一种核酸提取纯化试剂盒及使用方法技术

本发明专利技术公开了一种核酸提取纯化试剂盒及使用方法。本发明专利技术提供了一种用于核酸提取纯化的试剂，包括细胞裂解液、消化酶、结合液、漂洗液和洗脱液；其中，所述结合液中含有醇溶液(如无水乙醇)和钾盐(如乙酸钾)。与市场上现有同类试剂盒相比本发明专利技术试剂盒中的结合液除了无水乙醇外还加入了乙酸钾试剂，该试剂的加入可使DNA提取物高效率选择性吸附于离心柱硅基质膜，所得核酸的得率和纯度显著提高。本发明专利技术的试剂/试剂盒组成简单，成本低廉，且操作方法简便，便于进行大规模核酸提取操作，另外，本发明专利技术试剂盒中不含甲苯、二甲苯、酚、氯仿等有毒有害试剂，对环境和操作人员的危害较小，更符合现代化环保理念。代化环保理念。

【技术实现步骤摘要】
一种核酸提取纯化试剂盒及使用方法


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种核酸提取纯化试剂盒及使用方法。

技术介绍

[0002]核酸提取是各种分子生物学检测方法的基础，高效完整地提取DNA是PCR扩增、文库构建、测序等工作的基础。除组织器官样本外，分子生物学检测中最常用的离体样本为血液样本。目前已知的酚氯仿法、吸附柱法、磁珠法等现有DNA提取方法中可用于血液DNA提取。其中，酚氯仿法由于在提取过程中使用了有毒有害的有机溶剂，具有核酸质量不佳、操作步骤繁琐、耗时较长的缺陷。目前主要的核酸提取方法包括硅胶膜吸附柱法和磁珠法。柱法提取能获得高纯度核酸，但是提取步骤繁琐，需多次离心，整个流程耗时长。磁珠法提取结合自动化提取仪器，相较于柱法提取，能大幅缩短提取时间，但是多样本同时操作存在交叉污染的风险，提取仪器及试剂的成本也比较高。
[0003]现在医学实验室中广泛采用分子诊断学的主要瓶颈是要求从样品中纯化核酸，尤其是疾病(癌症)治疗手术中的检测，因此，急需研发安全、简便、快速、质量高的核酸提取方法。
专利
技术实现思路

[本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于核酸提取纯化的试剂，包括细胞裂解液、消化酶、结合液、漂洗液和洗脱液，其特征在于：所述结合液中含有醇溶液和钾盐。2.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于：所述醇溶液为无水乙醇或异丙醇；和/或所述钾盐为乙酸钾、硫酸钾、磷酸钾、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾。3.根据权利要求1或2所述的试剂，其特征在于：所述结合液由无水乙醇和乙酸钾混合而成，其中所述乙酸钾的质量百分比为0.1
‑
0.5％；所述结合液的pH为6.0
‑
8.0。4.根据权利要求1
‑
3中任一所述的试剂，其特征在于：所述裂解液中含有Tris
‑
HCl、胍盐、EDTA、非离子表面活性剂和NaCl，pH值为5.0
‑
8.0；和/或所述漂洗液由漂洗液A1和漂洗液A2组成；所述漂洗液A1含有盐酸胍和无水乙醇，pH值为6.0
‑
8.0；所述漂洗液A2含有KAC、Tris
‑
HCl和无水乙醇，pH值为7.0
‑
9.0；和/或所述洗脱液中含有Tris
‑
HCl，pH值为7.0
‑
9.0。5.根据权利要求4所述的试剂，其特征在于：所述裂解液的溶剂为水，溶质及浓度如下：0.5
‑
3.0mol/L胍盐、0.05
‑
0.3mol/L EDTA、体积百分比为3
‑
10％的非离子表面活性剂、0.5
‑
3mol/L NaCl、0.05
‑
0.3mol/L Tris
‑
HCl；和/或所述漂洗液A1的溶剂为水，溶质及浓度如下：1
‑
8mol/L盐酸胍，体积百分比为60％
‑
80％的无水乙醇；和/或所述漂洗液A2的溶剂为水，溶质及浓度如下：0.01
‑
1.0mol/L KAC、体积百分比为70
‑
80％的无水乙醇、1
‑
10mol/L Tris
‑
HCl；和/或所述洗脱...

【专利技术属性】
技术研发人员：张筝，王玲，王俊，
申请(专利权)人：南京腾辰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：