用于人5S核糖体DNA拷贝数检测的核酸试剂、试剂盒及多重荧光定量PCR检测方法技术

本公开涉及生物技术领域，具体地，涉及一种用于人5S核糖体DNA拷贝数检测的核酸试剂、试剂盒及多重荧光定量PCR检测方法。所述核酸试剂包括能够特异性扩增人5S核糖体DNA的引物，以及能够特异性扩增珠蛋白基因的引物。本公开提供的核酸试剂、试剂盒及检测方法，以珠蛋白基因作为内参基因，用于人5S核糖体DNA拷贝数检测时，操作简便、系统误差小、准确性高、灵敏度高，适用于大样本数量、大年龄跨度人群的快速检测。的快速检测。的快速检测。

【技术实现步骤摘要】
用于人5S核糖体DNA拷贝数检测的核酸试剂、试剂盒及多重荧光定量PCR检测方法


[0001]本公开涉及生物
，具体地，涉及一种用于人5S核糖体DNA拷贝数检测的核酸试剂、试剂盒及多重荧光定量PCR检测方法。

技术介绍

[0002]核糖体DNA(rDNA)是细胞中最丰富也最重要的管家基因，其主要作用是编码核糖体RNA，从而完成后续的核糖体装配和蛋白质加工。核糖体DNA由于其重复序列的特性，在维持基因组稳定性方面起着重要的作用，并且是真核细胞基因组中最脆弱的区域之一，会影响细胞功能。越来越多的研究表明核糖体生物合成的异常(包括核糖体数量的增加)，与衰老和肿瘤的发生发展密切相关。因此，进行人5S核糖体DNA拷贝数的检测至关重要。然而，目前用于人5S核糖体DNA拷贝数检测的高通量检测方法较少，且方法的准确性和灵敏度仍然有待提升。

技术实现思路

[0003]本公开的目的是克服现有技术中用于人5S核糖体DNA拷贝数检测的高通量检测方法较少，且方法的准确性和灵敏度仍然有待提升的缺陷，提供一种用于人5S核糖体DNA拷贝数检测的核酸试剂、试本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于人5S核糖体DNA拷贝数检测的核酸试剂，其特征在于，所述核酸试剂包括能够特异性扩增人5S核糖体DNA的引物，以及能够特异性扩增珠蛋白基因的引物。2.根据权利要求1所述的核酸试剂，其特征在于，所述能够特异性扩增人5S核糖体DNA的引物包括如SEQIDNO.1
‑
2所示的引物；和/或，所述能够特异性扩增珠蛋白基因的引物包括如SEQIDNO.3
‑
4所示的引物。3.根据权利要求2所述的核酸试剂，其特征在于，SEQIDNO.1所示引物、SEQIDNO.2所示引物、SEQIDNO.3所示引物和SEQIDNO.4所示引物的摩尔比为(1～1.5)∶(1～1.5)∶(0.01～0.015)∶(0.01～0.015)。4.一种用于人5S核糖体DNA拷贝数检测的试剂盒，其特征在于，该试剂盒含有权利要求1～3中任意一项所述的核酸试剂。5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括PCR扩增预混液、参考标准品、参比染料和无酶水；可选地，所述PCR扩增预混液包括反应缓冲液、GreenI、dNTPs、Mg
2+
、rTaqDNA聚合酶以及抗DNA聚合酶抗体的2
×
预混液；可选地，所述参考标准品包括人全血DNA提取物；可选地，所述人全血DNA提取物由不少于3000个人的全血DNA混合得到；可选地，所述参比染料包括ROXreferencedye；可选地，以体积计，所述PCR扩增预混液的用量是所述参比染料用量的100倍以上，优选为500倍。6.一种非诊断目的的人5S核糖体DNA拷贝数的多重荧光定量PCR检测方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)采用多重荧光定量PCR法对待测样本的DNA样品进行扩增和荧光检测，确定所述DNA样品中的人5S核糖体DNA对应的Ct值Ct1，以及内参基因对应的Ct值Ct2，其中，所述内参基因为珠蛋白基因；(2)基于所述DNA样品中所述人5S核糖体DNA对应的Ct值Ct1，以及第一预设标准曲线，确定所述DNA样品中所述人5S核糖体DNA的相对含量R；基于所述DNA样品中所述内参基因对应的...

【专利技术属性】
技术研发人员：王艳华，段化伟，张丽雅，
申请(专利权)人：中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所，
类型：发明
国别省市：