一种高产L-异亮氨酸的基因工程菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种高产L

【技术实现步骤摘要】
一种高产L
‑
异亮氨酸的基因工程菌及其应用


[0001]本专利技术属于基因工程
，尤其是涉及一种高产L
‑
异亮氨酸的基因工程菌及其应用。

技术介绍

[0002]L
‑
异亮氨酸(L
‑
isoleucine，L
‑
Ile)，又被称为“异白氨酸”，被系统命名为“α
‑
氨基
‑
β
‑
甲基戊酸”，是三大支链氨基酸之一。L
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异亮氨酸的物理性状大多数为白色结晶小片或者是结晶性粉末，其味道无臭但略带有苦味，升华温度为168～170℃，它在食品、医药、化工和饲料领域有广泛应用，随着科技的进步，L
‑
异亮氨酸的需求量在各个领域逐步增加，应用范围同时慢慢扩大。
[0003]目前L
‑
异亮氨酸的生产方法有提取法、化学合成法和发酵法三类，提取法即从蛋白质水解液中分离提取L
‑
异亮氨酸。化学合成法得到的产物通常为四种光学异构体的混合物。要得到天本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高产L
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异亮氨酸的基因工程菌，其特征在于：其在蛋氨酸、赖氨酸双重缺陷突变体菌株基因组中敲除了亮氨酸合成途径关键酶基因LeuA、L
‑2‑
氨基
‑3‑
氧代丁酸合成途径关键酶基因tdh、异源基因ybgE、L
‑
苏氨酸脱氢酶基因yiaY、三羧酸循环局部转录因子iclR和全局转录因子ArcA。2.根据权利要求1所述的一种高产L
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异亮氨酸的基因工程菌，其特征在于：所述LeuA基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；所述tdh基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；所述ybgE基因的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示；所述yiaY基因的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示；所述iclR基因的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示；所述ArcA基因的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示。3.根据权利要求1所述的一种高产L
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异亮氨酸的基因工程菌，其特征在于：所述蛋氨酸、赖氨酸双重缺陷突变体菌株包括大肠杆菌K12，大肠杆菌K12的出发菌株为大肠杆菌MG1655。4.根据权利要求1所述的一种高产L
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异亮氨酸的基因工程菌，其特征在于：所述LeuA、tdh、ybgE、yiaY、iclR和ArcA基因敲除的核苷酸突变片段通过重组PCR获得，扩增LeuA、tdh、ybgE、yiaY、iclR和ArcA核苷酸突变片段的引物序列如SEQ ID No.7
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42所...

【专利技术属性】
技术研发人员：方海田，刘慧燕，魏晓博，张想军，张皓杰，
申请(专利权)人：宁夏大学，
类型：发明
国别省市：