蛋白质-药物偶联物的合成方法技术

本发明专利技术涉及合成可用于治疗病毒性感染的偶联物的方法，所述偶联物是例如含有与Fc结构域单体连接的病毒神经氨酸酶抑制剂(例如扎那米韦或其类似物)的偶联物。米韦或其类似物)的偶联物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】蛋白质
‑
药物偶联物的合成方法
[0001]序列表
[0002]本申请含有序列表，其已经以ASCII格式电子提交并以全文引用的方式并入本文中。所述ASCII拷贝创建于2021年8月4日，命名为50945
‑
083WO1_Sequence_Listing_08_04_21_ST25并且大小为33,939个字节。

技术介绍

[0003]本公开涉及合成可用于预防或治疗流行性感冒和其相关病状的抗病毒偶联物的方法。
[0004]对流行性感冒的新颖抗病毒治疗的需求是显著的，并且在医学领域尤为迫切。流行性感冒病毒是流行性感冒或流感的病原体，每年造成三百万至五百万例严重疾病病例，并且全世界大约500,000例死亡。虽然大多数人在约一至两周内从流行性感冒中完全恢复，但其他人会发展威胁生命的并发症，例如肺炎。因此，流行性感冒可致命，尤其对于年幼、年老或慢性疾病人员来说。免疫系统虚弱或受损的人，例如HIV感染晚期的人或免疫系统在医学上受到阻抑以防止移植器官排斥的移植患者，发生与流行性感冒相关的并发症的风险较大。孕妇和幼儿发生并发症的风险也高。开发针对流行性感冒的抗病毒治疗是一项持续的挑战。最常用的抑制剂已出现抗药性毒株。
[0005]流行性感冒抗病毒剂主要靶向流行性感冒病毒颗粒表面上呈递的蛋白质。流行性感冒病毒的包膜含有两种免疫显性糖蛋白，即血球凝集素和神经氨酸酶，它们在病毒性感染和传播中起关键作用。血球凝集素通过与表面唾液酸相互作用使病毒附着到宿主细胞，从而起始进入。神经氨酸酶是一种外切糖苷酶，它从受感染宿主细胞表面上的聚糖结构裂解唾液酸(末端神经氨酸残基)，从而释放子代病毒并容许病毒从宿主细胞传播到未受感染的周围细胞。因此，对神经氨酸酶的抑制可作为抗病毒药物的药理学靶标。已鉴别出用于减少病毒传播的病毒神经氨酸酶抑制剂，包括奥司他韦(oseltamivir)(Tamiflu
TM
)、扎那米韦(zanamivir)(Relenza
TM
)和帕拉米韦(peramivir)(Rapivab
TM
)。
[0006]许多治疗剂(例如小分子剂)和生物制剂(例如肽、多肽和多核苷酸)的效用存在着血清半衰期不足的问题。增加半衰期和功效的有效方式包括使治疗剂(例如小分子治疗剂和例如肽、多肽和多核苷酸等生物制剂)与多肽结合，以形成(例如)蛋白质
‑
药物偶联物。业内需要允许商业规模生产这些蛋白质
‑
药物偶联物的便捷的合成方法。这些方法可以是现有合成方法的可用替代方法，并且可达成更高的产率、更高的纯度、消除杂质(例如诱变杂质)、减少废物流或上述的任何组合。
[0007]因此，需要用于治疗流行性感冒的新疗法和合成这类疗法的方法。

