一种编码酰基转移酶的Tri3基因及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种编码酰基转移酶的Tri3基因及其应用，涉及基因工程领域。该Tri3基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，该酰基转移酶可用于抗真菌毒素。该Tri3基因可用于抵抗真菌毒素。为后期提高酿酒酵母抗胶霉毒素及其衍生物和单端孢霉烯类毒素的能力，提升相关真菌毒素的异源表达水平，解析相关真菌毒素作用机制奠定分子生物学基础。奠定分子生物学基础。

【技术实现步骤摘要】
一种编码酰基转移酶的Tri3基因及其应用


[0001]本专利技术涉及基因工程领域，特别是涉及一种编码酰基转移酶的Tri3基因及其应用。

技术介绍

[0002]真菌毒素是产毒真菌在生长过程中产生的一类次生代谢物质，主要包括黄曲霉毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(呕吐毒素)、玉米赤霉烯酮、伏马毒素和赭曲霉毒素等。如何安全合理地利用被毒素污染的粮食作物，维护国家粮食食品质量安全，是一个亟待解决的问题。特别是真菌毒素中的单端孢霉烯族毒素，被认为是最危险的自然发生粮食污染物，已成为国际研究热点。单端孢霉烯族毒素是一大类由镰刀菌产生的化学结构相似的毒性物质的统称，其基本结构为四环的倍半萜，根据取代基的不同，可以分为A、B、C、D四种类型。迄今为止已经发现了大概170种单端孢霉稀族毒素，而A型和B型单端孢霉稀族毒素污染率最高，包括DON、3
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ADON、15
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ADON、NIV、T
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2和DAS毒素等，其中污染率和含量最高的是DON,因此，阻止和减少DON毒素进入人和动物的食物链以防止其危害为主要研究内容。
[0003]同时，胶霉毒素(gliotoxin，GT)是一类二酮哌嗪类化合物(epipolythiodioxopiperazine，ETP)，ETP作为重要的毒力因子，其通过不同途经对各种细胞产生特异性毒性，在侵袭性曲霉病中发挥重要协同作用，因此，胶霉毒素也是重点关注的真菌毒素。ETP发挥毒副作用主要通过二硫键，巯基与靶蛋白的交联进而灭活该蛋白活性，并能通过氧化还原循环产生具有毒害的活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)，ROS生成机制被认为是GT产生细胞毒性的一种机制。胶霉毒素对宿主的毒性主要包括：诱导细胞凋亡；导致氧化还原反应失衡；抑制蛋白酶体活性，导致NF
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κB活性被抑制，降低免疫活性等。它不仅对动植物细胞，而且对宿主菌也有毒性。

技术实现思路

[0004]针对上述问题，本专利技术提供一种编码酰基转移酶的Tri3基因，该Tri3基因可用于抵抗真菌毒素。
[0005]为了达到上述目的，本专利技术提供了一种编码酰基转移酶的Tri3基因，该Tri3基因的核苷酸序列如SEQ ID：1所示，该酰基转移酶可用于抗真菌毒素。
[0006]本专利技术还提供了一种用于抗真菌毒素的酰基转移酶，该酰基转移酶由所述Tri3基因编码得到。
[0007]本专利技术还提供了一种表达载体，该表达载体含有所述Tri3基因。
[0008]在其中一个实施例中，所述表达载体为基因表达盒。
[0009]在其中一个实施例中，所述表达载体的初始载体为YEp352
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TEF1
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CYC1质粒载体。
[0010]本专利技术还提供了一种表达菌株，该表达菌株含有所述表达载体。
[0011]在其中一个实施例中，所述表达菌株的出发菌株为酿酒酵母BJ5464。
[0012]本专利技术还提供了所述Tri3基因在抗真菌毒素中的应用。
[0013]本专利技术还提供了所述Tri3基因在制备抗真菌毒素产品中的应用。
[0014]本专利技术还提供了所述酰基转移酶在抗真菌毒素中的应用。
[0015]本专利技术还提供了所述酰基转移酶在制备抗真菌毒素产品中的应用。
[0016]在其中一个实施例中，所述真菌毒素为胶霉毒素、胶霉毒素衍生物或单端孢霉烯族毒素。
[0017]在其中一个实施例中，所述单端孢霉烯族毒素包括呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和杆孢菌素中的至少1种。
[0018]在其中一个实施例中，所述杆孢菌素为杆孢菌素E。
[0019]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0020]本专利技术的一种编码酰基转移酶的Tri3基因及其应用，该Tri3基因可用于抵抗真菌毒素。为后期提高酿酒酵母抗胶霉毒素及其衍生物和单端孢霉烯类毒素的能力，提升相关真菌毒素的异源表达水平，解析相关真菌毒素作用机制奠定分子生物学基础。
附图说明
[0021]图1为实施例1中以A553 cDNA文库为模板，基因Tri3扩增产物的电泳图；
[0022]图2为实施例2中YEp352
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TEF1
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CYC1载体图谱；
[0023]图3为实施例2中YEp352
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TEF1
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Tri3载体图谱；
[0024]图4为实施例2中含有YEp352
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TEF1
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Tri3质粒的酿酒酵母BJ5464
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D细胞的菌落PCR扩增产物的电泳图；
[0025]图5为实施例2中酿酒酵母BJ5464
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D(YEp352
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TEF1
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CYC1)、酿酒酵母BJ5464
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D(YEp352
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TEF1
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Tri3)在不添加任何毒素的YPD平板、以及含有真菌毒素(包括2.5μM FS140
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12
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2、250μM DON、250μM ZEN和200μM MR4)的YPD平板中培养30h的效果图，其中，平板从左到右依次为：不添加任何毒素的YPD平板、含有2.5μM FS140
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12
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2的YPD平板、含有250μM DON的YPD平板、含有250μM ZEN的YPD平板、含有200μM MR4的YPD平板，每个平板中的A为酿酒酵母BJ5464
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D(YEp352
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TEF1
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CYC1)，C为酿酒酵母BJ5464
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D(YEp352
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TEF1
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Tri3)。
具体实施方式
[0026]为了便于理解本专利技术，下面将参照相关附图对本专利技术进行更全面的描述。附图中给出了本专利技术的较佳实施例。但是，本专利技术可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本专利技术的公开内容的理解更加透彻全面。
[0027]除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本专利技术的
的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本专利技术的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本专利技术。
[0028]本实施例所用试剂、材料、设备如无特殊说明，均为市售来源；实验方法如无特殊说明，均为本领域的常规实验方法。
[0029]实施例1
[0030]一种编码酰基转移酶的Tri3基因序列的获得。
[0031]本专利技术的内生真菌Paramyrothecium roridum A553已于如下文献公开，并可根据
文献中记载内容获得：Wei Ye#,Muzi Zhu#,Saini Li#,Youfei Cen,Taomei Liu,Haohua 本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种编码酰基转移酶的Tri3基因，其特征在于，该Tri3基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，该酰基转移酶可用于抗真菌毒素。2.一种用于抗真菌毒素的酰基转移酶，其特征在于，该酰基转移酶由权利要求1所述Tri3基因编码得到。3.一种表达载体，其特征在于，该表达载体含有权利要求1所述的Tri3基因。4.根据权利要求3所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体的初始载体为YEp352
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TEF1
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CYC1质粒载体。5.一种表达菌株，...

【专利技术属性】
技术研发人员：李少菲，李建军，李赛妮，章卫民，
申请(专利权)人：佛山科学技术学院，
类型：发明
国别省市：