【技术实现步骤摘要】
一种PEG修饰蚯蚓血红蛋白的方法
[0001]本专利技术涉及生物工程
，具体为一种PEG修饰蚯蚓血红蛋白的方法。
技术介绍
[0002]血红蛋白(Hb)是红细胞的主要组成，红细胞携带氧从肺贯穿全身。当包含在红细胞中时，Hb以两个氧连接的αβ二聚物组成的四聚体结构存在，每个二聚物的分子量大约为32Kd。每个二聚物的每个α和β亚基都具有蛋白链和血红素分子。α和β蛋白链的序列是已知的。Hb是一种用于输血的可能有用的血液代用品，而且已经提出用作感染性休克中捕捉氧化亚氮，以及在癌症的放射治疗中调节组织的氧合作用的试剂。重组DNA技术能生产修饰的Hb，其具有调节用于个别治疗应用的特殊需要的氧亲和力，蚯蚓血红蛋白也称为蚯蚓胞外巨大血红蛋白，是广泛存在于蚯蚓体内的一种氧载体蛋白。根据目前的研究得知，其单体结构与人血血红蛋白的单体结构非常相似，且具有更强的氧气的携带运输能力。因此，作为一种重要的、潜在的新型血液替代品受到科学界的关注。
[0003]目前的蚯蚓血红蛋白在修饰使用的过程中，由于修饰剂溶解释放过快导致蚯蚓血红蛋白修饰不...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种PEG修饰蚯蚓血红蛋白的方法，其特征在于：具体包括以下步骤：S1、mPEG的制备：将PEG原料加入反应设备中，再将羧甲基化单甲氧基反应物也加入反应设备中，通过搅拌设备以转速为4000
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6000rpm，温度为8
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13℃的条件下混合反应30
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40min，反应结束后得到羧甲基化单甲氧基聚乙二醇mPEG；S2、mPEG的活化：将步骤S1得到的羧甲基化单甲氧基聚乙二醇mPEG通过加入活化剂进行活化处理：S3、蚯蚓血红蛋白的制备：选取人工饲养的蚯蚓，先吐沙干净后冲洗3
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5次，再剪成0.3
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1.2cm的小段，放入提取设备中，依次经过溶解、离心和提取处理后，得到蚯蚓血红蛋白提取液；S4、蚯蚓血红蛋白巯基化处理：将步骤S3制得的蚯蚓血红蛋白提取液与亚氨基四氢噻吩反应以形成巯基化蚯蚓血红蛋白Hb；S5、蚯蚓血红蛋白的修饰：使用离子交换介质辅助修饰，将步骤S4巯基化的分子内交联蚯蚓血红蛋白Hb和步骤S2活化好的羧甲基化单甲氧基聚乙二醇mPEG依次加入到反应介质中在反应设备内反应，先使巯基化的分子内交联蚯蚓血红蛋白Hb悬浮于反应介质中，再加入羧甲基化单甲氧基聚乙二醇mPEG，使羧甲基化单甲氧基聚乙二醇mPEG缓释，从而使巯基化的蚯蚓血红蛋白Hb与羧甲基化单甲氧基聚乙二醇mPEG的官能团反应，以形成修饰...
【专利技术属性】
技术研发人员：荣龙，余春红，任烽，陈露，金怡杉，
申请(专利权)人：北京航空航天大学，
类型：发明
国别省市：
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