本发明专利技术提供一种天然低共熔溶剂超声提取沙棘黄酮类成分的方法，包括：沙棘粉末的制备、天然低共熔溶剂的制备、黄酮类物质提取、HPLC对黄酮类成分分析。本发明专利技术所提供的天然低共熔溶剂超声提取沙棘黄酮类成分的方法，以绿色天然低共熔溶剂作为提取溶剂，克服了水作为溶剂提取不充分，有机溶剂高毒性、高污染，离子液体相较天然低共熔溶剂毒性较大的缺点，并将超声提取有机结合到沙棘黄酮提取中，实现了低成本，低污染绿色环保、快速提取沙棘黄酮类成分，为沙棘的进一步研究奠定基础。为沙棘的进一步研究奠定基础。为沙棘的进一步研究奠定基础。
【技术实现步骤摘要】
一种天然低共熔溶剂超声提取沙棘黄酮类成分的方法
[0001]本专利技术涉及中蒙药提取
，具体涉及一种天然低共熔溶剂（NADESs）超声提取沙棘黄酮类成分的方法。
技术介绍
[0002]沙棘（HippophaerhamnoidesL.）作为一种传统的蒙药，主要遍布于欧洲和亚洲的温带地区。早在《四部医典》就有记载其药用价值。沙棘几千年来一直被作为药食两用，不仅应用于传统配方和现代草药，还用于沙棘饮品，沙棘保健品等。沙棘中黄酮类成分最多，其主要是黄酮醇类，由苷元及其苷类化合物构成，苷元大多数都为山奈酚、异鼠李素、槲皮素等，因具有良好的抗氧化、抗菌、抗炎、抗血糖等活性而被广泛的研究。因此开发一种绿色高效的提取方法以从其中提取沙棘黄酮类成分尤为重要。
[0003]有机溶剂（甲醇、氯仿、乙酸乙酯等）以及水通常被作为传统的提取溶剂。水作为提取溶剂存在提取不充分的问题，然而有机溶剂具有毒性，最终产品中存在痕量溶剂和毒性问题等缺点。随着绿色化学的追求，离子液体被发现，但是离子液体含有有机阳离子和无机阴离子，虽具有熔融温度，Abbott发现氯化胆碱和尿素混合形成一种透明均匀的液体，并命名为低共熔溶剂（deep eutectic solvents, DESs）。低共熔溶剂（DESs）大多数通常包含至少一个氢键受体（HBA）和一个氢键供体（HBD），当成分以一定比例混合时，建立强氢键相互作用并形成均匀稳定的液体。天然低共熔溶剂（natural deep eutectic solvents, NADESs）作为一种绿色溶剂在DESs之后应运而生，具有成本低、易于制备、粘度可调、生物降解性、药学上可接受的毒性和可持续性等许多优点，并可通过调节温度，水含量来克服其粘度高的缺点，从而提高提取率。
[0004]提取黄酮常用的方法有微波提取法、超临界流体法、酶降解法、超声提取法等。超声辅助萃取（ultrasonic aided extraction, UAE）遵循绿色提取原则，其需要的溶剂量更少，运行速度更快，同时克服其他提取方法成本高、提取率低的问题。使用超声波可以增加传质来加速提取，主要由于固体表面附近的不对称气泡塌陷、空腔塌陷通过形成微高速射流导致植物细胞壁破碎，从而使活性物质溶于提取物中。因此，可以通过将环境友好的天然低共熔溶剂（NADESs）与高效的超声辅助萃取（UAE）提取技术结合，从沙棘中快速提取沙棘黄酮类成分。
技术实现思路
[0005]基于此，本专利技术的目的是提供一种天然低共熔溶剂（NADESs）超声提取沙棘黄酮类成分的方法，解决传统提取方法复杂、提取率低、产品中存在痕量溶剂和毒性问题。
[0006]为了实现上述专利技术目的，具体技术方案如下：一种天然低共熔溶剂（NADESs）超声提取沙棘黄酮类成分的方法，包括如下步骤：S1：沙棘粉末的制备：将沙棘进行多次冻干，用多功能粉碎机粉碎后，用100目的筛子进行筛分，置于保鲜袋放于保干器以备用；
S2：天然低共熔溶剂（NADESs）的制备：将氢键供体（HBD）和氢键受体（HBA）按照一定比例均匀混合，在磁力搅拌器上不断加热搅拌，控制温度为80
‑
100℃，直至形成透明均匀的液体且在室温下不会有结晶析出；S3：黄酮类物质提取：将沙棘粉末与S2制备的不同含水量的天然低共熔溶剂（NADESs）按比例混合，超声提取，提取结束后以14000r
·
min
‑1的速度离心5min，得到的上清液即为沙棘黄酮类成分提取液；S4：HPLC对黄酮类成分分析：将S3中的悬浮液用甲醇稀释，使用DionexUltiMate 3000高效液相色谱对黄酮类成分进行定量分析。
[0007]优选地，所述氢键受体与氢键供体的摩尔比为1:1
‑
2。
[0008]优选地，所述S2中氢键供体为多元醇、有机酸、单糖或胺。
[0009]优选地，所述多元醇为1，3
‑
丁二醇、乙二醇或甘油。
[0010]优选地，所述有机酸为乳酸、乙酰丙酸。
[0011]优选地，所述单糖为葡萄糖。
