一种长白落叶松离体培养不定芽诱导植株再生的方法技术

一种长白落叶松离体培养不定芽诱导植株再生的方法，它涉及一种松树离体培养不定芽诱导植株再生的方法。它解决了长白落叶松组织培养器官发生困难、植株再生率低，及目前用长白落叶松的成熟胚、花芽和腋芽、幼嫩茎段作为外植体不定芽诱导率低的问题。方法：１．合子胚培养诱导愈伤组织；２．诱导生长不定芽；３．继续培养并诱导生根，即得到长白落叶松离体再生植株。本发明专利技术以长白落叶松成熟种子为外植体进行不定芽诱导，获得了高诱导率的不定芽，比目前已有不定芽诱导技术提高９倍以上，而且愈伤组织诱导率均高于９０％，对于长白落叶松的大量扩繁和基因工程育种研究具有广泛的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种松树离体培养不定芽诱导植株再生的方法。
技术介绍
长白落叶松(Larix olgensis)主要分布于我国长白山、老爷岭及毗邻的朝鲜北部与俄罗斯远东地区，大量用于建筑业、装潢业、造纸业，是我国东北地区的重要用材树种之一。长白落叶松生长周期长，采用常规育种技术进行新品种选育时间长、见效慢，同时人工繁育还存在基因源缺乏和杂交不亲和等制约因素。通过转基因方法将目的基因直接导入受体系统并进行表达，可极大地缩短其育种周期，但建立高效的组织培养再生系统是转基因的前提条件之一。长白落叶松组织器官发生困难、植株再生率低，严重的限制了长白落叶松快速生长。目前只有吴克贤等用长白落叶松的成熟胚、花芽和腋芽、幼嫩茎段作为外植体诱导出不定芽(长白落叶松组织培养的研究，吴克贤、李伟、徐妙珍，林业科学，1996，32(2)125-132)，但不定芽诱导诱导率均较低，最高只有8.16％，难以应用于实际生产与实践。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了解决长白落叶松组织培养器官发生困难、植株再生率低，及目前用长白落叶松的成熟胚、花芽和腋芽、幼嫩茎段作为外植体不定芽诱导率低的问题，而提供的一种长白本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种长白落叶松离体培养不定芽诱导植株再生的方法，其特征在于长白落叶松离体培养不定芽诱导植株再生的方法按以下步骤实现：一、取经过预处理的长白落叶松合子胚接种于额外添加６－苄基氨基嘌呤、肌醇、谷氨酰胺、水解酪蛋白、琼脂和蔗糖的ＢＭ培养基中，在温度为２４±１℃的环境中进行暗培养或光照培养至出现愈伤组织；二、将愈伤组织置于温度为２４±１℃的环境中进行光照培养，至长出不定芽；三、将带有不定芽的愈伤组织切成块放入额外添加活性碳和赤霉素的ＢＭ培养基中进行光照培养，４周之后继代培养一次，诱导生根，即得到长白落叶松离体再生植株；步骤一、二和三中光照培养都在３０～４０μｍｏｌ／ｍ↑［２］.ｓ的条件下进行；步骤一Ｂ...

【技术特征摘要】
1.一种长白落叶松离体培养不定芽诱导植株再生的方法，其特征在于长白落叶松离体培养不定芽诱导植株再生的方法按以下步骤实现一、取经过预处理的长白落叶松合子胚接种于额外添加6-苄基氨基嘌呤、肌醇、谷氨酰胺、水解酪蛋白、琼脂和蔗糖的BM培养基中，在温度为24±1℃的环境中进行暗培养或光照培养至出现愈伤组织；二、将愈伤组织置于温度为24±1℃的环境中进行光照培养，至长出不定芽；三、将带有不定芽的愈伤组织切成块放入额外添加活性碳和赤霉素的BM培养基中进行光照培养，4周之后继代培养一次，诱导生根，即得到长白落叶松离体再生植株；步骤一、二和三中光照培养都在30～40μmol/m2·s的条件下进行；步骤一BM培养基中6-苄基氨基嘌呤的浓度为1.0～4.0mg/L、肌醇的浓度为1g/L、谷氨酰胺的浓度为1g/L、水解酪蛋白的浓度为500mg/L、琼脂的浓度为6g/...

【专利技术属性】
技术研发人员：李成浩，王伟达，张含国，刘桂丰，杨静莉，
申请(专利权)人：东北林业大学，
类型：发明
国别省市：93[中国|哈尔滨]