核糖体结合序列的筛选及其在肌醇重组菌构建中的应用制造技术

本发明专利技术通过构建RBS筛选库和高通量筛选方法，得到协调肌醇代谢通路关键基因的RBS序列，并用其构建了发酵生产肌醇的重组菌株。使得肌醇发酵菌株的产量获得极大提升，对肌醇生产具有重要的经济价值和科学研究价值。有重要的经济价值和科学研究价值。有重要的经济价值和科学研究价值。

【技术实现步骤摘要】
核糖体结合序列的筛选及其在肌醇重组菌构建中的应用


[0001]本专利技术属于生物
，特别涉及一种肌醇代谢途径的基因调控元件和肌醇生产菌种构建。

技术介绍

[0002]肌醇是合成鲨肌醇、糖醛酸的前体，广泛分布在动物和植物体内，是动物和微生物的生长因子。肌醇有多个顺反异构体，天然存在的异构体为顺
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1,2,3,5
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反
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4,6
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环己六醇。有几种不同途径生产肌醇。一、在酸/碱性条件下水解肌醇六磷酸生产肌醇，缺点是酸/碱容易造成环境污染。二、以米糠、饼粕为原料生产肌醇，从米糠或麸皮中提取植酸钙，经过加压水解生产肌醇，缺点是生产效率低，生产设备要求高，易造成环境污染。三、体外四种酶级联反应生产肌醇，缺点是制备酶的成本高。首先，淀粉经过α
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葡聚糖(或麦芽糖糊精)磷酸化酶和磷酸葡萄糖变位酶催化得到葡萄糖
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磷酸(G
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P)，再经过肌醇
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磷酸合酶(IPS)、肌醇单磷酸酶(IMP)级联催化得到肌本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种核糖体结合序列(RBS)，其含有下述核苷酸序列：M1
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RBS：TCGTCGAG；M2
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RBS：GCTTAAGG；M3
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RBS：GCGTATCC；M4
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RBS：CAGGACAC；M5
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RBS：GCAGATGC；M6
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RBS：TTTCACAC；M7
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RBS：TCATTCGA；优选M4
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RBS所示的核苷酸序列。2.一种含有权利要求1所述核糖体结合序列的表达盒。3.权利要求1所述核糖体结合序列在构建肌醇生产菌中的应用。4.一种用权利要求1所述核糖体结合序列构建肌醇生产菌的方法，其特征在于，肌醇
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磷酸合酶基因(ips)、肌醇单磷酸酶基因(imp)和甘油激酶基因(glpK)的核糖体结合序列含有下述核苷酸序列：M1
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RBS：TCGTCGAG；M2
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RBS：GCTTAAGG；M3
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RBS：GCGTATCC；M4
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RBS：CAGGACAC；M5
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RBS：GCAGATGC；M6
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RBS：TTTCACAC；M7
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【专利技术属性】
技术研发人员：姚臻豪，郑华宝，
申请(专利权)人：杭州欧合生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：