技术实现思路

[0008]本公开涉及用于合成蛋白质
‑
药物偶联物的方法和中间体。特定来说，这类偶联物含有与Fc单体、Fc结构域或白蛋白偶联的抑制流行性感冒病毒的部分(例如，部分的单体或二聚体)。在一些实施方案中，部分为病毒神经氨酸酶的抑制剂(例如扎那米韦或其类似
物)。偶联物中的神经氨酸酶抑制剂(例如扎那米韦或其类似物)靶向病毒颗粒表面上的神经氨酸酶。偶联物中的Fc单体或Fc结构域结合到免疫细胞(例如嗜中性粒细胞)上的FcγR(例如FcRn、FcγRI、FcγRIIa、FcγRIIc、FcγRIIIa和FcγRIIIb)，以活化吞噬作用和效应功能，例如抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)，由此引起免疫细胞吞噬并破坏病毒颗粒，并且进一步增强偶联物的抗病毒活性。白蛋白或白蛋白结合肽可延长偶联物的半衰期，例如通过使白蛋白结合到再循环的新生Fc受体。这类组合物可用于抑制病毒生长的方法中和治疗病毒性感染的方法中，所述感染为例如由流行性感冒病毒(例如甲型流行性感冒病毒、乙型流行性感冒病毒或丙型流行性感冒病毒)引起的感染。
[0009]在一方面中，本公开涉及一种合成式(D
‑
I)或(M
‑
I)的偶联物的方法：
[0010][0011]其中A1和A2各自独立地为抗流行性感冒部分；
[0012]n为1或2；
[0013]每一E包括Fc结构域单体(例如具有SEQ ID NO:1
‑
14中的任一者的序列的Fc结构域单体)或白蛋白；
[0014]L为共价连接到E和共价连接到A1(例如，M
‑
I)或A1和A2(例如，D
‑
I)的接头；
[0015]T为1至20的整数；并且
[0016]式(M
‑
I)或(D
‑
I)中的每一波浪线指示L共价连接(例如借助共价键或接头)到每一E，
[0017]所述方法包括以下步骤：
[0018](a)提供包括E的第一组合物；
[0019](b)提供包括式(DF
‑
I)、(MF
‑
I)的化合物或其盐的第二组合物：
[0020][0021]其中
[0022]L
’
为L的其余部分；
[0023]m为0、1、2、3或4；并且
[0024]每一R独立地为卤基、氰基、硝基、任选地取代的C1‑
C6烷基或任选地取代的C1‑
C6杂烷基；以及
[0025](c)组合所述第一组合物、所述第二组合物和缓冲液以形成混合物。
[0026]在一些实施方案中，每一抗流行性感冒部分为小分子。在一些实施方案中，每一抗流行性感冒部分选自吡莫地韦(pimovidir)、奥司他韦、扎那米韦、磺基扎那米韦(sulfozanamivir)、帕拉米韦、拉尼米韦(laninamivir)、金刚烷胺(amantadine)、金刚乙胺(rimantadine)、巴洛沙韦(baloxavir)(例如，巴洛沙韦酸或巴洛沙韦玛波西酯(baloxavir marboxil))或其类似物。在一些实施方案中，每一抗流行性感冒部分为病毒神经氨酸酶抑
制剂，例如扎那米韦、磺基扎那米韦、帕拉米韦或其类似物。
[0027]在一些实施方案中，化合物为式(D
‑
I)偶联物并且(b)的第二组合物包括式(DF
‑
I)化合物或其盐。
[0028]在一些实施方案中，化合物为式(M
‑
I)偶联物并且(b)的第二组合物包括式(MF
‑
I)化合物或其盐。
[0029]在一方面中，本公开涉及一种合成式(D
‑
I)或(M
‑
I)的偶联物的方法：
[0030][0031]其中每一A1和每一A2独立地选自式(A
‑
I)
‑
(A
‑
XIII)中的任一者(例如，式(A
‑
I)
‑
(A
‑
VIII)或(A...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种合成式(M
‑
I)或(D
‑
I)的偶联物的方法：其中A1和A2各自独立地为抗流行性感冒部分；n为1或2；每一E包括Fc结构域单体或白蛋白；L为共价连接到E和共价连接到A1或A1和A2的接头；T为1至20的整数；并且式(M
‑
I)或(D
‑
I)中的每一波浪线指示L共价连接到每一E，所述方法包括以下步骤：(a)提供包含E的第一组合物；(b)提供包含式(DF
‑
I)、(MF
‑
I)的化合物或其盐的第二组合物：其中L
’
为L的其余部分；m为0、1、2、3或4；并且每一R独立地为卤基、氰基、硝基、任选地取代的C1
‑
C6烷基或任选地取代的C1
‑
