CK2抑制剂CX4945在制备肿瘤治疗中防止免疫细胞耗竭药物应用、抑制剂及联合物制造技术

本发明专利技术属于生物医药领域，涉及一种CK2抑制剂CX4945在制备肿瘤治疗中防止免疫细胞耗竭药物应用、抑制剂及联合物，本发明专利技术提供的CK2抑制剂可以有效改善肿瘤组织内效应T细胞的耗竭情况，同时增强anti

【技术实现步骤摘要】
CK2抑制剂CX4945在制备肿瘤治疗中防止免疫细胞耗竭药物应用、抑制剂及联合物


[0001]本专利技术属于生物医药领域，涉及一种CK2抑制剂CX4945在制备肿瘤治疗中防止免疫细胞耗竭药物应用、抑制剂及联合物。

技术介绍

[0002]恶性肿瘤是一种正常细胞异常增生和分化，且不受控制的进展性的疾病。目前恶性肿瘤的发病和死亡率持续上升,且大量的晚期肿瘤病人需要长期服药，常规治疗耐药率高，患者预后差。目前免疫治疗作为新兴的肿瘤治疗方式在肿瘤领域有着广泛的应用，其中anti
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PD
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1/PD
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L1药物作为其中的佼佼者在抑制肿瘤增长和改善肿瘤免疫微环境方面有着突出的作用。但是anti
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PD
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1药物在临床上的应用中往往由于其低有效率和耐药导致患者病情进一步加重。
[0003]蛋白激酶CK2，又名酪蛋白激酶2(Casein KinaseⅡ)，是一种普遍存在的蛋白激酶，调节代谢途径、信号转导、转录、翻译和复制。该酶是由三个亚基，α，α '和β组成的四聚全酶。α亚基和α '亚基具有催化作用，β亚基具有调节作用。酶定位于内质网和高尔基体。以往的研究表明，CK2参与到了Th17与Treg细胞的分化，但是在肿瘤组织内CK2对于免疫细胞的功能的影响，尤其对于T细胞耗竭功能的影响，能否通过对蛋白激酶CK2调整实现增强免疫治疗的效果尚未得到验证及解决。

技术实现思路

[0004]本专利技术的主要目的在于提供一种调控蛋白激酶CK2来实现调节肿瘤免疫治疗的目的。
[0005]为了实现上述目的，根据本专利技术的一个方面，提供了CK2抑制剂CX4945在制备肿瘤治疗中防止免疫细胞耗竭的药物的应用。
[0006]本专利技术还提供了一种肿瘤治疗中防止免疫细胞耗竭的抑制剂，所述抑制剂包括CK2抑制剂。
[0007]根据本专利技术提供的所述抑制剂为CX4945。
[0008]本专利技术还提供了一种肿瘤治疗中防止免疫细胞耗竭的联合物，所述联合物包括anti
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PD
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1抗体及CK2抑制剂CX4945。
[0009]本专利技术的有益效果是：CK2抑制剂可以有效改善肿瘤组织内效应T细胞的耗竭情况，同时增强anti
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PD
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1药物的治疗效果。并且药物没有明显副作用，可以制备为肿瘤免疫治疗药物，同时提供了一种新的联合治疗方式。药物可以制备为口服药物，方便治疗，患者依从性高。
附图说明
[0010]构成本申请的一部分的说明书附图用来提供对本专利技术的进一步理解，本专利技术的示
意性实施例及其说明用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的不当限定。在附图中：图1为本专利技术的体外异源二聚体诱导CD8
+
T细胞耗竭的流式细胞图。
[0011]图2为CX4945抑制CD8
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T细胞耗竭的流式细胞图。
[0012]图3为本专利技术CX4945联合anti
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PD
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1有效增强了CD8
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T细胞的功能（与肿瘤细胞共培养）的颗粒霉素B的平均荧光强度。
[0013]图4为本专利技术CX4945联合anti
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PD
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1有效增强了CD8
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T细胞的功能（与肿瘤细胞共培养）的颗粒霉素B的统计图。
[0014]图5为本专利技术CX4945联合anti
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PD
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1有效增强了CD8
+
T细胞的功能（与肿瘤细胞共培养）的干扰素γ的平均荧光强度。
[0015]图6为本专利技术CX4945联合anti
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PD
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1有效增强了CD8
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T细胞的功能（与肿瘤细胞共培养）的干扰素γ的统计图。
[0016]图7为本专利技术CX4945联合anti
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PD
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1有效增强了CD8
+
T细胞的功能（与肿瘤细胞共培养）的流式细胞图。
[0017]图8本专利技术CX4945联合anti
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PD
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1治疗小鼠肺腺癌模式图。
[0018]图9本专利技术CX4945联合anti
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PD
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1治疗有效抑制肿瘤重量的统计图。
[0019]图10专利技术CX4945联合anti
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PD
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1治疗有效抑制肿瘤生长的曲线图。
[0020]图11本专利技术体内CX4945可以有效促进CD8
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T细胞的浸润的CD8
+
T细胞占比图。
具体实施方式
[0021]下面结合附图和实施例对本专利技术做进一步的详细说明。可以理解的是，此处所描述的具体实施例仅仅用于解释本专利技术，而非对本专利技术的限定。另外还需要说明的是，为了便于描述，附图中仅示出了与本专利技术相关的部分而非全部实验结果。
[0022]实施例1体外CD8
+
T细胞耗竭模型的构建。
[0023]1. 外周血单个核细胞提取：（1）将健康志愿者的外周血加入15 mL离心管，用PBS（缓冲液）稀释，等体积稀释；（2）Ficoll：以上稀释液=1:1 或 1:2，将稀释液沿着管壁缓慢加到Ficoll（特定密度细胞的分离液）里，形成分割面，不能混匀；（3）离心1800 rpm，18 min，快升慢降，降速调整至零；（4）用无菌吸管吸出白膜层（PBMC层，外周血单个核细胞层）（位于黄色的血清层和Ficoll液之间）；（5）将吸出的白膜层离心，并弃去上清后用PBS清洗一次，从而得到PBMC（外周血单个核细胞）。
[0024]2. CD8
+
T细胞耗竭模型的构建：（1）使用磁珠从PBMC中分选出CD8
+
T细胞，并使用STEM CELL 公司的T细胞激活剂25μL/mL刺激激活CD8
+
T细胞（培养基中含有IL
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2（10ng/mL）；培养3天后，用IL
‑
2继续维持扩增到第7天。
[0025]（2）配置异源二聚体，将rat anti
‑
human（大鼠抗人的） CD3与goat anti
‑
rat （山羊抗大鼠的）IgG的抗体按照摩尔比为2:1的比例混合。
[0026]（3）将配置好的异源二聚体加入培养基中（含有10 ng/mL的IL
‑
2）诱导CD8
+
T细胞
两天，从而得到耗竭的CD8
+
T细胞。
[0027]结果：如图1所示，随着培养体系中异源二聚体浓度增大，PD
‑1+
Tim
‑3+
CD8
+
T细胞的比例也逐渐加大，提示异二本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1. CK2抑制剂CX4945在制备肿瘤治疗中防止免疫细胞耗竭的药物的应用。2.一种肿瘤治疗中防止免疫细胞耗竭的抑制剂，其特征在于，所述抑制剂包括CK2抑制剂。3.根据权利要求2所述的一种肿瘤治疗中防止免疫细胞耗竭的抑制剂，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙倩，刘绍川，任秀宝，郝希山，
申请(专利权)人：天津市肿瘤医院天津医科大学肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：