AMPKγ2蛋白用于预防或治疗心肌梗死后心力衰竭的医药用途制造技术

本发明专利技术公开了AMPKγ2蛋白用于预防或治疗心肌梗死（MI）后心力衰竭(HF)的医药用途，属于医药生物技术领域。AMPKγ2蛋白或其活性片段表达水平与MI之后过度炎症反应导致的不正常的心脏重构而引起的HF相关，全身敲除AMPKγ2的MI小鼠左心室收缩功能显著下降，巨噬细胞浸润显著增加；而全身过表达AMPKγ2的MI小鼠可以减轻MI和巨噬细胞浸润的心功能不全。同时，巨噬细胞特异性敲除AMPKγ2会加剧MI和巨噬细胞浸润的心功能障碍；相反，巨噬细胞特异性过表达AMPKγ2会减轻MI和巨噬细胞浸润的心功能障碍。本发明专利技术为MI后HF的诊断和治疗提供了新的靶点，具有重大的临床意义。具有重大的临床意义。具有重大的临床意义。

【技术实现步骤摘要】
AMPK
γ
2蛋白用于预防或治疗心肌梗死后心力衰竭的医药用途


[0001]本专利技术属于医药生物
，具体涉及AMP活化激酶（AMP
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activated kinase，AMPK）中的调节亚基AMPKγ2的医药用途，更具体的涉及AMPKγ2蛋白用于预防或治疗心肌梗死后心力衰竭的医药用途。

技术介绍

[0002]心血管疾病是主要的健康负担，它仍然是全球最常见的死亡原因，全球疾病负担（GBD）研究估计在全球范围内，2007年至2017年期间心血管疾病死亡总数增加了21.1%，心血管疾病在欧洲每年可导致380多万人死亡。《中国心血管健康与疾病研究报告2021》也指出，心血管疾病在我国发病率和患病率持续增高，已成为居民死亡的首位原因，其中冠心病发病人数占比较大。急性心肌梗死（AMI）是冠心病中最严重的疾病类型，自2002—2018年AMI死亡率总体呈上升态势。虽然经皮冠状动脉介入治疗和冠状动脉搭桥术可使心肌梗死患者从中获益，但是多项临床试验表明，数年内，心肌梗死（MI）之后的心力衰竭（HF）仍然是不可避免和难以处理的问题，在MI后约6年内发生的死亡大多与严重HF有关。HF是MI后的常见情况，且MI后的HF发生率随年龄增长急剧增加。所以有效的开展MI后心肌的保护是预防MI后HF发生和改善MI患者预后的必要条件。研究表明，能量代谢紊乱、促炎途径的激活和细胞外基质的变化，会导致心肌纤维化，这些扩展了MI后左心室重塑。MI后的“不良”或“病理性”重构会使得HF的风险增加并显著降低患者存活率，但其关键的调控机制尚未阐明，有效的靶向治疗药物迄今仍未被发现。因此，明确MI后心衰发生的关键机制，寻找新的预防治疗靶点具有重要的临床意义和社会意义。
[0003]MI触发强烈的炎症反应，对心脏修复至关重要，梗死后重塑的程度取决于梗死面积和心脏修复的质量。炎症通路参与梗死心脏的扩张和纤维化重塑，从而驱动梗死后HF发病机制中的关键事件。急性心肌梗死（AMI）后，骨髓和脾脏中产生的单核细胞在进入血液并募集到损伤的心脏组织。其后，浸润的单核细胞分化成M1巨噬细胞，负责清除损伤组织中的细胞碎片。进而通过分泌的细胞因子，趋化因子和生长因子调控M2巨噬细胞进行组织修复。单核巨噬细胞是先天性免疫系统的多效性细胞，在心脏中对损伤的初始炎症反应和随后的伤口愈合中都是不可或缺的，但是过度的炎症反应可能导致心肌坏死，如何调控和靶向巨噬细胞迁移抑制心肌炎症仍有待研究。AMI后心脏中单核巨噬细胞具有很强的异质性和可塑性。因此，通过阐明心室重塑中的单核巨噬细胞表型转化的分子机制，进行针对性治疗干预，可能是改善MI后结局的重要研究方向。
[0004]AMP活化蛋白激酶（AMPK）是一种保守的丝氨酸/苏氨酸激酶，是调节生物能量代谢的关键细胞能量传感器，AMPK几乎存在于所有真核生物中，发挥抗炎和抗氧化活性。AMPK可作为异源三聚体复合体出现，内含一个催化性α亚单位和调节性β和γ亚单位。每种亚型具有多种同种型（两种α，两种β和三种γ），心脏主要表达α2、β2、γ1和γ2亚型。AMPK已被广泛报道在各种心血管疾病中具有心脏保护作用，如AMPK在肺内皮细胞中在ACE2 Ser680的磷
酸化，使内皮中ACE2表达的增加，对肺动脉高压具有保护作用；AMPK激活通过抑制脂肪生成（ACC1，SREBP1c）、蛋白质合成（mTORC1）和脂解（HSL）以及激活FAO（ACC2）改善胰岛素敏感性，有利于预防和治疗2型糖尿病患者等。此外，AMPK还可通过代谢和非代谢途径保护心肌梗死和心脏衰老。AMPKγ亚基在AMPK活化中具有相当重要的作用。当AMP结合到γ亚单位后，可变构激活复合体，使其变为苏氨酸172位点更易磷酸化的底物，在α亚单位的激活环中更易被主要的上游AMPK激酶磷酸化，γ亚基有利于AMPK的变构化和下游保护基因的表达。并且，研究表明，AMPKγ2通过核易位，抑制核糖体的生物生成，保护心肌缺血/再灌注（I/R）损伤。AMPKγ2的突变与几种疾病发生相关，包括心肌病、沃尔夫
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帕金森
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怀特综合征等。但AMPKγ2是否参与MI的发生和进展尚不清楚。

