用于宫颈脱落细胞PCR检测的样本处理方法技术

本发明专利技术涉及一种用于宫颈脱落细胞PCR检测的样本处理方法，采用样本处理试剂，包括处理液、保护液、转化液、第一纯化液、第二纯化液、第三纯化液及收集液，处理液含0.1~0.5N氢氧化钠和4~8mol/L尿素，保护液含1~8mM异硫氰酸胍、0.1~5%SDS、5~150mMTris

【技术实现步骤摘要】
用于宫颈脱落细胞PCR检测的样本处理方法


[0001]本专利技术涉及一种用于宫颈脱落细胞PCR检测的样本处理方法，适用于生物医药体外检测


技术介绍

[0002]宫颈癌是发生在子宫颈部的女性常见的生殖系统恶性肿瘤，是危害女性健康和生命的重要疾病。在宫颈癌的防治中，早期诊断能够显著提高宫颈癌的检出率和患者生存率，目前，宫颈癌普遍采用液基细胞学、阴道镜和组织病理学诊断结合HPV检测进行早期筛查。但是采用以上方法诊断宫颈癌存在较多缺陷，如液基细胞学检查受主观因素影响较大，无法区分宫颈细胞病变级别，而且血液和黏液细胞的重叠会影响异常细胞辨识度，假阴率较高；组织病理学和阴道镜检查不仅取样困难，还会对患者宫颈造成伤害；HPV检测敏感性高、特异性较低，检测阳性结果仅表示存在短暂感染，预测宫颈癌发生与进展的价值还有待进一步确认。
[0003]随着生物技术的不断发展，鉴于已有宫颈癌检测方法的不足，以甲基化分析为代表的表观遗传学和表观基因组学在肿瘤检测中的作用逐渐受到人们的重视。PCR（Polymerase Chain Reaction 聚合酶链式本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于宫颈脱落细胞PCR检测的样本处理方法，其特征在于，采用用于宫颈脱落细胞PCR检测的样本处理试剂，所述处理试剂包括处理液、保护液、转化液、第一纯化液、第二纯化液、第三纯化液以及收集液，所述处理液包括0.1~0.5N氢氧化钠和4~8mol/L尿素，所述保护液包括1~8mM异硫氰酸胍、0.1~5% SDS、5~150mM Tris
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HCl、5~100mM EDTA，所述转化液包括100~500mM亚硫酸氢钠、50~250mM亚硫酸铵、2~15M亚硫酸氢铵、0.1~3M四氢糠醇、1~5mM TEPA、0.1~2M亚硫酸镁；所述处理方法包括：S1、向所述样本中加入所述处理液，涡旋混匀后加入所述保护液，再次涡旋混匀后得到第一产物；S2、向所述第一产物中加入所述转化液，涡旋混匀后置于PCR仪中进行转化，得到第二产物；S3、向所述第二产物中加入混合有磁珠的所述第一纯化液，混匀后置于室温下静置1~6分钟，然后置于磁力架上磁分离1~10分钟，吸弃上清；S4、向步骤S3所得产物中加入所述第二纯化液进行漂洗，所述漂洗方法为涡旋振荡后置于磁力架上磁吸1~10分钟，然后吸弃上清；S5、向步骤S4所得产物中加入所述第三纯化液，涡旋振荡后置于室温下孵育，然后置于磁力架上磁吸1~10分钟，随后吸弃上清；S6、向步骤S5所得产物中加入所述第二纯化液，并按照步骤S4中所述漂洗方法进行漂洗，然后重复一次当前步骤，得到第三产物；S7、将所述第三产物中剩余液体全部吸弃并在室温下晾干，然后加入所述收集液，在室温下静置后置于磁力架上磁分离1~10分钟，吸取上清即得到所需待测样本。2.根据权利要求1所述的用于宫颈脱落细胞PCR检测的样本处理方法，其特征在于，所述第一纯化液包括1~6mM异硫氰酸胍、0.1~0.4%乙二醇乙醚乙酸酯、0.6~1.5...

【专利技术属性】
技术研发人员：王景，杨笑笑，曾鳞，蔡思源，汪强虎，
申请(专利权)人：昂凯生命科技苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：