一种小型猪糖尿病模型的构建方法技术

本发明专利技术提供了一种小型猪糖尿病模型的构建方法，包括分两次向小型猪静脉滴注链脲佐菌素(STZ)溶液的步骤，第一次剂量110～130mg/kg，第二次剂量90～110mg/kg，两次给药间隔25天。本发明专利技术的构建方法制备的小型猪糖尿病模型血糖明显升高，且高血糖持续时间长，在临床上用于糖尿病机理和药物筛选等研究具有非常好的应用潜力。的应用潜力。

【技术实现步骤摘要】
一种小型猪糖尿病模型的构建方法


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种小型猪糖尿病模型的构建方法。

技术介绍

[0002]糖尿病是一组由多病因引发的以慢性高血糖为特征的代谢性疾病。长期的高血糖会导致各种组织(眼、肾、心脏、血管、神经等)慢性损伤，出现功能障碍，引起多种并发症，对健康造成很大的威胁。目前，2型糖尿病病因病机还不完全清楚，已确定的机制包括：(1)随能量慢性富集，外周组织出现脂质过氧化、氧化应激和系统性低水平炎性反应，损伤胰岛素应答信号通路，引起体内血糖调控相关组织如肝脏、骨骼肌和脂肪等出现胰岛素抵抗；(2)胰岛对肠促胰岛素轴的胰高血糖素样肽
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1、葡萄糖依赖性促胰岛素样多肽和中枢神经系统的调控应答失调；(3)糖脂毒性和淀粉样多肽在胰岛沉积，通过氧化应激和内质网应激引起胰腺β细胞凋亡，使胰岛素合成和释放功能受损；(4)胰腺α细胞功能紊乱，肠道菌群代谢功能异常等；但目前依然没有根治糖尿病的方法，因此，对糖尿病病机和治疗手段的进一步探索具有重要的意义。
[0003]动物模型的构建为疾病的机理研究和治疗药物筛选提供了很好的手段。小鼠、大鼠等啮齿类动物成本低、变异小、遗传因素较易控制，长期以来广泛应用于糖尿病发病机制和糖尿病新药的试验与评估研究。但啮齿类动物在基因的同源上与人类基因组相差较多，且其脂质代谢、炎性反应与人类差异较大，用其制备糖尿病模型无法准确反映人类糖尿病的发病机制，以及各项指标的变化，尤其在多发性糖尿病心血管并发症、糖尿病肾病等疾病的研究中。
[0004]小型猪体型小，生长慢，遗传性状稳定，对近交具有较强耐受性，在解剖学、生理学、发病机制方面与人类具有较高相似性。同时，由于小型猪的糖代谢、血液生化指标、血清胰岛素、葡萄糖正常值以及糖耐量实验反应过程与人类相似。链脲佐菌素(STZ)对胰岛β细胞具有选择性毒性作用，对动物机体组织的毒性相对较小，动物存活率高，是目前广泛采用的制备动物糖尿病模型的药物。然而研究表明，猪对STZ不太敏感，可成功诱导大鼠糖尿病的剂量(40mg/kg～60mg/kg)对猪的糖耐受没有明显影响，成功率极低，且个体差异明显；即使提高STZ对猪的使用剂量，高血糖维持和时间也较短，难以确保充足的研究和药物筛选时间。因此糖尿病小猪的模型开发面临着许多挑战。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种小型猪糖尿病模型的构建方法。
[0006]本专利技术提供了一种小型猪糖尿病模型的构建方法，包括如下步骤：
[0007](1)第一次给药：按照110～130mg/kg的STZ的剂量，向小型猪给予STZ溶液；
[0008](2)第二次给药：第一次给药后的第25天，再次按照90～110mg/kg的STZ的剂量，向小型猪给予STZ溶液。
[0009]进一步地，步骤(1)所述STZ的剂量为120mg/kg。
[0010]进一步地，步骤(2)所述STZ的剂量为100mg/kg。
[0011]更进一步地，上述的STZ溶液是STZ和柠檬酸盐的水溶液，pH为4～5。
[0012]更进一步地，上述小型猪为巴马小型猪。
[0013]更进一步地，上述给予是注射或静脉滴注。
[0014]优选地，上述给予是静脉滴注。
[0015]更优选地，上述静脉滴注是匀速静脉滴注25～35min。
