本发明专利技术涉及一种利用高效液相色谱法检测阿莫西林原料药中有关物质的方法，属于药物分析领域。本方法检测波长为210nm，利用十八烷基键合硅胶色谱柱，0.05mol/L磷酸盐缓冲液
【技术实现步骤摘要】
一种阿莫西林原料药有关物质的检测方法
[0001]本专利技术涉及一种利用高效液相色谱法检测阿莫西林原料药中有关物质的方法，属于药物分析领域。
技术介绍
[0002]阿莫西林属于β
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内酰胺类的抗生素，其分子结构中含有β
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内酰胺的结构母核，该结构特征容易被亲核基团进攻开环，发生水解、聚合、取代等降解反应，从而导致主药降解，杂质增多，需要操作简单、杂质检出数量多、灵敏度高、分离度高的杂质检测方法。本专利技术即主要针对阿莫西林原料药主要杂质进行分析。
[0003]中国专利CN108693292A公开了一种阿莫西林胶囊杂质的UPLC检测方法，所述UPLC检测方法选择230nm为检测波长，以磷酸盐缓冲液
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乙腈为流动相，梯度洗脱，可以同时检测阿莫西林胶囊中杂质A、B、C、D、E、F、G、H、I、J和M。UPLC为超高效液相色谱，其灵敏度高，检测杂质全面，但是超高效液相色谱仪维护成本高，可能会由于实验过程中仪器内部压力过大等原因，造成老化速度快等问题，且仪器较为昂贵，还不能普及。
[0004]中国专利CN107589212A公开了一种阿莫西林胶囊有关物质的检测方法，在254波长下检测，流动相A为0.05mol/L磷酸盐缓冲液和乙腈；流动相B为0.05mol/L磷酸盐缓冲液和乙腈，线性梯度洗脱。但是该方法针对于阿莫西林胶囊有关物质的检测，且未公开检测出杂质的种类和数量，以及分离度等数据，检测效果没有呈现。
技术实现思路
[0005]为解决以上技术问题，本专利技术采用高效液相色谱法对阿莫西林原料药中的有关物质进行检测，可用于阿莫西林原料药及其制剂生产中的质量控制。相比较2020版中国药典以及其他现有技术，该方法检出杂质更多，为进一步研究阿莫西林原料药有关物质提供基础。该方法具灵敏度高，峰型好的特点，且分析方法稳定，有关物质检测限低。
[0006]为了实现本专利技术的目的，专利技术人通过大量试验，最终获得如下技术方案：
[0007]一种利用高效液相色谱法检测阿莫西林原料药中有关物质的方法，所述的高效液相色谱法的色谱条件为：
[0008]色谱柱：十八烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱；
[0009]色谱柱柱温：20～30℃；
[0010]流动相：磷酸盐缓冲液、乙腈、丙酮；
[0011]洗脱方式：梯度洗脱；
[0012]检测波长：210mm。
[0013]进一步的，所述色谱柱为Agilent C18柱，优选为Agilent C18柱4.6
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250mm，5μm。
[0014]进一步的，所述的磷酸盐缓冲液为0.05mol/L的磷酸盐缓冲液，用0.05mol/L磷酸二氢钾溶液和2mol/L氢氧化钾溶液调节pH得到。
[0015]具体的，所述的磷酸盐缓冲液pH值为4.8～5.2，优选为pH＝5.0。
[0016]进一步的，所述流动相的流速为0.8～1.2ml/min，优选为1.0ml/min。
[0017]进一步的，所述的流动相分为流动相A和流动相B；
[0018]所述流动相A为体积比90：10的0.05mol/L磷酸盐缓冲液
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丙酮溶液，
[0019]所述流动相B为体积比80：20的0.05mol/L磷酸盐缓冲液
‑
乙腈溶液。
[0020]进一步的，所述梯度洗脱条件以体积比计算为，流动相A：流动相B＝92～0：8～100。
[0021]进一步的，所述梯度洗脱条件如下：
[0022][0023]9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱柱温为25℃。
[0024]本专利技术所述的一种利用高效液相色谱法检测阿莫西林原料药中有关物质的方法，具体操作步骤如下所述：
[0025]a、取阿莫西林对照品适量，加流动相A溶解，并定量稀释成每1ml中约含阿莫西林(按C
16
H
19
N3O5S计)20μg的对照品溶液；
[0026]b、取阿莫西林系统适用性对照品适量，加流动相A溶解，并定量稀释制成每lml中约含2.0mg的系统适用性溶液；
