壳聚糖酶及其编码基因、重组载体、重组菌株、发酵剂和酶制剂以及它们的应用制造技术

本发明专利技术涉及基因工程技术，公开了一种壳聚糖酶及其编码基因、重组载体、重组菌株、发酵剂和酶制剂以及它们的应用。该壳聚糖酶的纯酶活力高，具有明显的酸稳定性，在最适pH为5.0条件下过夜保藏，酶活力仅下降8％，在pH为3.0

【技术实现步骤摘要】
壳聚糖酶及其编码基因、重组载体、重组菌株、发酵剂和酶制剂以及它们的应用


[0001]本专利技术涉及基因工程技术，具体涉及一种壳聚糖酶及其编码基因，一种重组载体，一种重组菌株，一种发酵剂，一种壳聚糖酶的制备方法，一种酶制剂，以及它们在降解壳聚糖中的应用。

技术介绍

[0002]壳寡糖是一种无毒害、环境友好、可降解的海洋生物新材料，由甲壳素脱乙酰化的产物——壳聚糖经降解获得，聚合度通常介于2
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10之间。壳寡糖是自然界中唯一的天然碱性寡糖，具有抗菌、抗肿瘤、免疫调节和改善糖脂代谢等生物学活性，从而具备促进食品质量和人类健康的潜在能力，在食品、农业及医药领域中有着广泛的应用前景。工业上制备壳寡糖主要是由虾、蟹壳经浓盐酸、氢氧化钠脱钙、脱蛋白得到壳聚糖后，再经化学法、物理法或酶法水解得到。传统的壳寡糖制备工艺须用到大量强酸、强碱处理，存在能耗高、环境污染严重的缺点，给后期处理带来巨大的环保压力。
[0003]壳聚糖酶(EC 3.2.1.132，壳聚糖N
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乙酰氨基葡萄糖水解酶)是专一性水解壳聚糖的糖苷水解酶，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种壳聚糖酶，其特征在于，所述壳聚糖酶为(a)
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(e)中任意一项所述的酶：(a)具有SEQ ID NO：2所示氨基酸序列的酶；(b)SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸残基且仍具有壳聚糖酶活性的氨基酸序列所示的酶；(c)与SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列具有80％以上同源性，且具有壳聚糖酶活性的氨基酸序列所示的酶；(d)在(a)、(b)或(c)所述氨基酸序列的氨基末端和/或羧基末端连接有标签的氨基酸序列所示的酶；(e)在(a)、(b)或(c)所述氨基酸序列的氨基末端连接有信号序列的氨基酸序列所示的酶。2.根据权利要求1所述的壳聚糖酶，其特征在于，所述壳聚糖酶为与SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列具有90％以上，优选95％以上同源性，且具有壳聚糖酶活性的氨基酸序列所示的酶。3.一种编码壳聚糖酶的基因，其特征在于，该基因具有编码权利要求1或2所述的壳聚糖酶的核苷酸序列；优选地，所述基因具有编码具有SEQ ID NO：2所示氨基酸序列的酶的核苷酸序列；更优选地，所述基因具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。4.一种重组载体，其特征在于，所述重组载体含有权利要求3所述的基因；优选地，所述重组载体的表达载体为pET28a质粒。5.一种重组菌株，其特征在于，所述重组菌株含有权利要求3所述的基因或者权利要求4所述的重组载体；优选地，所述重组菌株为大肠杆菌和/或枯草芽孢杆菌；更优选地，所述重组菌株的出发菌株为大肠杆菌BL21(DE3)。6.一种发酵剂，其特征在于，所述发酵剂含有权利要求5所述的重组菌株；优选的，相对于每克所述发酵剂，所述重组菌株的含量为107‑
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【专利技术属性】
技术研发人员：张莹莹，林昌宇，付永前，尹丰伟，林昌敏，郑伟龙，
申请(专利权)人：浙江金壳药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：