一种羊脑脑磷脂和卵磷脂的制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种羊脑脑磷脂和卵磷脂的制备方法及其应用，该方法将取回的新鲜羊脑清洗去除表面血迹和杂质，冷冻干燥，冻干后的羊脑粉碎后，过筛，加有机溶剂搅拌提取，合并提取液，抽滤，沉淀自然晾干至有机溶剂完全挥发，将滤液浓缩，加入无水乙醇回流，过滤，滤液静止过夜至分层，抽滤取滤液，浓缩真空或冷冻干燥得到卵磷脂；再加丙酮，脱胆固醇，获得纯卵磷脂，将沉淀物加入氯化钙、搅拌提取，离心，得到沉淀即粗脑磷脂提取物；粗提取物再利用无水乙醇搅拌提取，弃除上清，沉淀再用乙醇溶解，过滤得到沉淀，并在真空或冷冻干燥即得到精致脑磷脂成品，该方法简便、低成本、高效，提取时间段，操作简单，为基于卵磷脂和脑磷脂等活性化合物在开发药物、研制保健品或在化妆品领域应用提供原料以及起到技术支撑。料以及起到技术支撑。料以及起到技术支撑。

【技术实现步骤摘要】
一种羊脑脑磷脂和卵磷脂的制备方法及其应用


[0001]本专利技术涉及一种羊脑脑磷脂和卵磷脂的制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]羊脑、为牛科动物山羊或绵羊的脑髓。《纲目》中记载、羊脑味甘、性温、微毒、归心、肝、肾经、具有补虚健脑、润肤和去皯蹭的作用、中医用于主治体虚头昏、风寒入脑、头疼久不愈、皮肤皲裂、筋伤骨折等症。羊脑中含丰富的抗坏血酸(ascorbic acid)、烟酸(nicotinic acid)、核黄素(ribolavine)、卵磷脂(lecthin)、硫胺素(thiamin)、脑甙脂(cerebroside)、蛋白质和脂肪、以及钙、磷、铁等。据记载、羊脑中的磷脂不仅是构成人体生物膜的重要组成成分,而且是胆碱和必需脂肪酸的原料来源、也参与人体生命代谢。因此、开发这些羊附带产物中的药物潜在价值有着深刻意义。
[0003]脑磷脂和卵磷脂、被广泛应用于食品、医药、化妆品等行业。脑磷脂是良好的天然表面活性剂、具有独特的生物活性和生理功能、无毒、无污染、无刺激、易生物降解而受到国内外科技界和工业界的高度重视、同时脑磷脂作为一种新型的橡胶硫化促进剂和/或防老剂。其需求在逐年增加、但目前纯度大于90％的脑磷脂产品我国尚依赖进口、因此开发出适合我国国情的、低成本、高纯度脑磷脂制备方法、具有重要的经济和社会价值。本实验的完成为哺乳动物脑组织的综合利用开辟了一条可行的途径。
[0004]从对新疆资源的开发利用角度看、地域辽阔、养殖规模大、畜牧资源丰富、但羊脑等部位只被用于食物的制作加工、还有些用于饲料、未被科学的合理利用、导致了丰厚资源的流失。目前关于羊脑磷脂的文献报道和学术论文有限、有关羊脑研究处于初步阶段、羊脑开发缺乏理论基础新疆羊牲畜中有大量未被开发利用的原料、而这些原料中提取出的有效成分可以填补畜牧资源在成药方面的空白。若能从这些未被开发出价值的原料中提取出利于人类健康的活性物质，并充分开发、可节约这些浪费的低廉资源、大大提高经济效益，充利用发新疆畜牧资源、为羊脑研究提供理论指导、为开发羊脑新药奠定基础。
[0005]若生产工艺稳定、可进一步在全疆推广、将各地的粗品一起收购、再由我们进一步加工成精品出售、与制药单位合作销售或出口创汇、不仅仅可以产生良好的经济效益、对合理利用畜牧资源和完善新疆社会经济结构也有不可忽略的影响。
[0006]补充国内外的专利申报情况：以脑磷脂和卵磷脂作为关键词检索得到3篇从天然原料中获得脑磷脂和卵磷脂的有关文件，其中提取方法和分离纯化方法2篇。
[0007]专利申请号200310111541.3，以大豆油为原料，使用了高效液相色谱法提取了脑磷脂和卵磷脂，专利申请号200510060501.X，以蛋黄为原料，次专利获得粗磷脂时，使用了丙酮为脱脂相，分离使用了氧化铝层析柱，薄层色谱TCL分析，使用硅胶柱纯化获得脑磷脂和卵磷脂；专利申请号200410067744.1，以蛋黄为原料，次专利获得粗磷脂时，使用丙酮脱脂后，95％乙醇提取，使用一种混合床离子交换树脂精制，获得了较高纯度的脑磷脂和卵磷脂；
[0008]专利申请号92107768.8以人胎为原料，分离纯化了脑磷脂和卵磷脂；使用了无水
乙醇沉淀法，分层获得了脑磷脂和卵磷脂；然后丙酮沉淀获得了卵磷脂；脑磷脂精致使用了0.5％氯化钙，加热至100℃，取沉淀，浓缩，再用三倍量的无水乙醇沉淀，4℃，沉淀4h，过滤后，沉淀再次溶于乙醚中，4℃，静止12h，过滤后，滤液再加等量的丙酮沉淀，获得高纯度的脑磷脂；获得的脑磷脂和卵磷脂使用在雾化型化妆品中，此产品有利于营养皮肤细胞，抗皱防晒作用。
[0009]在申请号为92107768.8的专利中使用了无水乙醇沉淀法，但是此专利纯化部分反复使用不同的有机溶剂会影响产品活力。
[0010]申请号为200310111541.3，200510060501.X，200410067744.1和201510363668.7的专利使用的药材为大豆，蛋黄和鱼类为主，分离纯化过程使用了高效液相色谱，硅胶柱和离子交换树脂等方法，获得了脑磷脂和卵磷脂；利用这些方法，成本高，提取时间长，操作复杂，制备方法难以扩大，污染性高等缺点。
[0011]有关脑磷脂提取及应用，以脑磷脂关键词检索得到2篇从天然原料中获得脑磷脂的有关文件，其中提取方法和分离纯化方法2篇，有关应用1篇；
[0012]专利申请号201510363668.7以鱼脑为原料，使用了木瓜蛋白酶解法，最后使用了硅胶柱层析获得了脑磷脂，次提取物具有较高的免疫调节活性；
[0013]有关卵磷脂提取及应用，以脑磷脂关键词检索得到20篇从天然原料中获得卵磷脂的有关文件，其中提取方法和分离纯化方法5篇；专利申请号201611027169.1，以鸡蛋蛋黄为原料，使用了超临界二氧化碳萃取法提取了卵磷脂，纯度为98％；专利申请号201410068133.2，以棉粒油皂脚为原料，使用石油醚，TBHQ,V2和CA等有机溶剂一定比例搅拌提取了卵磷脂，富集阶段使用ZnCI2；专利申请号201911392312.0，以蛋黄为原料，以超临界二氧化碳流体法提取了卵磷脂；专利申请号201810705984.1，以油茶饼粕为原料，以硅胶柱色谱分离纯化提取了卵磷脂；专利申请号201510077403.0，以花生为原料，以酶解法和两次超临界萃取获得了卵磷脂，纯度为96％以上；
[0014]以上脑磷脂和卵磷脂提取方法与本专利技术的原料和提取方法不同，本专利技术属于全新一种最简单的提取分离方法。