[0027]c、取阿莫西林原料药适量，加流动相A溶解，并定量稀释制成每1ml中约含阿莫西林(按C
16
H
19
N3O5S计)2.0mg的供试品溶液；
[0028]d、分别取对照品和供试品溶液20μL注入高效液相色谱仪，按照以下色谱条件完成阿莫西林原料药中有关物质的分析检测。
[0029]本专利技术的有益效果在于：
[0030](1)本专利技术优化检测波长、流动相种类和配比，调整梯度洗脱条件，优选出最佳色谱条件，可以有效的检测阿莫西林原料药中有关物质的含量，杂质检出数量多，而且该方法分离度高，重复性及耐用性好，检测限低，操作简单，结果稳定可靠，从而可用于阿莫西林原料药的质量控制，为最终成品的质量提供有效保障。
[0031](2)本专利技术检测方法还检测出了9种未知杂质，为后续进一步研究阿莫西林有关物质的检测以及质量控制提供了新思路，取得了预料不到的技术效果，做出贡献性的研究。
附图说明
[0032]图1空白溶剂的HPLC图谱
[0033]图2系统适用性溶液的HPLC图谱
[0034]图3实施例1有关物质对照品溶液HPLC图谱
[0035]图4实施例1阿莫西林原料药供试品溶液HPLC图谱
具体实施方式
[0036]以下是本专利技术的具体实施例，对本专利技术的技术方案做进一步作描述，但是本专利技术的保护范围并不限于这些实施例。凡是不背离本专利技术构思的改变或等同替代均包括在本专利技术的保护范围之内。
[0037]一、有关物质检查方法学研究与评价
[0038]1.仪器与条件：Waters液相色谱系统，2998检测器，色谱柱：Agilent C18(250
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4.6mm，5μm)；检测波长：210nm；以0.05mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.0)
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丙酮(90：10)为流动相A，以0.05mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.0)
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乙腈(80：20)为流动相B，梯度洗脱，柱温25℃，流速为1.0ml/min，进样量为20μL；
[0039]以体积比计，所述梯度洗脱的设置为：
[0040][0041][0042]2.试验步骤：
[0043]2.1专属性
[0044]1)空白溶剂干扰试验
[0045]取溶解样品用流动相A，注入液相色谱仪，按照上述色谱条件测定，记录色谱图，HPLC图谱见附图1。由附图1可见，空白溶剂中无干扰有关物质检测的杂质峰。
[0046]2)峰定位试验
[0047]取阿莫西林对照品适量，精密称定，加流动相A适量，溶解并稀释制成每1ml中约含4μg的溶液，作为阿莫西林峰定位溶液。
[0048]取阿莫西林杂质A对照品适本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种阿莫西林原料药有关物质的检测方法，其特征在于，所述方法为高效液相色谱法，色谱条件为：色谱柱：十八烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱；色谱柱柱温：20～30℃；流动相：磷酸盐缓冲液、乙腈、丙酮；洗脱方式：梯度洗脱。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱为Agilent C18柱，优选为Agilent C18柱4.6
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250mm，5μm。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的磷酸盐缓冲液为0.05mol/L的磷酸盐缓冲液。4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的磷酸盐缓冲液pH值为4.8～5.2，优选为pH＝5.0。5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相的流速为0.8～1.2m...
【专利技术属性】
技术研发人员：孙霞，刘阿利，田镇，
申请(专利权)人：山东新时代药业有限公司，
类型：发明
国别省市：
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