表达H9N2亚型禽流感病毒NA重组蛋白、其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种表达H9N2亚型禽流感病毒NA重组蛋白、其制备方法和应用，涉及免疫检测技术领域。该NA重组蛋白由NA重组质粒诱导表达得到，NA重组质粒包括编码NA的核苷酸序列和表达载体，表达载体为原核表达载体。该NA重组蛋白经纯化后，其SDS‑PAGE和Westernblotting鉴定结果中除重组NA蛋白外，没有明显的杂蛋白，免疫原性好，以此为基础制备得到的抗NA蛋白多克隆抗体的特异性良好，为单克隆抗体的制备提供抗原，为疫苗研发和为建立H9N2亚型AIV NA蛋白血清学鉴定方法提供帮助。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及免疫检测，特别是涉及表达h9n2亚型禽流感病毒na重组蛋白、其制备方法和应用。

技术介绍

1、禽流感病毒(avian influenza virus，aiv)是正粘病毒科a型流感病毒属的一员，由编码10个核心蛋白，和数量可变的辅助蛋白的8个单股负链rna片段包装而成。aiv可分为高致病性禽流感病毒(highly pathogenic avian influenza，hpaiv)和低致病性禽流感病毒(low pathogenic avian influenza，lpaiv)。h9n2亚型aiv最早分离于1966年美国威斯康星州。h9n2亚型lpaiv感染不会在禽类中引起明显的临床症状或死亡，但会增加禽类对其他病原微生物的继发感染，而这些病原微生物可能延迟禽类生长和降低产蛋量，增加其死亡率，所以h9n2亚型lpaiv的流行常常导致重大的经济损失。在亚洲，h9n2亚型aiv在家禽中的流行促进了各种新型禽流感病毒的出现和h9亚型禽流感病毒的进化。不仅如此，h9n2亚型aiv可以将内部基因提供给其他亚型aiv，如h5n1、h5n6、h7n9和h10n8本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种表达H9N2亚型禽流感病毒NA重组蛋白，其特征在于，该NA重组蛋白由NA重组质粒诱导表达得到，所述NA重组质粒包括编码NA的核苷酸序列和表达载体，所述表达载体为原核表达载体。

2.根据权利要求1所述的NA重组蛋白，其特征在于，所述诱导表达的诱导剂为异丙基-β-D-硫代半乳糖苷；

3.根据权利要求1-2中任一项所述的NA重组蛋白，其特征在于，所述原核表达载体为pET-32a。

4.权利要求1-3中任一项所述的NA重组蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将含有所述NA重组质粒的菌液接种至培养基，扩增培养，进行诱导表达。p>

5.根据权...

【技术特征摘要】

1.一种表达h9n2亚型禽流感病毒na重组蛋白，其特征在于，该na重组蛋白由na重组质粒诱导表达得到，所述na重组质粒包括编码na的核苷酸序列和表达载体，所述表达载体为原核表达载体。

2.根据权利要求1所述的na重组蛋白，其特征在于，所述诱导表达的诱导剂为异丙基-β-d-硫代半乳糖苷；

3.根据权利要求1-2中任一项所述的na重组蛋白，其特征在于，所述原核表达载体为pet-32a。

4.权利要求1-3中任一项所述的na重组蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将含有所述na重组质粒的菌液接种至培养基，扩增培养，进行诱导表达。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述诱导表达的诱导剂为异丙基-β-d-硫代半乳糖苷；所述诱导表达的温度为35-39℃，所述诱导表达的诱导剂的工作浓度为1...

【专利技术属性】
技术研发人员：温峰，陈高婕，赖东柔，梁志鹏，黄淑坚，梁昭平，许芬芬，刘兆洁，
申请(专利权)人：佛山科学技术学院，
类型：发明
国别省市：