【技术实现步骤摘要】
一种生物样本中
γ
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氨基丁酸转氨酶活性测定方法
[0001]本专利技术涉及生物检测分析
,尤其涉及一种生物样本中γ
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氨基丁酸转氨酶活性测定方法。
技术介绍
[0002]γ
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氨基丁酸(GABA)是哺乳动物中枢神经系统内的主要抑制性递质,约50%的中枢突触部位以其作为递质,主要通过与GABA
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A、GABA
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B、GABA
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C受体结合发挥重要的生理活性。GABA的降解主要由GABA转氨酶催化,脱氨基生成琥珀酸半醛,再经琥珀酸半醛脱氢酶催化生成琥珀酸,进入三羧酸循环。增加脑内GABA浓度可以提高GABA能系统的神经抑制作用,进而用于治疗如癫痫、帕金森病、亨廷顿舞蹈症、Alzheimer病等。γ
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氨基丁酸转氨酶(GABA
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T)是催化GABA分解代谢的关键酶,其活力高低直接影响到神经递质GABA的水平,因此在对于疾病进行诊断或是相关中枢神经系统药物的开发过程中,生物样 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种生物样本中γ
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氨基丁酸转氨酶活性测定方法,其特征在于,其包括如下步骤:S1:配制测定溶液所述溶液包括GABA
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T抑制剂溶液、检测缓冲液、细胞裂解缓冲液、NADH系列标准溶液、GABA溶液;S2:绘制标准曲线测定340nm处的NADH系列标准溶液的OD值,绘制标准曲线,且得到回归方程;S3:生物样品前处理所述生物样本为血液时:取血后,室温静置,离心得血清,待检测即可;所述生物样本为细胞/组织样本时:将生物样本加入细胞裂解缓冲液冰上匀浆,离心后将细胞/组织裂解液浓度调整一致,待检测即可;S4:GABAT活性的测定将步骤S3处理后的生物样本、检测缓冲液、GABAT抑制剂溶液加入UV板中后,震荡混匀后,立即向各反应孔中加入GABA溶液,室温避光孵育,在反应的第0和30min测定340nm处每个孔的OD值;所述生物样本、检测缓冲液、GABAT抑制剂溶液加入时,分为三行加入,其中第一行中分别加入有GABAT抑制剂溶液、生物样本、检测缓冲液,第二行中分别加入有生物样本、检测缓冲液,第三行中分别加入有生物样本、检测缓冲液;S5:检测结果处理用第二、三行的所测量的OD均值减去第一行的OD值,即得每个样品中产物的OD绝对值;然后代入步骤S2所得的N...
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