一种黄曲霉毒素B1的双预警分子的测定方法技术

本发明专利技术属于有害污染物预警分子检测领域，涉及一种黄曲霉毒素B1的双预警分子AVN和ST的测定方法。该方法以AVN和ST为双预警分子，将基于Fe3O4/ZIFs的MSPE技术与HPLC联用，建立早期、精准的AFB1预警分子检测技术，包括：提取样品中的AFB1双预警分子AVN和ST，获得样品提取液，将样品提取液进行基于Fe3O4/ZIFs的MSPE后，进行HPLC检测分析，获得双预警分子的定量结果。本发明专利技术首次提出了以AFB1生物合成路径中的前体物质AVN和ST为双预警分子，且本发明专利技术建立的基于Fe3O4/ZIFs的磁性固相萃取结合HPLC检测方法具有成本低、有机试剂消耗小、准确度和灵敏度高的优点。和灵敏度高的优点。和灵敏度高的优点。

【技术实现步骤摘要】
extraction,MSPE)技术结合高效液相色谱(High performance liquid chromatography,HPLC)法进行。
[0007]本专利技术的技术方案为：
[0008]以AFB1的前体物质AVN和ST为双预警分子，将基于Fe3O4/ZIFs的MSPE技术与HPLC联用，建立简单、有机试剂消耗小、能同时高效萃取AVN和ST的萃取体系，以及准确和灵敏测定AVN和ST的检测方法，包括以下步骤：称取定量样品，提取样品中的前体物质AVN和ST，获得样品提取液，将样品提取液进行基于Fe3O4/ZIFs的MSPE后，进行HPLC分析，获得双预警分子AVN和ST的定量结果。
[0009]在进一步的方案中，所述MSPE过程中Fe3O4/ZIFs的用量和解吸剂的用量比为1～15mg:0.25～2.5mL。
[0010]所述MSPE过程中Fe3O4/ZIFs的吸附时间为10～50min。
[0011]所述MSPE过程中的解吸剂为甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、0.1mol
·
L
‑1盐酸/乙腈＝1:9、1:6、1:3或1:1(v/v)、0.1mol
·
L
‑1甲酸/乙腈＝1:9(v/v)或0.1mol
·
L
‑1乙酸/乙腈＝1:9(v/v)。
[0012]所述MSPE过程中的解吸时间为2～12min。
[0013]优化后的基于Fe3O4/ZIFs的MSPE方法中，Fe3O4/ZIFs的用量和解吸剂的用量比为10mg:2mL。Fe3O4/ZIFs的吸附时间为25min。解吸剂为0.1mol
·
L
‑1甲酸/乙腈＝1:9(v/v)。解吸时间为2min。
[0014]所用的吸附剂Fe3O4/ZIFs的合成过程中Fe
2+
和Zn
2+
的摩尔比为1:8，具体按以下步骤制备得到：
[0015]将FeSO4·
7H2O、Zn(CH3COO)2·
2H2O和FeCl3·
6H2O溶解在去离子水中，得溶液1；将溶液1中充满氮气，加热至80℃。制备二甲基咪唑的水溶液，将二甲基咪唑的水溶液按照1:1的体积比在剧烈搅拌下倒入溶液1中，剧烈搅拌10min。自然冷却后，用磁铁收集产物，用乙醇洗涤三次，去离子水洗涤2次，然后真空冷冻干燥过夜。所得产物为Fe3O4/ZIFs。
[0016]上述步骤中，溶液1中FeSO4·
7H2O的浓度为0.05mol
·
L
‑1、Zn(CH3COO)2·
2H2O的浓度为0.4mol
·
L
‑1、FeCl3·
6H2O的浓度为0.1mol
·
L
‑1。二甲基咪唑水溶液中二甲基咪唑的浓度为2.5mol
·
L
‑1。
[0017]本专利技术实施例还将上述优化后的MSPE技术与HPLC结合用于大米样品中AVN和ST的测定，首先提取大米中的AVN和ST；然后采用上述优化后的基于Fe3O4/ZIFs的MSPE技术对AVN和ST进行萃取；接着用HPLC检测AVN和ST的含量。
[0018]提取大米中的AVN和ST的具体步骤为：
[0019]将大米磨碎后过100目筛，于
‑
18℃冰箱保存。准确称取5.0g大米样品于50mL离心管中，加入10mL 80％的乙腈水溶液，涡旋混匀1min，然后超声提取10min。提取完成后，5000rpm离心5min。移取2mL上清液，50℃下氮吹浓缩至近干，用10mL一级水将残渣复溶。
[0020]本专利技术的有益效果为：
[0021](1)本专利技术采用具有丰富官能团的多孔Fe3O4/ZIFs可以同时高效萃取具有不同极性和结构的AVN和ST，且Fe3O4/ZIFs的合成成本低，操作过程简单。
[0022](2)本专利技术首次建立了AFB1双预警分子AVN和ST的检测方法，可准确、灵敏的检测大米样品中的AVN和ST。
[0023](3)本专利技术建立的Fe3O4/ZIFs