[0016]本专利技术还提供了上述的方法构建得到的小型猪糖尿病模型在糖尿病疾病研究中的应用，所述研究是以非疾病的诊断或治疗为目的；
[0017]进一步地，上述研究是筛选防治糖尿病的药物的研究，或糖尿病炎症机制的研究。
[0018]本专利技术所述STZ是指：链脲佐菌素。
[0019]本专利技术的有益效果：
[0020]本专利技术分多次对小型猪进行STZ给药诱导，构建得到小型猪糖尿病模型，血糖明显升高，且高血糖持续时间长，在临床上用于糖尿病机理和药物筛选等研究具有非常好的应用潜力。
[0021]显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
[0022]以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。
具体实施方式
[0023]本专利技术实施例所用小型猪为体重处于12.0～20.0kg的雌性巴马小型猪，购自重庆百斯达生物科技有限公司。
[0024]本专利技术的STZ溶液是将STZ溶于pH4.5制得的柠檬酸盐溶液，现配现用，避光保存，15min～20min内使用完毕。
[0025]除另有说明外，所用原料与设备均为已知产品，通过购买市售产品所得。
[0026]实施例1、本专利技术小型猪糖尿病模型的构建
[0027]将选定的巴马小型猪饲养在普通动物房，对小型猪保定后，按120mg/kg剂量静脉匀速输注STZ溶液约30分钟，输注完毕后第25天，再次按100mg/kg剂量静脉匀速输注STZ溶液约30分钟。
[0028]以下通过实验例证明本专利技术的有益效果。
[0029]实验例1、
[0030]1、实验方法
[0031]4只平行实验小猪按照实施例1的方法建模，另取1只不做处理的小猪作为对照组。第二次输注完毕后，每周监测1
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2次血糖，血糖阈值(空腹血糖≥7.0mmol/L或随机血糖≥11.1mmol/L)，再重复一次血糖(同步监测糖化血红蛋白)，仍达到阈值及以上者合并糖化血红蛋白异常升高，可以确诊为糖尿病。
[0032]2、实验结果
[0033]空腹血糖监测结果如表1所示(第一次给药的日期记为D0，第二次给药日为D25)。
[0034]表1实验组与对照组小猪的空腹血糖(mmol/L)
[0035][0036]从以上数据可以看出，本专利技术方法成功制得了巴马小型猪糖尿病模型，通过两次诱导，巴马小型猪糖尿病模型血糖明显升高，且高血糖持续时间长，在D49血糖仍有8.9
±
0.7，非常适合应用于糖尿病机理和药物筛选研究。
[0037]综上，本专利技术提供了一种小型猪糖尿病模型的构建方法，本专利技术的构建方法制备的小型猪糖尿病模型血糖明显升高，且高血糖持续时间长，在临床上用于糖尿病机理和药物筛选等研究具有非常好的应用潜力。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种小型猪糖尿病模型的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)第一次给药：按照110～130mg/kg的STZ的剂量，向小型猪给予STZ溶液；(2)第二次给药：第一次给药后的第25天，再次按照90～110mg/kg的STZ的剂量，向小型猪给予STZ溶液。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述STZ的剂量为120mg/kg。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述STZ的剂量为100mg/kg。4.如权利要求1～3任一项所述的方法，其特征在于，所述的STZ溶液是STZ和柠檬酸盐的水溶液，pH为4～5...

【专利技术属性】
技术研发人员：张晓利，胡佳，张诗涵，许韬韬，于源，
申请(专利权)人：成都海枫生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：