一种注射用交联透明质酸钠凝胶及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种注射用交联透明质酸钠凝胶以及它的制备方法。该方法特征在于透明质酸钠和缩水甘油醚在碱性溶液混合反应形成水不溶性凝胶后，先在去离子水中纯化，破碎为一定大小的颗粒，然后提高去离子水的离子强度，使凝胶颗粒收缩。该方法制备得到的交联透明质酸钠凝胶无菌无热原，且颗粒细小均匀，可作制备美容或医疗用途的注射剂。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药领域，涉及一种注射用交联透明质酸钠凝胶以及它的制备方法。
技术介绍
透明质酸(hyaluronic acid，以下简称HA)是由(l-P-4) D-葡糖醛酸和(l-P-3) 7V-乙酰基-D-氨基葡糖双糖单位重复连接组成的一种链状聚阴离子黏多糖，是构成皮肤、玻璃体、 关节滑液和软骨组织的重要成分，具有独特的理化性质和生物学功能。商品透明质酸钠 (sodiumhyaluronate，以下简称SH)为HA的钠盐，来源于动物组织或微生物发酵，广泛应 用于食品、日化和医药领域，由于纯度的不同，具有食品级、医用级和化妆品级等多种级别 产品。经过长期的研究开发，高纯度的医用级SH已被制成注射剂，应用于眼科手术、骨科 手术、治疗骨性关节炎及类风湿性关节炎和预防术后粘连。此外，由于具有良好的生物相容 性和独特的黏弹性，HA被用于注入面部皮肤，减轻铍纹，改进皮肤外观和结构(RU2272634、 RU2194512)或改进唇部形状，阻止皮肤衰老(RU2159111)。但是，天然的HA容易被肌体 组织中的酶降解，良好的水溶性使其在组织中容易被扩散，因此它在动物组织局部存留的时 间并不令人满意。为了克服天然HA易分散、易降解的缺陷，众多的化合物被用于修饰或交 联天然HA (US4713448、 US4582865、 WO9009401、 W09515168、 US2003114406、 EP1265116 等)，其中采用含縮水甘油醚(环氧基)的化合物交联HA，得到了可注射、毒性小、生物相 容性好的产物，可用于制备眼科玻璃体替代、防粘连、软组织填充以及缓释药物储库等产品。 用1，4-丁二醇二縮水甘油醚(l，4-butanediol diglycidyl ether， BDDE)交联的HA已有交联产 品上市，如法国CORNEAL公司的眼科产品SKGEL⑧和美国Q-MED公司的美容产品 RESTYLANE⑧，在临床应用多年，鲜见毒副作用报道，是安全性较高的交联HA产品。縮水甘油醚交联HA的技术已有多个专利公开(WO8600079、 WO8600912、 WO9704012、 US6852255、 CN1590444等)，其中专利WO026350公开了 BDDE交联HA制备可注射凝胶 的工艺过程，交联剂先溶于碱溶液，再与固体HA混合反应，得到均匀度较好的凝胶，经纯 化后的凝胶通过均质粉碎工艺获得一定粒度的颗粒凝胶，最后灭菌得到成品，在一定推力下， 凝胶颗粒可以经较细的针头(如26 27G)推出。专利CN1590444公开了在酸性或碱性溶液中，縮水甘油醚和HA在较低的温度条件下(15 'C 35'C)反应有利于在反应过程中保护HA大分子链，降低其由于断链而产生的降解。同 时该专利还特别提到采用天津大学BD系列脱蛋白产品纯化HA原料，可以提高产品的质量。本专利技术方法在凝胶纯化和颗粒制备(破碎)方面有独特之处。本专利技术利用交联HA凝胶3产物在不同离子强度水溶液中膨胀系数不同的特性，让交联产物在去离子水中充分膨胀，然 后提高去离子水中离子强度使凝胶收縮，充分除去了未反应物和其它杂质；在凝胶充分膨胀 的状态下使凝胶通过一定大小的筛网，形成粒径较均一颗粒，提高去离子水中离子强度后， 使其收縮形成均匀细腻的可流动凝胶颗粒，与直接采用机械均质将凝胶制成细小颗粒的工艺(WO0206350)相比，具有凝胶颗粒均匀，粒径分布范围小，纯度高，杂质少，不增加重金 属含量等优点。本专利技术采用医用级SH原料，缩水甘油醚为交联剂，在碱性条件下，在40 80。C进行交 联反应和纯化。