基于贵金属原位生长的免疫荧光信号增强方法及试剂盒技术

本发明专利技术涉及一种基于贵金属原位生长的免疫荧光信号增强方法及试剂盒，在标志物的位置标记贵金属纳米粒子，并原位生长出贵金属纳米基底，使用空间栅栏使贵金属纳米基底与荧光材料保持恰当的距离，避免荧光的猝灭，实现荧光信号的放大，解决了现在贵金属纳米粒子难以应用于免疫荧光领域的问题。区别于以往的免疫荧光信号增强技术，该技术不需要酶的帮助、不需要特殊标记的二抗、不需要经过核扩增即可实现荧光信号的放大，且信号放大倍数高，可以显著提高检测的灵敏度。提高检测的灵敏度。提高检测的灵敏度。

【技术实现步骤摘要】
基于贵金属原位生长的免疫荧光信号增强方法及试剂盒


[0001]本专利技术涉及免疫荧光检测
，尤其涉及一种基于贵金属原位生长的免疫荧光信号增强方法及试剂盒。

技术介绍

[0002]免疫荧光技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术，可以利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。为了满足检测表达量比较少的抗原的需求，常规的免疫荧光检测灵敏度不够，通常需要对荧光信号进行放大。
[0003]目前免疫荧光领域的信号放大技术主要包括基于抗体的信号放大技术，如基于生物素
‑
亲和素的信号放大技术、基于半抗原(表位标签)的信号放大技术；基于酶促反应的信号放大技术，如酪氨酸信号放大技术(TSA)、Power Styramide信号放大技术(PSA)、酶促进聚多巴胺的超快沉积技术(EASE)；基于纳米粒子的信号放大技术，如金纳米粒子技术；基于核酸的信号放大技术，如基于杂交链反应的信号放大技术(isHCR)、通过交换反应进行信号放大的免疫染色技术(Immuno
‑
SABER)。
[00本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于贵金属原位生长的免疫荧光信号增强方法，其特征在于，包括：S1、样本制备；S2、孵育贵金属纳米粒子标记的反应物；S3、贵金属纳米粒子原位生长形成贵金属纳米基底；S4、在贵金属纳米粒子基底上添加空间栅栏并孵育荧光材料；S5、使用激发光进行荧光成像，获得增强后的免疫荧光信号。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述贵金属纳米粒子包括含有金、银、钌、铑、钯、锇、铱和/或铂元素的纳米粒子。3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述贵金属纳米粒子包括金纳米粒子、银纳米粒子、金核银壳纳米粒子、银核金壳纳米粒子或其组合。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述反应物包括能够定位目标标志物的物质。5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述反应物包括能够定位目标标志物并发生特异性反应的物质。6.如权利要求4或5所述的方法，其特征在于，所述反应物包括抗体、核酸、配体的任意一种或多种组合。7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S3包括：加入含有贵金属离子的反应液和还原剂，以贵金属纳米粒子作为还原反应的起始位点及催化剂进行还原反应生成贵金属，形成贵金属纳米基底。8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述贵金属纳米基底的投影面积为0.5nm2至800000nm2。9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述贵金属纳米基底的投影面积为300nm2至200000nm2。10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述空间栅栏为能够与荧光材料连接，且可以直接或间接与贵金属纳米粒子发生相互作用形成连接的物质；或，所述空间栅栏为与荧光材料一体的，且可以直接或间接与贵金属纳米粒子发生相互作用形成连接的物质。11.如权利要求10所述的方法，其特征在于，所述空间栅栏为能够与荧光材料发生特异性反应，且可以直接或间接与贵金属纳米粒子发生相互作用生成连接键的物质；或，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：盛滔，张亚楠，
申请(专利权)人：上海思路迪生物医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：