技术实现思路

[0015]本专利技术的目的在于，提供一种羊脑脑磷脂和卵磷脂的制备方法及其应用，该方法将取回的新鲜羊脑用自来水清洗去除表面血迹和杂质,冷冻干燥，冻干后的羊脑粉碎后，过100目筛，添加有机溶剂搅拌提取，合并提取液，抽滤，沉淀自然晾干至有机溶剂完全挥发，将滤液浓缩，加入无水乙醇回流，过滤，滤液静止过夜至分层，抽滤取滤液，浓缩真空或冷冻干燥得到卵磷脂；再加丙酮，脱胆固醇，获得纯卵磷脂，其产率为2.65
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4.38％,纯度大于93.36％；将沉淀物加入氯化钙、搅拌提取，离心，得到沉淀即粗脑磷脂提取物；粗提取物再利用无水乙醇搅拌提取，弃除上清，沉淀再用95％乙醇中溶解，过滤得到沉淀，并在真空或冷冻干燥即得到精致脑磷脂成品，提取率为0.57
‑
0.77％，纯度大于95.28％。本专利技术充分利用新疆畜牧特色资源，制备脑磷脂和卵磷脂，实现畜牧资源高附加值利用。该方法简便、低成本、高效，提取时间段，操作简单，为基于卵磷脂和脑磷脂等活性化合物在开发药物、研制保健品或在化妆品领域应用提供原料以及起到技术支撑。
[0016]本专利技术所述的一种羊脑脑磷脂和卵磷脂的制备方法，按下列步骤进行：
[0017]a.取新鲜羊脑用自来水清洗去除表面血迹和杂质，于温度
‑
80℃条件下冷冻24h，之后于压力9.5Pa、温度
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80℃下冷冻干燥48h，再将冻干后的羊脑经粉碎机粉碎30s，过40
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种羊脑脑磷脂和卵磷脂的制备方法，其特征在于按下列步骤进行：a. 取新鲜羊脑用自来水清洗去除表面血迹和杂质，于温度
‑
80℃条件下冷冻24 h，之后于压力9.5 Pa、温度
‑ꢀ
80℃下冷冻干燥48 h，再将冻干后的羊脑经粉碎机粉碎30s，过40
‑
100目筛，得到羊脑粉；b. 将步骤a得到的羊脑粉按料液比1:5
‑
1:30添加有机溶剂乙醚、氯仿或石油醚，或体积比2:1的氯仿:甲醇进行搅拌提取3次，每次1
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4h，合并收集3次提取液，备用；c. 将步骤b得到的提取液，利用旋转蒸发仪浓缩至3次提取液体积的1/3，并加入3倍体积量的无水乙醇，温度70℃回流30min，抽滤，弃滤渣，滤液在温度4℃静止过夜至分层；d. 将步骤c得到分层液收集上清，沉淀保存备用，再将上清液抽滤，取滤液，浓缩，真空或冷冻干燥得到粗卵磷脂；e．将步骤d得到的粗卵磷脂加3

【专利技术属性】
技术研发人员：阿布力米提，
申请(专利权)人：中国科学院新疆理化技术研究所，
类型：发明
国别省市：