一种大鼠溃疡性结肠炎模型的构建方法技术

本发明专利技术提供了一种大鼠溃疡性结肠炎模型的构建方法，包括分两次按照150～250mL/kg的剂量给予大鼠不同浓度的葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液的步骤。本发明专利技术方法构建的大鼠溃疡性结肠炎模型可重复性强、模型一致性好，能够成功构建出现炎症以及UC的主要症状，但尚未导致严重的结肠结构变化的轻微的大鼠溃疡性结肠炎模型，非常适于应用于早期轻微溃疡性结肠炎用药筛选和机理研究。选和机理研究。选和机理研究。

【技术实现步骤摘要】
一种大鼠溃疡性结肠炎模型的构建方法


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种大鼠溃疡性结肠炎模型的构建方法。

技术介绍

[0002]炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)是一类由遗传、感染、免疫或环境因素等多种病因引起的、异常免疫介导的肠道慢性炎症性疾病，有终生复发倾向。溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)和克罗恩病(Crohn disease)是其主要的类型。
[0003]溃疡性结肠炎可发生于任何年龄，多见于20～40岁，也可见于儿童或老年，男女发病率无明显差别。近年来，我国溃疡性结肠炎患病率明显增加，其一般起病缓慢，少数急骤，病情轻重不一，好反复发作，病变部位主要累及直肠和乙状结肠，向上发展科延续降结肠甚至全结肠。重症患者呈“铅管样”病变，常伴有多发性假息肉和结肠弥漫性溃疡、易发生癌变。慢性持续性患者往往存在蛋白质丢失和营养不良。急性暴发性患者易肠穿孔、大出血、中毒性巨结肠发生风险，死亡率较高。因此，溃疡性结肠炎严重威胁着人们的健康，但是目前对于此病并无特效药物，且其病因尚不明晰，诱因复杂，又具有反复发作的特点，给治疗带来了更多的难度。
[0004]动物模型的构建为疾病的机理研究和治疗药物筛选提供了很好的手段。目前，溃疡性结肠炎的动物模型建立方法主要分为化学方法、免疫与基因修饰方法两大类。其中化学方法诱导的急慢性UC模型成本低、可控性和重复性强，是最常用的方法，大鼠是用于构建模型的常用动物之一。
[0005]目前以大鼠为对象构建UC模型的化学方法主要是让大鼠自由饮用葡聚糖硫酸钠(DSS)实现。DSS是是由蔗糖合成的一种硫酸多糖体，具有与肝素类似的抗凝血作用。采用自由饮用方式给予大鼠DSS，在连续饮用7天内会引发动物机体免疫反应，导致动物出现腹泻、便血及体重严重下降，同时结肠段出现多灶性溃疡、肠道隐窝破坏、继发性肠道黏膜损伤及黏膜下炎症和浆膜层炎症等急性结肠炎的病理生理特征。例如王倩等人针对不同浓度DSS致剂型溃疡性结肠炎大鼠模型的结果进行了研究比较，即采用让大鼠自由饮用不同浓度的DSS溶液7天构建大鼠UC模型，探讨了DSS溶液浓度对疾病程度的影响(王倩,包永欣.2种质量浓度DSS致急性溃疡性结肠炎大鼠模型的构建与比较[J].广州中医药大学学报,2019,36(04):574
‑
577.DOI:10.13359/j.cnki.gzxbtcm.2019.04.026.)。
[0006]然而，现有的让大鼠自由饮用DSS溶液单次诱导UC的建模方式对病症程度、模型一致性的控制性较差，与实际人类UC疾病仍存在一定差异，难以更为准确有效地反映人类UC的致病原因机理和临床特征；而且，单次采用较低浓度的DSS溶液诱导的模型病情较轻微，因而由于大鼠较强的恢复能力，导致病情持续时间过短，难以达到对早期轻微溃疡性结肠炎进行研究的标准。
[0007]因此，进一步探索可重复性强、模型一致性高，病情轻微且炎症持续时间长的大鼠UC疾病模型，具有非常重要的临床研究意义。

