太子参环肽B体内生物合成表达载体及构建方法和合成方法技术

本发明专利技术公开了一种太子参环肽B体内生物合成表达载体及构建方法和合成方法，本发明专利技术选择GmPOPB作为体内合成环肽HB的蛋白酶，构建了pET28a

【技术实现步骤摘要】
太子参环肽B体内生物合成表达载体及构建方法和合成方法


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种太子参环肽B体内生物合成表达载体及构建方法和合成方法。

技术介绍

[0002]植物环肽是植物生命周期不同时期合成的一类重要天然产物，研究表明从各种植物分离的环肽在抗虫、抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗凝、免疫抑制、舒张血管等方面具有良好的生物活性，具有重要开发价值。直接从植物中提取环肽不仅步骤繁琐，而且提取的总植物环肽中环肽种类繁多不易分离，同时直接提取成本也较高。生物法体外催化合成环肽较于传统从植物中提取环肽，简化了实验步骤，可以得到想要的单一种类的环肽，但是不适用于大规模制备环肽。虽然已经实现了制备线性肽底物，但合成环肽的成本依然较高。

技术实现思路

[0003]为了解决现有技术存在的上述不足，本专利技术的目的是提供一种太子参环肽B体内生物合成表达载体及构建方法和合成方法，以解决现有环肽合成过程复杂，成本高，不能大规模制备的问题。
[0004]本专利技术解决上述技术问题的技术方案如下：提供一种太子参环肽B体内生物合成表达本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种太子参环肽B体内生物合成表达载体，其特征在于，包括：质粒、基因MBP、基因TEV、TEVsite和HB序列、基因GmPOPB和启动子J23100，连接顺序为质粒
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MBP
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TEVsite
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TEV
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TEVsite
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HB
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J23100
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GmPOPB。2.根据权利要求1所述的太子参环肽B体内生物合成表达载体，其特征在于，质粒为pET28a。3.权利要求1或2所述的太子参环肽B体内生物合成表达载体的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)PCR扩增基因MBP，并在其末端引入TEVsite序列，得到MBP
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TEVsite；(2)利用PCR技术在TEV基因末端加入TEVsite和HB序列，得到TEV
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TEVsite
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HB；(3)将质粒与步骤(1)和步骤(2)所得片段连接，得到质粒
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MBP
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TEVsite
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TEV
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TEVsite
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HB；(4)利用PCR技术在GmPOPB基因的N端引入启动子J23100序列，得到J23100
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GmPOPB；(5)在质粒
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MBP
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TEVsite
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TEV
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TEVsite
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HB终止密码子的末端通过重组连接的方法插入J23100
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GmPOPB，得到表达载体质粒
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MBP
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TEVsite
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TEV
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TEVsite
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HB
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J23100
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GmPOPB。4.采用权...

【专利技术属性】
技术研发人员：张燎原，孟婷，陈登辉，张基明，叶秋丽，古力，张重义，
申请(专利权)人：福建农林大学，
类型：发明
国别省市：