火麻仁肽及其制备方法、在制备抑制肾癌细胞增殖的制剂中的应用技术

本发明专利技术涉及火麻仁肽技术领域，尤其是涉及一种火麻仁肽及其制备方法、在制备抑制肾癌细胞增殖的制剂中的应用。火麻仁肽的制备方法，包括如下步骤：(a)火麻仁粕与水的混合浆料在第一酶的作用下进行酶解处理，收集沉淀蒸煮处理后漂洗；(b)将所述漂洗后的沉淀与水混合，在第二酶的作用下进行酶解处理后，灭酶，收集滤液，进行干燥处理。本发明专利技术的制备方法中，以火麻仁粕为原料，具有更好的广泛实用性，且进一步增加了火麻仁的附加值；同时氨基酸丰富程度和营养程度得到显著提高；本发明专利技术的火麻仁肽对肾癌细胞具有显著抑制作用，可用于制备抑制肾癌细胞增殖的制剂等。细胞增殖的制剂等。细胞增殖的制剂等。

【技术实现步骤摘要】
火麻仁肽及其制备方法、在制备抑制肾癌细胞增殖的制剂中的应用


[0001]本专利技术涉及火麻仁肽
，尤其是涉及一种火麻仁肽及其制备方法、在制备抑制肾癌细胞增殖的制剂中的应用。

技术介绍

[0002]火麻又名大麻、汉麻。据文献报道火麻仁比果实更为安全，火麻仁是药食同源的润下药，在临床上主治肠燥便秘、脚气、月经不调及丹毒等症，对心血管系统、消化系统以及中枢系统都有显著疗效。目前火麻仁在市场产品中的应用主要集中在火麻仁整体应用(包括粉碎以粉状应用)以及火麻仁油，产品功能主要集中在润肠通便，随着对火麻仁研究的深入，火麻仁蛋白的研制及功效研究屡见报道，其经典提取方法依然为碱溶酸沉法。
[0003]现有技术中对于火麻仁低聚肽的制备工艺主要集中在酶解制备和发酵制备工艺，酶解制备工艺中以火麻仁粕为原始原料对油脂含量进行了限定如油脂含量低于1％，限制了火麻仁粕的应用，且对其上游的制油也有限制，如压榨、亚临界低温萃取。同时在前处理阶段酶解制备工艺及发酵制备工艺均采用碱溶酸沉工艺提取火麻仁蛋白再进行酶解，可以理解为火麻仁低聚肽或多肽的制备直接原料为火麻仁蛋白。
[0004]据报道显示，对于火麻籽的应用主要集中在火麻油及火麻蛋白，火麻油具有抗氧化、抗炎、延缓衰老等功效，火麻蛋白的功效研究涉及调节血糖、血脂和血小板水平、促进脑组织发育等。
[0005]有鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供火麻仁肽在制备抑制肾癌细胞增殖的制剂中的应用。
[0007]为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：
[0008]火麻仁肽在制备抑制肾癌细胞增殖的制剂中的应用。
[0009]在本专利技术的具体实施方式中，所述肾癌细胞为人肾癌细胞OSRC
‑
2。
[0010]在本专利技术的具体实施方式中，所述火麻仁肽的制备方法，包括如下步骤：
[0011](a)火麻仁粕与水的混合浆料在第一酶的作用下进行酶解处理，收集沉淀蒸煮处理后漂洗；
[0012](b)将所述漂洗后的沉淀与水混合，在第二酶的作用下进行酶解处理后，灭酶，收集滤液，进行干燥处理；
[0013]所述第一酶包括脂肪酶、果胶酶、纤维素酶和半纤维素酶中的任一种或多种；
[0014]所述第二酶包括碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶中的任一种或多种。
[0015]在本专利技术的具体实施方式中，所述混合浆料的制备包括：对火麻仁粕与水的混合物进行粉碎磨浆，然后匀浆2～4h。进一步的，所述火麻仁粕与所述水的料液比为1﹕(2～20)。
[0016]在本专利技术的具体实施方式中，步骤(a)中，所述酶解处理的条件包括：酶解温度为55～65℃，pH为8.5～9.5，酶解时间为0.5～2h。
[0017]在本专利技术的具体实施方式中，所述第一酶中，脂肪酶、果胶酶、纤维素酶和半纤维素酶的质量比为(3.8～4.2)﹕(1.8～2.2)﹕(1.8～2.2)﹕1。
[0018]在本专利技术的具体实施方式中，所述第一酶的用量为底物质量的3.5wt％～5.5wt％。进一步的，所述第一酶中，脂肪酶、果胶酶、纤维素酶和半纤维素酶的用量分别为底物质量的1.8wt％～2.2wt％、0.8wt％～1.2wt％、0.8wt％～1.2wt％、0.4wt％～0.6wt％。
[0019]在本专利技术的具体实施方式中，步骤(a)中，所述蒸煮处理的时间为10～20min。
[0020]在本专利技术的具体实施方式中，所述漂洗包括：采用清水漂洗直至pH为6.5～7.5。
[0021]在本专利技术的具体实施方式中，步骤(b)中，将所述漂洗后的沉淀与水混合包括：向所述漂洗后的沉淀中补水至料液比为1﹕(5～15)。
[0022]在本专利技术的具体实施方式中，步骤(b)中，所述酶解处理的条件包括：酶解温度为45～55℃，pH为6.5～7.5，酶解时间为2～4h。
[0023]在本专利技术的具体实施方式中，所述第二酶中，碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶的质量比为(3.8～4.2)﹕(0.8～1.2)﹕1。
[0024]在本专利技术的具体实施方式中，所述第二酶的用量为底物质量的2.5wt％～4.5wt％。进一步的，所述第二酶中，碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶的用量分别为底物质量的1.8wt％～2.2wt％、0.4wt％～0.6wt％、0.4wt％～0.6wt％。