技术实现思路

[0008]本专利技术的目的在于提供一种可重复性强、模型一致性高，病情轻微且炎症持续时间长的大鼠溃疡性结肠炎疾病模型。
[0009]本专利技术提供了一种大鼠溃疡性结肠炎模型的构建方法，包括如下步骤：
[0010](1)第一次给药：按照150～250mL/kg的剂量给予大鼠饮用DSS水溶液，所述DSS水溶液浓度为1～3％；
[0011](2)第二次给药：第一次给药后的第7天，再次按照150～250mL/kg的剂量给予大鼠饮用DSS水溶液，所述DSS水溶液浓度为3～5％；
[0012](3)第二次给药后的第4天后造模结束，得到大鼠溃疡性结肠炎模型。
[0013]进一步地，步骤(1)所述给予DSS水溶液的剂量为200mL/kg。
[0014]进一步地，步骤(1)所述DSS水溶液的浓度为2％。
[0015]进一步地，步骤(2)所述给予DSS水溶液的剂量为200mL/kg。
[0016]进一步地，步骤(2)所述DSS水溶液的浓度为5％。
[0017]更进一步地，上述大鼠在第一次给药前适应性喂养7天。
[0018]更进一步地，上述大鼠在第一次给药至造模结束过程中自由摄取饲料。
[0019]本专利技术还提供了上述的方法构建得到的大鼠溃疡性结肠炎模型在溃疡性结肠炎疾病研究中的应用，所述研究是以非疾病的诊断或治疗为目的；
[0020]进一步地，上述研究是筛选防治溃疡性结肠炎的药物的研究，或溃疡性结肠炎炎症机制的研究。
[0021]更进一步地，上述研究是早期溃疡性结肠炎疾病研究。
[0022]本专利技术的有益效果：
[0023]本专利技术按大鼠体重比例精确控制DSS摄入量，分多次、多浓度对大鼠进行诱导，构建得到大鼠溃疡性结肠炎模型，可重复性强、模型一致性好，能够成功构建出现炎症以及UC的主要症状，但尚未导致严重的结肠结构变化的轻微的大鼠溃疡性结肠炎模型，非常适于应用于早期轻微溃疡性结肠炎用药筛选和机理研究。
[0024]显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
[0025]以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。
附图说明
[0026]图1为试验周期终点各试验组动物结肠长度数据统计图；数据均采用平均值(Mean)
±
标准差(SD)进行统计分析，2％DSS组n＝3，其余组n＝4。
[0027]图2为试验周期终点各试验组动物结肠质量数据统计图；数据均采用平均值(Mean)
±
标准差(SD)进行统计分析，2％DSS组n＝3，其余组n＝4。
[0028]图3为试验周期内各试验组动物DAI评分统计图；数据均采用平均值(Mean)
±
标准差(SD)进行统计分析，2％DSS组n＝3，其余组n＝4。
[0029]图4为试验周期终点模型动物局部中性粒细胞引起炎症的统计图；所有个体数据
均采用平均值(Mean)
±
标准差(SD)进行统计分析，2％DSS组n＝3，其余组n＝4。
具体实施方式
[0030]本专利技术大鼠为SD大鼠，购自北京维通利华实验技术有限公司；生产许可证号：SCXK(浙)2019
‑
0001。
[0031]除另有说明外，所用原料与设备均为已知产品，通过购买市售产品所得。
[0032]实施例1、本专利技术大鼠溃疡性结肠炎模型的构建
[0033]1)模型构建前实验动物适应喂养7天；
[0034]2)D1按照200mL/kg给药剂量给予2％DSS水溶液，饲料自本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种大鼠溃疡性结肠炎模型的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)第一次给药：按照150～250mL/kg的剂量给予大鼠饮用DSS水溶液，所述DSS水溶液浓度为1～3％；(2)第二次给药：第一次给药后的第7天，再次按照150～250mL/kg的剂量给予大鼠饮用DSS水溶液，所述DSS水溶液浓度为3～5％；(3)第二次给药后的第4天后造模结束，得到大鼠溃疡性结肠炎模型。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述给予DSS水溶液的剂量为200mL/kg。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述DSS水溶液的浓度为2％。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述给予DSS水溶液的剂量为...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡佳，许韬韬，张诗涵，张晓利，张利，于源，
申请(专利权)人：成都海枫生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：