‑
MSPE
‑
HPLC方法为AFB1的早期、精准预警提供了一种新的测定方法和研究途径。
附图说明
[0024]图1为AVN和ST的结构式。
[0025]图2为Fe3O4/ZIFs的透射电镜图。
[0026]图3为Fe3O4/ZIFs的氮气吸附
‑
脱附曲线图。
[0027]图4为Fe3O4/ZIFs的孔径分布图。
[0028]图5为大米加标样品在MSPE萃取前(c)和后(d)的色谱图。
具体实施方式
[0029]下面通过具体实施方式对本专利技术进行更加详细的说明，以便于对本专利技术技术方案的理解，但并不用于对本专利技术保护范围的限制。
[0030]本专利技术实施例首先制备并筛选吸附剂，然后对筛选出的吸附剂萃取AVN和ST的参数进行优化，最后将优化参数与HPLC结合应用于大米样品中AVN和ST的测定。
[0031]实施例1
[0032]Fe3O4/ZIFs(1:8)的制备
[0033]将2.0mmol FeSO4·
7H2O、16mmol Zn(CH3COO)2·
2H2O和4.0mmol FeCl3·
6H2O溶解在40mL去离子水中。在N2保护下，加热至80℃。然后，将40mL含有100mmol的二甲基咪唑水溶液在剧烈搅拌下倒入上述溶液中，剧烈搅拌10min。自然冷却后，用磁铁收集产物，用乙醇洗涤三次，去离子水洗涤2次，然后真空冷冻干燥过夜。所得产物即为Fe3O4/ZIFs(1:8)，其透射电镜图、氮气吸附
‑
脱附曲线图和孔径分布图分别如图2、图3和图4c所示，比表面积为333.2m2·
g
‑1。
[0034]实施例2
[0035]Fe3O4/ZIFs(1:5)的制备
[0036]将2.0mmol FeSO4·
7H2O、10mmol Zn(CH3COO)2·
2H2O和4.0mmol FeCl3·
6H2O溶解在40mL去离子水中。在N2保护下，加热至80℃。然后，将40mL含有100mmol的二甲基咪唑水溶液在剧烈搅拌下倒入上述溶液中，剧烈搅拌10min。自然冷却后，用磁铁收集产物，用乙醇洗涤三次，去离子水洗涤2次，然后真空冷冻干燥过夜。所得产物即为Fe3O4/ZIFs(1:5)，其氮气吸附
‑
脱附曲线图和孔径分布图分别如图3和图4b所示，比表面积288.48m2·
g
‑1。
[0037]实施例3
[0038]Fe3O4/ZIFs(1:3)的制备
[0039]将3.0mmol FeSO4·
7H2O、9mmol Zn(CH3COO)2·
2H2O和4.0mmol 本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种黄曲霉毒素B1的双预警分子的测定方法，其特征在于，以黄曲霉毒素B1的前体物质AVN和ST为双预警分子，将基于Fe3O4/ZIFs的磁性固相萃取技术与高效液相色谱联用测定样品中的AVN和ST。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：提取样品中的前体物质AVN和ST，获得样品提取液，将样品提取液进行基于Fe3O4/ZIFs的磁性固相萃取后，进行HPLC检测分析，获得双预警分子AVN和ST的定量结果。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，Fe3O4/ZIFs的合成过程中Fe
2+
和Zn
2+
的摩尔比为1:8。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，磁性固相萃取中所用的解吸剂为甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、0.1mol
·
L
‑1盐酸/乙腈＝1:9、1:6、1:3或1:1(v/v)、0.1mol
·
L
‑1甲酸/乙腈＝1:9(v/v)或0.1mol
·
L
‑1乙酸/乙腈＝1:9(v/v)。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述Fe3O4/ZIFs的用量和磁性固相萃取中所用的解吸剂的用量比为1～15mg:0.25～2.5mL。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，Fe3O4/ZIFs的吸附时间为10～50min。7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，磁性固相...

【专利技术属性】
技术研发人员：何丽君，张雅琪，孙亚明，满勇，赵文杰，
申请(专利权)人：河南工业大学，
类型：发明
国别省市：