFv的重链可变区为Nivolumab、Atezolizumab、Pembr...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘佳建,王凤坡,邓洪渊,栾彦,王翠辉,张振,
申请(专利权)人:上海健信生物医药科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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