本发明专利技术公开了一种三七WRKY转录因子基因PnWRKY12的新用途，即其在提高烟草对棕黑腐质霉（Humicola fuscoatra）抗性中的应用，三七WRKY转录因子基因PnWRKY12的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所述，本发明专利技术通过功能基因组学相关技术研究证实PnWRKY12基因具有提高植物抗真菌的功能，将本发明专利技术抗真菌的PnWRKY12基因构建到植物表达载体上并转入烟草中过量表达，转基因烟草植株具有很强的抗真菌侵染能力，实验结果显示超表达PnWRKY12的转基因烟草对棕黑腐质霉的侵染具有高水平的抗性。霉的侵染具有高水平的抗性。霉的侵染具有高水平的抗性。
【技术实现步骤摘要】
三七WRKY转录因子PnWRKY12的应用
[0001]本专利技术属于分子生物学以及基因工程相关
，特别是一种具有抗真菌侵染能力的三七WRKY转录因子PnWRKY12的应用。
技术介绍
[0002]植物生长过程中难免遭受到各种各样病虫害的侵染，这一直是农业生产中一个不容忽视的问题。在与生物胁迫互作的过程中，植物也进化出了独特的免疫系统，主要包括由植物细胞表面模式识别受体（PRRs）识别病原体从而激活的模式触发免疫（PTI）和富含亮氨酸的重复受体（NLR）蛋白识别病原体分泌的效应因子激活的效应触发免疫（ETI）（Ngou BPM, Ding P, Jones JDG. Thirty years of resistance: Zig
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zag through the plant immune system. The Plant Cell, 2022, 34 (5): 1447
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1478）。在植物对病原体的防卫反应过程中，需要转录因子调节各种防御相关基因的表达（Prom LK, Egilla J. Effect of chitinase and thaumatin on mycelial growth of five sorghum [Sorghum bicolor (L.) Moench] grain molding fungi under in vitro conditions. Journal of Tropical Agriculture, 2011, 49: 88/>‑
90）。其中，WRKY转录因子是植物中最大的转录因子家族之一，其N端一般是由WRKYGQK 七肽序列组成的WRKY结构域，C端则是CX4
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5CX22
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23HXH (C2H2)或CX7CX23
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HXC (C2HC)组成的锌指结构（Zou SH, Tang YS, Xu Y, Ji JH, Lu YY, Wang HM, Li QQ, Tang DZ. TuRLK1, a leucine
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rich repeat receptor
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like kinase, is indispensable for stripe rust resistance of YrU1 and confers broad resistance to multiple pathogens. BMC Plant Biology, 2022, 22(1): 280）。
[0003]WRKY转录因子能与靶基因启动子中的W
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box元件结合，调控目标基因表达，在植物的生长发育过程中发挥重要作用（Xin YC, Wang DH, Han SM, Li SX, Gong N, Fan YT, Ji XL. Characterization of the chitinase gene family in mulberry (Morus notabilis) and MnChi18 involved in resistance to Botrytis cinerea. Gene, 2021, 13(1): 98）。水稻（Oryza sativa）中的转录因子OsWRKY50在脱落酸（ABA）处理后被激活，过表达OsWRKY50的水稻株系对ABA介导的种子萌发和幼苗生长起负调控作用（Huang SZ, Hu LJ, Zhang SH, Zhang MX, Jiang WZ, Wu T, Du XL. Rice OsWRKY50 mediates ABA
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dependent seed germination and seedling growth, and ABA
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independent salt stress tolerance. International Journal of Molecular Sciences, 2021, 22(16):8625）。相反，转录因子OsWRKY36与水稻SLR1基因的启动子结合后，促进了GA信号途径负调控因子DELLA蛋白的表达，从而抑制水稻的植株高度和种子大小（Lan J, Lin QB, Zhou CL, Ren YK, Liu X, Miao R, Jing RN, Mou CL, Nguyen T, Zhu XJ, Wang Q, Zhang X, Guo XP, Liu SJ, Jiang L, Wan JM. Small grain and semi
‑
dwarf 3, a WRKY transcription factor, negatively regulates plant height and grain size by stabilizing SLR1 expression in rice. Plant Molecular Biology, 2020, 104(4
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5): 429
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450）。
[0004]WRKY转录因子通过调控植物转录组重新编程以应对不同病原物的入侵。WRKY转录因子上调或抑制靶基因的表达水平，同时参与激素信号通路，还与WRKY转录因子家族的其他成员相互作用。一些WRKY转录因子在植物对病原体的防卫反应中起正调控作用，例如过表达AtWRKY30的拟南芥（Arabidopsis thaliana）株系对黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus, CMV）的抗性增强（Zou LJ, Yang F, Ma YH, Wu QG, Yi KX, Zhang DW. Transcription factor WRKY30 mediates resistance to Cucumber mosaic virus in Arabidopsis. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2019, 517(1): 118
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124）。FvWRKY42的过表达提高了草莓（Fragaria vesca）对白粉病（Powdery mildew）的抗性，并且增强了对盐胁迫和干旱胁迫的耐受程度，也能诱导根的生长和种子萌发，同时上调了转基因草莓株系中PR1的转录水平（Wei W, Cui MY, Hu Y, Gao K, Xie YG, Jiang Y, Feng JY. Ectopic expression of FvWRKY42, a WRKY transcription factor from the diploid woodland strawberry (Fragaria vesca), enhances resistance to powdery mildew, improves osmotic stress resistance, and increases abscisic acid本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种三七WRKY转录因子基因PnWRKY12在提高烟草对棕黑腐质...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘迪秋，王瀚林，顾悦，曲媛，葛锋，
申请(专利权)人：昆明理工大学，
类型：发明
国别省市：
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