[0012]优选地，所述胺为尿素。
[0013]优选地，所述S2中氢键受体为氯化胆碱、甜菜碱、脯氨酸、薄荷醇和百里香酚。
[0014]优选地，所述S3中含水量为0
‑
40%（v/v），提取时间20
‑
60 min，提取功率120
‑
200 W，液固比20
‑
50 mL
·
g
‑1，提取温度为30
‑
60℃。
[0015]优选地，所述S4中色谱柱为Thermo C
18
柱(4.6 mm
×
250 mm，5μm)；流动相为0.4%磷酸(A)和甲醇(B)，梯度洗脱：0
‑
15 min，0%
‑
49% B；15
‑
25 min，49%
‑
59% B；25
‑
28 min，59%
‑
69% B；28
ꢀ‑
30 min，69%
‑
49% B，柱温30℃，流速1 mL
·
min
‑1，进样量10 μL，检测波长368nm、245 nm。
[0016]本专利技术上述一个或多个技术方案具有如下技术效果：本专利技术所提供的天然低共熔溶剂（NADESs）超声提取沙棘黄酮类成分的方法，以绿色天然低共熔溶剂（NADESs）作为提取溶剂，克服了水作为溶剂提取不充分，有机溶剂高毒性、高污染，离子液体相较天然低共熔溶剂（NADESs）毒性较大的缺点，并将超声提取有机结合到沙棘黄酮提取中，实现了低成本，低污染绿色环保、快速提取沙棘黄酮类成分，为沙棘的进一步研究奠定基础。
附图说明
[0017]为了更清楚地说明本专利技术实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍。
[0018]图1为本专利技术的方法流程图；图2为标准品和沙棘提取物的HPLC色谱图（1
‑
异鼠李素，2
‑
槲皮素，3
‑
山奈酚）；图3为亲水性天然低共熔溶剂、水和60%乙醇对沙棘黄酮的提取率图；图4为疏水性天然低共熔溶剂对沙棘黄酮的提取率图；图5为水含量（a）、提取时间（b）、提取功率（c）、液固比（d）和提取温度（e）对沙棘3种黄酮含量的影响柱状图；
实施方式
[0019]下面将结合本专利技术的附图，对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0020]在整个说明书中，除非另有特别说明，本文使用的术语应理解为如本领域中通常所使用的含义。因此，除非另有定义，本文使用的所有技术和科学术语具有与本专利技术所属领域技术人员的一般理解相同的含义。若存在本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种天然低共熔溶剂超声提取沙棘黄酮类成分的方法，其特征在于，包括如下步骤：S1：沙棘粉末的制备：将沙棘进行多次冻干，用多功能粉碎机粉碎后，用100目的筛子进行筛分，置于保鲜袋放于保干器以备用；S2：天然低共熔溶剂的制备：将氢键供体和氢键受体按照一定比例均匀混合，在磁力搅拌器上不断加热搅拌，控制温度为80
‑
100℃，直至形成透明均匀的液体且在室温下不会有结晶析出；S3：黄酮类物质提取：将沙棘粉末与S2制备的不同含水量的天然低共熔溶剂按比例混合，超声提取，提取结束后以14000r
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min
‑1的速度离心5min，得到的上清液即为沙棘黄酮类成分提取液；S4：HPLC对黄酮类成分分析：将S3中的悬浮液用甲醇稀释，使用DionexUltiMate 3000高效液相色谱对黄酮类成分进行定量分析。2.根据权利要求1所述的天然低共熔溶剂超声提取沙棘黄酮类成分的方法，其特征在于：所述氢键受体与氢键供体的摩尔比为1:1
‑
2。3.根据权利要求1所述的天然低共熔溶剂超声提取沙棘黄酮类成分的方法，其特征在于：所述S2中氢键供体为多元醇、有机酸、单糖或胺。4.根据权利要求2所述的天然低共熔溶剂超声提取沙棘黄酮类成分的方法，其特征在于：所述多元醇为1，3
‑
丁二醇、乙二醇或甘油。5.根据权利要求2所述的天然低共熔溶剂超声提取沙棘黄酮类成分的方法，其特征在于：所述有机酸为乳酸、乙酰丙酸。6.根据权利要求2所述的天然低共熔溶剂超声提取沙棘黄酮类成分的方法，其特征在于：所述单糖为葡萄糖。7.根据权利要求2所述的...
【专利技术属性】
技术研发人员：张艳玲，马佩荣，李政，左佳乐，金玉婷，董阿力德尔图，吴海霞，肖豆鑫，亢静，
申请(专利权)人：内蒙古大学，
类型：发明
国别省市：
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