与CN1590444的方法相比，医用级SH原料市场有售，其纯度高、蛋白残留 极低，无需再次脱蛋白，减少了原料纯化步骤；本专利技术方法所采用的高温反应、高温纯化， 与其常温反应、常温纯化相比，具有工艺简单、耗时短的优点，有利于在生产过程中保持产 品无菌、无热原，可以减少终产品除热原的步骤。试验证明，在碱性条件下，较低温度、长 时间的反应对SH的降解程度并不低于较高温、短时间的反应。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种供注射用的交联SH凝胶的制备方法，以及使用该方法制得的 凝胶制备美容或医疗用途的注射剂。本专利技术注射用交联SH凝胶的制备方法，包括如下步骤① SH和縮水甘油醚在氢氧化钠(NaOH)溶液中混合反应形成凝胶；② 将步骤①得到的凝胶在去离子水中浸泡纯化后破碎为一定大小的凝胶颗粒；③ 提高步骤②中去离子水的离子强度，使凝胶颗粒收縮。 更具体地，本专利技术注射用交联SH凝胶的制备方法，包括如下步骤① 将縮水甘油醚和SH在0.5% 2%的NaOH溶液混合，于40 8(TC保温2 8小时， 得到水不溶性凝胶；② 将步骤①得到的凝胶浸泡于去离子水中，纯化6 12小时，得到体积膨胀的含水凝胶；③ 收集步骤②得到的含水凝胶，使其通过筛孔内径为100 400nm的筛网，得到含水 凝胶颗粒； :提高步骤③得到的含水凝胶颗粒中去离子水的离子强度，40 8(TC保温2 8小时， 含水凝胶颗粒收縮、沉降，得到收縮的含水凝胶颗粒；⑤收集步骤④中收縮的含水凝胶颗粒，灭菌，包装制得成品。本专利技术制备方法中使用的縮水甘油醚为一类带有环氧基活性基团的化合物，在很多场合 被称为环氧树脂稀释剂。本专利技术制备方法中所述的縮水甘油醚可以选用BDDE，也可以选用乙二醇二縮水甘油醚。 其中BDDE是指CA号为2425-79-8的化合物，英文可表示为1 ，4-butanedio1 diglycidyl ether、 1,4-Bis(2，3-epoxypropoxy)butane或1,4國bisglycidyloxybutane。此夕卜，在文献中还有多禾中名称或 简称(縮写)表示，如1,4-丁二醇縮水甘油醚、丁二醇縮水甘油醚、环氧稀释剂D-1402、Amlaite RD-2、 Eqodie750、 WSR隱622、 G96、 JX陽023、 BDGE禾卩BDDE等。乙二醇二縮水甘油醚是指 CA号为2224-15-9的化合物，英文可表示为Ethylene glycol diglycidyl ether 、 l,2-bis(2，3-epoxypropoxy)ethylene、 Glycol diglycidyl ether或2，2'國 bisoxirane。此外，在文献中还有多种名称或简称(缩写)表示，如乙二醇縮水甘油醚环氧稀 释剂D-669， Queto1651, EGDGE等。本专利技术制备方法中所述SH与NaOH溶液的质量体积比可以在5% 50%，优选10% 25%，更优选15% 20%。本专利技术制备方法中所述去离子水为40 80'C的去离子水，优选45 75'C的去离子水，更 优选60 7(TC的去离子水。本专利技术制备方法中所述提高凝胶中去离子水的离子强度的方法为加入渗透压高于300 mOsmol/L的磷酸盐缓冲溶液(PBS)或氯化钠(NaCl)溶液，或直接加入固体NaCl。本专利技术制备方法中所述收集含水水凝胶颗粒的方法可以采用过滤的方法，也可以采用离 心的方法。例如，过滤方法可以采用80 200目(筛孔内径180 75pm)的筛网过滤，离心 方法可以采用2000 5000 rpm离心5 30分钟。本专利技术制备方法中所述灭菌方本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种注射用交联透明质酸钠凝胶的制备方法，包括如下步骤：　①：透明质酸钠和缩水甘油醚在ＮａＯＨ溶液中混合反应形成凝胶；　②：将步骤①得到的凝胶在去离子水中浸泡纯化后破碎为一定大小的凝胶颗粒；　③：提高步骤②中去离子水的离子强 度，使凝胶颗粒收缩。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：凌沛学，陈建英，贺艳丽，郭学平，汪敏，刘杰，刘建建，荣晓花，
申请(专利权)人：凌沛学，
类型：发明
国别省市：88[中国|济南]