C6杂烷基；以及(c)组合所述第一组合物、所述第二组合物和缓冲液以形成混合物。2.如权利要求1所述的方法，其中每一抗流行性感冒部分为小分子。3.如权利要求1或2所述的方法，其中每一抗流行性感冒分子选自吡莫地韦、奥司他韦、扎那米韦、磺基扎那米韦、帕拉米韦、拉尼米韦、金刚烷胺、金刚乙胺、巴洛沙韦或它们的类似物。4.如权利要求1所述的方法，其中每一A1和每一A2独立地选自式(A
‑
I)
‑
(A
‑
XIII)中的任一者：
其中R1选自
‑
OH、
‑
NH2、
‑
NHC(＝NH)NH2和
‑
NHC(＝NH)NHR6；R2和R3各自独立地选自
‑
H、
‑
OH、
‑
F、
‑
Cl和
‑
Br；R4选自
‑
CO2H、
‑
P(＝O)(OH)2、
‑
SO3H；R5选自
‑
COCH3、
‑
COCF3、
‑
SO2CH3；X选自
‑
O
‑
和
‑
S
‑
；Y选自：
R6选自R6选自R6选自R7选自H、C1
‑
C20烷基、C3
‑
C20环烷基、C3
‑
C20杂环烷基；C5
‑
C15芳基和C2
‑
C15杂芳基；R8选自C3
‑
C20杂环烷基、C5
‑
C15芳基和C2
‑
C15杂芳基；R9选自
‑
H、卤素(例如Cl或F)、
‑
OR10、
‑
NHC(＝O)R7、任选地取代的C1
‑
C20烷基、C3
‑
C20
环烷基、C3
‑
C20杂环烷基；C5
‑
C15芳基和C2
‑
C15杂芳基；并且R10选自C1
‑
C20烷基、C3
‑
C20环烷基、C3
‑
C20杂环烷基；C5
‑
C15芳基和C2
‑
C15杂芳基；n为1或2；每一E包含Fc结构域单体或白蛋白；L为接头；T为1至20的整数；并且每一波浪线指示L共价连接到每一E。5.一种合成式(M
‑
I)或(D
‑
I)的偶联物或其药学上可接受的盐的方法：其中每一A1和每一A2独立地选自式(A
‑
I)
‑
(A
‑
XIII)中的任一者：
其中R1选自
‑
OH、
‑
NH2、
‑
NHC(＝NH)NH2和
‑
NHC(＝NH)NHR6；R2和R3各自独立地选自
‑
H、
‑
OH、
‑
F、
‑
Cl和
‑
Br；R4选自
‑
CO2H、
‑
P(＝O)(OH)2、
‑
SO3H；R5选自
‑
COCH3、
‑
COCF3、
‑
SO2CH3；X选自
‑
O
‑
和
‑
S
‑
；Y选自：R6选自R6选自
R7选自H、C1
‑
C20烷基、C3
‑
C20环烷基、C3
‑
C20杂环烷基；C5
‑
C15芳基和C2
‑
C15杂芳基；R8选自C3
‑
C20杂环烷基、C5
‑
C15芳基和C2
‑
C15杂芳基；R9选自
‑
H、卤素(例如Cl或F)、
‑
OR10、
‑
NHC(＝O)R7、任选地取代的C1
‑
C20烷基、C3
‑
C20环烷基、C3
‑
C20杂环烷基；C5
‑
C15芳基和C2
‑
C15杂芳基；并且R10选自C1
‑
C20烷基、C3
‑
C20环烷基、C3
‑
C20杂环烷基；C5
‑
C15芳基和C2
‑
C15杂芳基；n为1或2；每一E包含Fc结构域单体或白蛋白；L为接头；T为1至20的整数；并且每一波浪线指示L共价连接到每一E，所述方法包括：(a)提供包含E的第一组合物；(b)提供包含式(DF
‑
II)、(MF
‑
II)的化合物或其盐的第二组合物：其中G为任选地取代的C1
‑
C6亚烷基、任选地取代的C1
‑
C6亚杂烷基、任选地取代的C2
‑
C6亚烯基、任选地取代的C2
‑
C6亚杂烯基、任选地取代的C2
‑
C6亚炔基、任选地取代的C2
‑
C6亚杂炔基、任选地取代的C3
‑
C10亚环烷基、任选地取代的C2
‑
C10亚杂环烷基、任选地取代的C6
‑
C10亚芳基或任选地取代的C2
‑
C10亚杂芳基；L
’‑
G
‑
L”为L的其余部分；m为0、1、2、3或4；并且每一R独立地为卤基、氰基、硝基、任选地取代的C1
‑
C6烷基或任选地取代的C1
‑
C6杂烷基；以及(c)组合所述第一组合物、所述第二组合物和缓冲液以形成混合物。
6.如权利要求1
‑
5中任一项所述的方法，其中每一R为卤基。7.如权利要求6所述的方法，其中每一R独立地为F、Cl、Br或I。8.如权利要求7所述的方法，其中每一R为F。9.如权利要求1
‑
8中任一项所述的方法，其中m为1、2、3、4或5。10.如权利要求9所述的方法，其中m为3或4。11.如权利要求1
‑
10中任一项所述的方法，其中m为3。12.如权利要求11所述的方法，其中为为13.如权利要求12所述的方法，其中为14.如权利要求1
‑
10中任一项所述的方法，其中m为4。15.如权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：A，
申请(专利权)人：奇达拉治疗公司，
类型：发明
国别省市：