WTAP蛋白作为急性电离辐射损伤标志物的应用制造技术

本发明专利技术公开了WTAP蛋白作为急性电离辐射损伤标志物的应用。本发明专利技术提供了WTAP蛋白核质穿梭作为标记物在制备用于鉴定或辅助鉴定急性电离辐射损伤的产品中的应用。本发明专利技术研究发现WTAP蛋白在急性电离辐射刺激后，核质穿梭发生改变，WTAP蛋白从细胞质中进入细胞核内，细胞核中WTAP蛋白增多，细胞质中的WTAP蛋白减少。本发明专利技术可用于辅助判断对象是否遭受了电离辐射，有助于提高如核泄漏事故时受辐射人员进行快速准确的评估，对后续有效地分类诊断和确定临床治疗方案具有重要意义。定临床治疗方案具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
WTAP蛋白作为急性电离辐射损伤标志物的应用


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及WTAP蛋白作为急性电离辐射损伤标志物的应用。

技术介绍

[0002]近年来，核技术广泛应用于人类生活的方方面面，例如医疗领域的放射治疗和放射诊断以及食品加工领域的食品杀菌等。但核技术在带来利益的同时，也加大了核事故发生的可能性。一旦发生大规模核事故，在事故发生的早期，对疑似的受辐射人员进行快速准确的判断，有利于后续有效地分类诊断和确定临床治疗方案，具有十分重要的意义。
[0003]目前，常用的辐射生物标志物主要包括：染色体畸变分析、外周血淋巴细胞计数、γ
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H2AX分析等。然而，现有的辐射生物标志物无法在大规模辐射事故早期为疑似的受辐射人员做出快速高效的判断，因此，寻找新的辐射生物标志物成为近年来辐射生物学家不懈努力的目标。辐射分子标志物的研究领域可分为四个组学方向：基因组学、转录组学、代谢组学和蛋白质组学。基因组学研究主要包括基因突变分析和DNA修饰分析等。通过对原子弹爆炸幸存者进行基因突变分析，研究者发现受照剂量越高，GPA突变指数越大。同时，通过DNA修饰分析，研究者发现辐射可引起全基因组DNA低甲基化，且具有剂量依赖性、性别差异性、组织特异性。但基因组学的分析方法仍存在个体差异大，自发率高等问题。随着研究手段的不断提高，转录组学也被逐渐应用于辐射分子标志物的研究。多分子表达谱分析实现了高通量检测mRNA水平变化，推动了辐射敏感基因mRNA和miRNA作为辐射分子标志物的探索研究。代谢组学研究主要是以动物模型和临床患者的血清或尿液为主，鉴定多种受放射调节的差异代谢物，探索潜在的放射损伤标志物。其过程易受到饮食、个体差异、性别和环境因素的影响。蛋白质组学研究主要以应激响应分子、炎症因子、细胞凋亡和DNA损伤修复相关分子为主，其中以γH2AX聚集点分析作为放射损伤标志物的研究较为系统。但其缺点是镜检繁琐，通量低。
[0004]m6A修饰是核苷酸中的腺嘌呤第六位N发生甲基化修饰，是一种动态可逆的修饰方式。随着对m6A修饰的不断研究，科学家们发现m6A修饰及相关酶参与了多种生物学进程。通过m6A修饰甲基化酶和去甲基化酶，以及结合蛋白的作用，m6A修饰对RNA加工、核输出、翻译、降解和RNA
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蛋白质相互作用等过程发挥了调控作用。也不断有研究表明，m6A修饰在各种癌症、脂肪代谢、生物节律、生殖发育、免疫调节、病毒复制、心肌细胞重塑和应激反应等多种生物过程中发挥重要作用。值得一提的是，m6A修饰作为真核生物RNA修饰中最常见的修饰方式，约占所有RNA修饰的60%，是表观遗传修饰中的研究热点。近年来，不断有研究表明，RNA m6A修饰可对多种刺激因素发生响应，在UV、热刺激、强氧化剂以及电离辐射的影响下，真核细胞内RNA m6A修饰水平发生了明显改变。肾母细胞瘤1
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结合蛋白（WTAP）作为m6A修饰相关的重要甲基转移酶，在细胞核内外均表达。在催化m6A修饰过程中，METTLl4与METTL3形成异二聚，被细胞核内的WTAP招募并结合到mRNA上体发挥催化作用，调控m6A修饰水平的动态变化。从RNA m6A修饰角度入手，探索电离辐射响应的RNA m6A修饰甲基化修饰酶或去甲基
化酶，发掘m6A修饰相关的辐射生物标志物的研究未见报道。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供肾母细胞瘤1
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结合蛋白（WTAP）作为急性电离辐射损伤标志物的应用。
[0006]第一方面，本专利技术要求保护WTAP蛋白核质穿梭作为标志物在如下任一中的应用：（A1）制备用于鉴定或辅助鉴定急性电离辐射损伤的产品；（A2）制备用于检测或辅助检测待测细胞或待测机体是否遭受了急性电离辐射损伤的产品；（A3）制备用于区分或辅助区分急性电离辐射损伤组和正常对照组的产品；所述急性电离辐射损伤组为遭受了急性电离辐射损伤的细胞或机体；所述正常对照组为未经辐射处理的正常细胞或健康机体。
[0007]第二方面，本专利技术要求保护用于检测WTAP蛋白核质穿梭的物质在如下任一中的应用：（A1）制备用于鉴定或辅助鉴定急性电离辐射损伤的产品；（A2）制备用于检测或辅助检测待测细胞或待测机体是否遭受了急性电离辐射损伤的产品；（A3）制备用于区分或辅助区分急性电离辐射损伤组和正常对照组的产品；所述急性电离辐射损伤组为遭受了急性电离辐射损伤的细胞或机体；所述正常对照组为未经辐射处理的正常细胞或健康机体。
[0008]在第一方面和第二方面中，所述用于检测WTAP蛋白核质穿梭的物质可为能够检测WTAP蛋白在细胞核中的表达量和在细胞质中的表达量比值的物质。
