用于Pin1异构活性检测的生物探针及其应用制造技术

本发明专利技术属于生物技术领域，具体涉及一种用于Pin1异构活性检测的生物探针及其应用。该生物探针由供

【技术实现步骤摘要】
用于Pin1异构活性检测的生物探针及其应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种用于Pin1异构活性检测的生物探针及其应用。

技术介绍

[0002]脯氨酰顺反异构酶1(peptidyl
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prolyl cis
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trans isomerase NIMA
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interacting1,Pin1)是一种能与蛋白质NIMA相互作用的肽脯氨酰顺反异构酶，也是目前所知道的唯一催化顺反异构的酶。Pin1由N端WW结构域，中间的柔性链接体及C端的PPIase结构域构成，每个结构域都有不同的配体结合位点，但只有PPIase结构域具有催化底物异构化的活性。人类代谢性疾病、心血管疾病、神经退行性疾病及癌症等疾病的发生与转归与细胞内肽酰脯氨酰顺反异构酶1活性异常相关，尤其是Pin1能够促进癌症发生、增殖、侵袭与转移，而成为治疗癌症的一个重要靶点。Pin1靶向药物筛选、癌症及阿尔茨海默病(AD)的诊断、转归与预后等活动都离不开细胞内Pin1活性的检测。
[0003]除少数报道外，目前针对细胞内本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.基于荧光共振能量转移原理的生物探针，其特征在于，所述生物探针由供
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受体对、连接体和Pin1识别域组成；所述供
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受体对为两种颜色不同的荧光蛋白；所述Pin1识别域为含有Pin1的潜在识别位点Ser/Thr
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Pro的肽段；所述连接体为富含疏水氨基酸残基短肽。2.根据权利要求1所述的生物探针，其特征在于，供体为一种称为mClover3的绿色荧光蛋白，受体为一种称为mRuby3红色荧光蛋白。3.根据权利要求1所述的生物探针，其特征在于，所述Pin1的序列如SEQ ID No.1所示。4.根据权利要求1所述的生物探针，其特征在于，所述连接体包括连接体1和连接体2；所述连接体1与所述供体和所述Pin1识别域相连；所述连接体2与所述受体和所述Pin1识别域相连；所述连接体1和所述连接体2的氨基酸残基序列相同，如SEQ ID No.2所示。5.根据权利要求1所述的生物探针，其特征在于，所述供体和所述受体的空间距离为1～10.08nm。6.根据权利要求1所述的生物探针，其特征在于，根据Pin1与底物分子结合后导致Pin1产生的trans和cis两种不同的构象，分别设计不同的Pin1识别域；trans
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识别域的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示；cis
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识别域的氨基酸序列如SEQ ID No.4所示。7.根据权利要求1所述的生物探针，其特征在于，利用所述生物探针检测离体细胞内Pin1异构活性的方法为：利用化学合成法合成所述生物探针融合蛋白的编码基因DNA片段；然后用DNA重组技术将...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨应斌，于淑惠，谭紫仙，王新烨，
申请(专利权)人：西南大学，
类型：发明
国别省市：