一种产泰乐菌素A的重组菌株及其生产泰乐菌素的方法技术

本公开属于微生物和生物技术领域，具体涉及一种产泰乐菌素A的重组菌株及其生产泰乐菌素的方法。更具体来说，本公开涉及一种重组链霉菌、包含链霉菌的细胞培养物及用途，和生产泰乐菌素的方法。本公开以星海湾链霉菌为出发菌株，增强了星海湾链霉菌中泰乐菌素合成通路关键酶的表达，构建得到了生产泰乐菌素的重组微生物菌株T0771。利用所述重组菌株发酵生产泰乐菌素，可降低副产物泰乐菌素D的产生、使其含量降低至3％以下，并将泰乐菌素C全部转化为泰乐菌素A，因此显著了提升泰乐菌素A的产量及纯度(≥97％)。纯度(≥97％)。纯度(≥97％)。

【技术实现步骤摘要】
一种产泰乐菌素A的重组菌株及其生产泰乐菌素的方法


[0001]本公开属于微生物和生物
，具体涉及一种产泰乐菌素A的重组菌株及其生产泰乐菌素的方法。更具体来说，本公开涉及一种重组链霉菌、包含链霉菌的细胞培养物及用途，和生产泰乐菌素的方法。

技术介绍

[0002]泰乐菌素是由弗氏链霉菌等放线菌产生的一类大环内酯类抗生素，其结构是由一个十六元内酯环和碳霉氨基糖(mycaminose)，红霉糖(mycarose)和6
’‑
脱氧
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D
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阿洛糖(mycinose)三个糖苷配基组成。市售泰乐菌素是多组分的混合物，其中泰乐菌素A占90％，其生物活性最优。鉴于对革兰氏阳性菌、螺旋体、支原体等都有优良的生物活性，泰乐菌素不仅被作为动物饲料药物添加剂，也可作为半合成原料，用于生产活性更好、附加值更高的替米考星和泰万菌素等衍生物，具有良好的国内和国际市场前景。
[0003]泰乐菌素主要是通过微生物发酵合成。在发酵过程中，存在四种主要成分：泰乐菌素A，去碳霉糖的泰乐菌素B，泰乐菌素C(大菌素)和泰乐菌本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种生产泰乐菌素的重组微生物，其中，所述重组微生物与野生型菌株或出发菌株相比，具有如下(a)和/或(b)所示的特性：(a)增强了甲基转移酶酶活性和/或其编码基因的表达水平；(b)增强了细胞色素P450单加氧酶酶活性和/或其编码基因的表达水平。2.根据权利要求1所述的重组微生物，其中，利用启动子stnYp启动所述甲基转移酶编码基因和/或细胞色素P450单加氧酶编码基因的表达；优选地，所述启动子stnYp包含如SEQ ID NO:1所示的序列。3.根据权利要求2所述的重组微生物，其中，串联表达甲基转移酶编码基因和细胞色素P450单加氧酶编码基因，且以启动子stnYp启动所述甲基转移酶编码基因和细胞色素P450单加氧酶编码基因的表达。4.根据权利要求1～3任一项所述的重组微生物，其中，所述甲基转移酶包含如SEQ ID NO:3所示氨基酸序列的多肽，或包含与SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列具有至少90％，可选至少95％，优选至少97％，更优选至少98％，最优选至少99％的序列同一性的序列编码的，且具有或部分具有如SEQ ID NO:3所示氨基酸序列的多肽活性的多肽；和/或，所述细胞色素P450单加氧酶包含如SEQ ID NO:5所示氨基酸序列的多肽，或包含与SEQ ID NO:4所示的核苷酸序列具有至少90％，可选至少95％，优选至少97％，更优选至少98％，最优选至少99％的序列同一性的序列编码的，且具有或部分具有如SEQ ID NO:5所示氨基酸序列的多肽活性的多肽。5.根据权利要求1～4任一项所述的重组微生物，其中，以链霉...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖志宏，厉海笛，黄婷婷，林双君，吕立获，
申请(专利权)人：上海交通大学普洛药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：