[0009]进一步地，所述用于检测WTAP蛋白核质穿梭的物质可由如下（B1）和（B2）组成，或者为如下（B3）：（B1）用于核质分离的试剂和/或仪器；（B2）用于检测WTAP蛋白表达量的试剂和/或仪器；（B3）能够对WTAP蛋白进行原位定量检测的试剂和/或仪器。
[0010]其中，（B1）和（B2）对应核质分离技术；（B3）可对应如免疫荧光技术，其中仪器可如激光扫描共聚焦显微镜。
[0011]在第一方面和第二方面中，所述电离辐射可为γ
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射线照射（如钴60
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γ射线照射）。
[0012]在第一方面和第二方面中，所述电离辐射为5
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10Gy的γ
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射线照射0.5
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24h。
[0013]在本专利技术的具体实施方式中，所述电离辐射对人的细胞处理方式具体为10Gy的γ
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射线（钴60
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γ射线）照射0.5
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4h（如1h），对小鼠的处理方式具体为6.5Gy的γ
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射线（钴60
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γ射线）照射1
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24h（如6h）。
[0014]第三方面，本专利技术要求保护用于鉴定或辅助鉴定急性电离辐射损伤的系统。
[0015]本专利技术要求保护的用于鉴定或辅助鉴定急性电离辐射损伤的系统，可包括：（C1）成套试剂和/或仪器；所述成套试剂和/或仪器具有如下功能：检测WTAP蛋白在细胞核中的表达量和在
细胞质中的表达量比值；（C2）装置；所述装置包括数据输入模块、阈值存储模块、数据比较模块，以及判断模块；所述数据输入模块被配置为输入（C1）检测得到的如下数值：来自于待测细胞或待测机体的WTAP蛋白在细胞核中的表达量和在细胞质中的表达量比值；所述阈值存储模块被配置为存储阈值；所述阈值为来自于未经辐射处理的正常细胞或健康机体的WTAP蛋白在细胞核中的表达量和在细胞质中的表达量比值；所述数据比较模块被配置为接收来自于所述数据输入模块发送的所述（C1）检测得到的数值，并调用所述阈值存储模块中的所述阈值，将所述待测细胞或待测机体的WTAP蛋白在细胞核中的表达量和在细胞质中的表达量比值与所述阈值进行比较；所述判断模块被配置为接收所述数据比较模块本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.WTAP蛋白核质穿梭作为标志物在如下任一中的应用：（A1）制备用于鉴定或辅助鉴定急性电离辐射损伤的产品；（A2）制备用于检测或辅助检测待测细胞或待测机体是否遭受了急性电离辐射损伤的产品；（A3）制备用于区分或辅助区分急性电离辐射损伤组和正常对照组的产品；所述急性电离辐射损伤组为遭受了急性电离辐射损伤的细胞或机体；所述正常对照组为未经辐射处理的正常细胞或健康机体。2.用于检测WTAP蛋白核质穿梭的物质在如下任一中的应用：（A1）制备用于鉴定或辅助鉴定急性电离辐射损伤的产品；（A2）制备用于检测或辅助检测待测细胞或待测机体是否遭受了急性电离辐射损伤的产品；（A3）制备用于区分或辅助区分急性电离辐射损伤组和正常对照组的产品；所述急性电离辐射损伤组为遭受了急性电离辐射损伤的细胞或机体；所述正常对照组为未经辐射处理的正常细胞或健康机体。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述用于检测WTAP蛋白核质穿梭的物质为能够检测WTAP蛋白在细胞核中的表达量和在细胞质中的表达量比值的物质。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述用于检测WTAP蛋白核质穿梭的物质由如下（B1）和（B2）组成，或者为如下（B3）：（B1）用于核质分离的试剂和/或仪器；（B2）用于检测WTAP蛋白表达量的试剂和/或仪器；（B3）能够对WTAP蛋白进行原位定量检测的试剂和/或仪器。5.根据权利要求1
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4中任一所述的应用，其特征在于：所述电离辐射为5
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10Gy的γ
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射线照射0.5
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24h。6.用于鉴定或辅助鉴定急性电离辐射损伤的系统，包括：（C1）成套试剂和/或仪器；所述成套试剂和/或仪器具有如下功能：检测WTAP蛋白在细胞核中的表达量和在细胞质中的表达量...

【专利技术属性】
技术研发人员：周钢桥，卢一鸣，陈红霞，赵曦，张琦，郝荣娇，全婧丹，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，
类型：发明
国别省市：