一种高产胞嘧啶核苷的基因工程菌及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种高产胞嘧啶核苷的基因工程菌及其应用，属于基因工程技术领域，首先利用基因定点突变的方法构建了大肠杆菌天冬氨酸转氨甲酰酶(ATCase)pyrBI突变体，为别为：M1(H20L)、M2(K60E)、M3(K94E)。然后将大肠杆菌中的胞苷脱氨酶cdd、ATP磷酸核糖基转移酶基因hisG、丙酮酸脱氢酶poxB、尿苷

【技术实现步骤摘要】
一种高产胞嘧啶核苷的基因工程菌及其应用


[0001]本专利技术属于基因工程
，尤其涉及一种高产胞嘧啶核苷的基因工程菌及其应用。

技术介绍

[0002]胞嘧啶核苷，简称胞苷(Cytidine)，是RNA的结构组成部分，在生物体内，与多种重要生化反应有关，起着非常重要的调控作用。胞苷是白色粉末，作为嘧啶核苷，是核苷类功能食品的配料，多用于合成治疗肿瘤和抗病毒的药物。胞苷作为功能食品和药物的原材料，在食品和医药领域发挥着重要作用，市场需求逐年递增。
[0003]目前生产胞苷的方法有化学合成法和生物合成法，其中生物合成法又分为RNA水解法和微生物发酵法。化学合成法在生产过程中一般用到尿苷或胞嘧啶，在一定催化条件下生产形成胞苷。RNA水解法是在酶的作用下水解核糖核酸，然后进行分离提纯而形成胞苷。微生物发酵法主要有直接发酵法、添加前体物发酵法和利用基因重组构建菌株进行发酵。微生物发酵法生产过程简单、周期短、效率高易控制，具有较高的应用价值。因此，为选育可稳定遗传的高产菌株，未来工业化生产胞苷的发展方向是微生物发酵法。/>[0004]微生本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高产胞嘧啶核苷的基因工程菌，其特征在于，构建大肠杆菌ATCase酶pyrBI突变体，然后敲除cdd、hisG、poxB、udk、rihB和pyrI基因，得到基因工程菌；所述大肠杆菌ATCase酶pyrBI突变体为ATCase酶上的His20B突变为Leu20B，或Lys60B突变为Glu60B，或Lys94B突变为Glu94B。2.根据权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，所述大肠杆菌包括大肠杆菌K12。3.根据权利要求2所述的基因工程菌，其特征在于，所述大肠杆菌K12的出发菌株为大肠杆菌MG1655。4.根据权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，利用CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术将所述基因敲除。5.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述cdd基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；所述hisG基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；所述poxB基因的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示；所述udk基因的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示；所述rihB基因的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示；所述pyrI基因的核苷酸序列如SEQ...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘慧燕，柳凤敏，方海田，魏晓博，叶彤，马聪，
申请(专利权)人：宁夏大学，
类型：发明
国别省市：