[0025]在本专利技术的具体实施方式中，所述灭酶包括：灭酶温度为90～100℃，灭酶时间为30～60min。
[0026]在本专利技术的具体实施方式中，所述收集滤液的方式为过滤。进一步的，所述过滤包括板框过滤和/或陶瓷膜过滤。
[0027]在本专利技术的具体实施方式中，所述干燥处理包括：将滤液浓缩处理后，进行喷雾干燥。进一步的，所述喷雾干燥包括：进风温度为180～190℃，出风温度为85～89℃，引风转子功率为30～40Hz，喷头转子功率为16～20Hz。
[0028]在本专利技术的具体实施方式中，所述火麻仁肽中蛋白质含量≥80wt％，多肽含量≥70wt％，灰分≤7.0wt％，≤2000Da肽段含量≥70wt％。优选的，所述火麻仁肽中蛋白质含量≥95wt％，多肽含量≥85wt％，≤2000Da肽段含量≥88wt％，灰分≤3.0wt％；
[0029]所述火麻仁肽中包括苏氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸和赖氨酸七种必需氨基酸。优选的，必需氨基酸的总含量≥21.96％，更优选≥28％。
[0030]在本专利技术的具体实施方式中，所述制剂包括保健食品、功能食品、药物等。
[0031]与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：
[0032](1)本专利技术的制备方法中，在前处理阶段采用酶解法，免去了现有的采用碱溶酸沉提取火麻仁蛋白的工艺，最大限度的保留了火麻仁蛋白中的活性物质，并降低了外源性盐类的带入，保证产品品质；简化工艺，除去酸碱应用，降低工业制备的环保压力。
[0033](2)本专利技术的制备方法中，以火麻仁粕为原料，且不需要对火麻仁粕的含油量(油脂)量等进行限定要求，具有更好的广泛实用性；同时由于火麻仁粕属于火麻仁油制备的下脚料，不影响火麻仁油的制备，属于二次开发利用，进一步增加了火麻仁的附加值。
[0034](3)本专利技术制备得到的火麻仁肽中，蛋白质含量可达≥95wt％，多肽含量可达≥85wt％，≤2000Da肽段含量可达≥88wt％，灰分≤3.0wt％；含有七种必需氨基酸苏氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸，其总含量可达28％；氨基酸丰富程度及营养程度得到显著提高；
[0035](4)本专利技术的火麻仁肽对肾癌细胞具有显著抑制作用，可用于制备抑制肾癌细胞增殖的药物及试剂等等。
附图说明
[0036]为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.火麻仁肽在制备抑制肾癌细胞增殖的制剂中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，所述肾癌细胞为人肾癌细胞OSRC
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2。3.根据权利要求1所述的应用，所述火麻仁肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(a)火麻仁粕与水的混合浆料在第一酶的作用下进行酶解处理，收集沉淀蒸煮处理后漂洗；(b)将所述漂洗后的沉淀与水混合，在第二酶的作用下进行酶解处理后，灭酶，收集滤液，进行干燥处理；所述第一酶包括脂肪酶、果胶酶、纤维素酶和半纤维素酶中的任一种或多种；所述第二酶包括碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶中的任一种或多种。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述混合浆料的制备包括：对火麻仁粕与水的混合物进行粉碎磨浆，然后匀浆2～4h；优选的，所述火麻仁粕与所述水的料液比为1﹕(2～20)。5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤(a)中，所述酶解处理的条件包含如下特征(1)～(3)中的至少一个：(1)酶解温度为55～65℃；(2)pH为8.5～9.5；(3)酶解时间为0.5～2h。6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述第一酶中，脂肪酶、果胶酶、纤维素酶和半纤维素酶的质量比为(3.8～4.2)﹕(1.8～2.2)﹕(1.8～2.2)﹕1；优选的，所述第一酶的用量为底物质量的3.5wt％～5.5wt％；优选的，所述第一酶中，脂肪酶、果胶酶、纤维素酶和半纤维素酶的用量分别为底物质量的1.8wt％～2.2wt％、0.8wt％～1.2wt％、0.8wt％～1.2wt％、0.4wt％～0.6wt％。7.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：莫朝辉，成静，王金，于兰，陈栋梁，江方，
申请(专利权)人：武汉天天好生物制品有限公司，
类型：发明
国别省市：