技术实现思路

[0005]针对上述问题，本专利技术提供AMPKγ2蛋白用于预防或治疗MI后HF的医药用途。专利技术人通过大量实验发现，C57BL/6小鼠MI后，炎症因子INF
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γ表达上升，PRKAG2基因mRNA和蛋白表达均显著下降；体外模拟炎症刺激的细胞实验，也发现PRKAG2基因mRNA和蛋白表达均显著下降。全身敲除AMPKγ2的MI小鼠左心室收缩功能显著下降，巨噬细胞浸润显著增加；而全身过表达AMPKγ2的MI小鼠可以减轻MI和巨噬细胞浸润的心功能不全。同时，巨噬细胞特异性敲除AMPKγ2会加剧MI和巨噬细胞浸润的心功能障碍；相反，巨噬细胞特异性过表达AMPKγ2会减轻MI和巨噬细胞浸润的心功能障碍。细胞学研究发现，si
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AMPKγ2会使得INF
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γ刺激下，巨噬细胞迁移加重和炎症相关蛋白表达增加，而过表达AMPKγ2会减少巨噬细胞迁移和炎症相关蛋白的表达。以上结果表明，AMPKγ2蛋白可以用于预防或治疗MI之后的过度炎症反应导致的不正常的心脏重构而引起的HF。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术提供了如下技术方案。
[0007]本专利技术提供了特异性过表达AMPKγ2蛋白或其活性片段的制剂在制备预防和/或治疗心肌梗死之后过度炎症反应导致的不正常的心脏重构而引起的心力衰竭药物中的用途。
[0008]进一步地，所述特异性过表达AMPKγ2蛋白或其活性片段的制剂包括：（1）AMPKγ2蛋白，或经修饰的AMPKγ2蛋白衍生物，或AMPKγ2蛋白类似物；（2）多核苷酸，所述的多核苷酸能编码AMPKγ2蛋白；（3）表达构建物，所述的表达构建物含有（1）中所述的AMPKγ2蛋白或（2）中所述的多核苷酸；（4）（1）中所述的AMPKγ2蛋白的激动剂；（5）AMPKγ2蛋白的核酸分子或其核酸分子的重组载体或重组细胞；（6）能够上调AMPKγ2蛋白或其活性表达的试剂。
[0009]本专利技术还提供了检测AMPKγ2蛋白或其活性片段表达水平的试剂在制备产品中的用途，其特征在于，所述产品用于MI之后过度炎症反应的预测和/或治疗效果、预后的评估。
[0010]进一步地，以AMPKγ2蛋白或其活性片段作为MI之后过度炎症反应的预测和/或治疗效果、预后评估的标记物。
[0011]更进一步地，所述产品通过检测血液、组织或细胞中的AMPKγ2蛋白或其活性片段表达水平低于参考值时，即可以预测MI之后的心肌损伤及炎症反应，或者评估其治疗效果
或预后。进一步地，所述产品为芯片、制剂或试剂盒。
[0012]本专利技术还提供了一种药物组合物，其含有特异性过表达AMPKγ2蛋白或其活性片段的制剂以及任选的药学上可接受的载体或赋形剂。
[0013]进一步地，所述特异性过表达AMPKγ2蛋白或其活本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.特异性过表达AMPKγ2蛋白或其活性片段的制剂在制备预防和/或治疗心肌梗死之后过度炎症反应导致的不正常的心脏重构而引起的心力衰竭药物中的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述特异性过表达AMPKγ2蛋白或其活性片段的制剂包括：（1）AMPKγ2蛋白，或经修饰的AMPKγ2蛋白衍生物，或AMPKγ2蛋白类似物；（2）多核苷酸，所述的多核苷酸能编码AMPKγ2蛋白；（3）表达构建物，所述的表达构建物含有（1）中所述的AMPKγ2蛋白或（2）中所述的多核苷酸；（4）（1）中所述的AMPKγ2蛋白的激动剂；（5）AMPKγ2蛋白的核酸分子或其核酸分子的重组载体或重组细胞；（6）能够上调AMPKγ2蛋白或其活性表达的试剂。3.检测AMPKγ2蛋白或其活性片段表达水平的试剂在制备产品中的用途，其特征在于，所述产品用于心肌梗死之后过度炎症反应的预测和/或治疗效果、预后的评估。4.根据权利要求3所述的用途，以AMPKγ2蛋白或其活性片段作为心肌梗死之后过度炎症反应的预测和/或治疗效果、预后评估的标记物。5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述产品通过检测血液、组织或细胞中的AMPKγ2蛋白或其活...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩雅玲，闫承慧，侯晶津，宋紫萍，宋海旭，刘丹，
申请(专利权)人：中国人民解放军北部战区总医院，
类型：发明
国别省市：