快速疫苗平台制造技术

本文提供了使用基于去核细胞的平台制备和递送疫苗组合物的方法。还提供了使用基于去核细胞的平台清除对象中病原体感染的方法。与常规生物疫苗相比，这种基于去核细胞的平台减少了疫苗开发时间线，并提高了疫苗功效。并提高了疫苗功效。并提高了疫苗功效。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】快速疫苗平台
交叉引用
[0001]本申请要求于2020年2月11日提交的美国临时申请序列号62/975,044和于2020年4月22日提交的美国临时申请序列号63/014,002的权益，其中的每一个通过引用以其整体并入本文。序列表
[0002]本申请包含以ASCII格式电子提交的序列表，该序列表通过引用以其整体并入本文。所述ASCII副本在2021年2月9日创建，命名为53712
‑
706_601_SL.txt，大小为1,695,927字节。

技术介绍

[0003]严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS
‑
CoV
‑
2)流行病及其伴随的发病率和死亡率强调了诱导保护性和持久免疫应答的安全和有效疫苗的需要。该流行病还显示出满足紧急医疗需要，例如冠状病毒病2019(COVID
‑
19)的广泛传播的世界各地常规疫苗开发管线的严重缺陷。存在对一种新的疫苗开发平台的迫切和未满足的需要，其能够缩短安全有效的疫苗和治疗剂的上市时间，以治疗由快速发展的病原体如SARSr/>‑
C本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种无细胞核的细胞，所述无细胞核的细胞包含：一种或多种细胞内细胞器，所述细胞器用于在不存在所述细胞核的情况下合成或分泌抗严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS
‑
CoV
‑
2)的疫苗。2.根据权利要求1所述的无细胞核的细胞，其中所述一种或多种细胞内细胞器是内质网或高尔基体。3.根据权利要求1所述的无细胞核的细胞，其中所述疫苗偶联至所述无细胞核的细胞的表面。4.根据权利要求3所述的无细胞核的细胞，其中所述疫苗包含将所述疫苗偶联至所述无细胞核的细胞表面的跨膜结构域。5.根据权利要求1所述的无细胞核的细胞，其中所述无细胞核的细胞还包含含有粒细胞
‑
巨噬细胞集落刺激因子的免疫调节剂。6.根据权利要求1所述的无细胞核的细胞，其中所述无细胞核的细胞还包含归巢受体，所述归巢受体包含：(a)白细胞唾液酸蛋白；(b)L
‑
选择素、淋巴细胞功能相关抗原1；(c)极晚期抗原4；(d)(a)至(c)中任一项的一部分；或(e)(a)至(d)的任何组合。7.根据权利要求1所述的无细胞核的细胞，其中所述无细胞核的细胞的直径为约1微米(μm)至100μm。8.根据权利要求7所述的无细胞核的细胞，其中所述直径为约8μm。9.根据权利要求1所述的无细胞核的细胞，其中当活力通过以下方法测量时，所述无细胞核的细胞在低温休眠至少24小时后是有活力的：(a)离心悬浮液中的多个所述无细胞核的细胞的等分试样以产生细胞沉淀；(b)将所述细胞沉淀再悬浮于无血清培养基中以产生无血清细胞悬浮液；(c)将1份台盼蓝染料和1份所述无血清细胞悬浮液混合；以及(d)在(c)的3
‑
5分钟内对所述多个无细胞核的细胞进行计数，其中所述多个无细胞核的细胞中的至少一些未被台盼蓝染料染色，这指示活力。10.根据权利要求1所述的无细胞核的细胞，其中当活力通过以下方法测量时，所述无细胞核的细胞在低温保存至少24小时后是有活力的：(a)离心悬浮液中的多个所述无细胞核的细胞的等分试样以产生细胞沉淀；(b)将所述细胞沉淀再悬浮于无血清培养基中以产生无血清细胞悬浮液；(c)将1份台盼蓝染料和1份无血清细胞悬浮液混合；以及(d)在(c)的3
‑
5分钟内对所述多个无细胞核的细胞进行计数，其中所述多个无细胞核的细胞中的至少一些未被台盼蓝染料染色，这指示活力。11.根据权利要求1所述的无细胞核的细胞，其中所述无细胞核的细胞被低温保存、低温休眠或冻干。12.根据权利要求1所述的无细胞核的细胞，其中所述无细胞核的细胞被分离或纯化。13.一种药物制剂，其包含：
(a)权利要求1所述的无细胞核的细胞或多个权利要求1所述的无细胞核的细胞；以及(b)药学上可接受的赋形剂、稀释剂或载体。14.一种生产疫苗的方法，所述方法包括：(a)从细胞中去除细胞核以产生包含一种或多种细胞内细胞器的去核细胞，所述细胞器用于合成或分泌抗严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS
‑
CoV
‑
2)的疫苗；以及(b)将编码所述疫苗的外源性mRNA引入所述去核细胞，其中所述去核细胞在不存在所述细胞核的情况下表达所述疫苗。15.根据权利要求14所述的方法，其中将所述去核细胞储存在4℃或低于4℃以可逆地减慢或停止去核细胞的生物活性，并且随后在(b)中引入之前解冻。16.根据权利要求14所述的方法，其中将所述无细胞核的细胞冻干，并且随后在(b)中引入之前进行再水合。17.根据权利要求14所述的方法，其中将所述去核细胞储存在
‑
120℃或低于
‑
120℃以可逆地减慢或停止去核细胞的生物活性，并且随后在(b)中引入之前解冻。18.根据权利要求14所述的方法，其中(a)中从所述细胞中去除细胞核是在不分化所述细胞的情况下进行的。19.根据权利要求14所述的方法，其中所述一种或多种细胞内细胞器是内质网或高尔基体。20.根据权利要求14所述的方法，其中所述无细胞核的细胞的直径为约1微米(μm)至100μm。21.根据权利要求20所述的方法，其中所述直径为约8μm。22.根据权利要求14所述的方法，还包括在(a)中去除所述细胞核之前，向所述细胞中引入具有编码免疫调节剂的核酸序列的外源性核酸分子，所述免疫调节剂包括粒细胞
‑
巨噬细胞集落刺激因子。23.根据权利要求14所述的方法，还包括在(a)中去除所述细胞核之前向所述细胞中引入具有编码归巢受体的核酸序列的外源性核酸分子，所述归巢受体包含：a)白细胞唾液酸蛋白；b)L
‑
选择素、淋巴细胞功能相关抗原1；c)极晚期抗原4；d)C
‑
X
‑
C趋化因子受体3型；e)CD44抗原；f)C
‑
C趋化因子受体7型；g)(a)至(f)中任一项的一部分；或h)(a)至(g)的任何组合。24.根据权利要求14所述的方法，还包括向所述无细胞核的细胞中引入包含编码免疫调节剂的序列的外源性mRNA分子，所述免疫调节剂包括粒细胞
‑
巨噬细胞集落刺激因子。25.根据权利要求14所述的方法，还包括向所述无细胞核的细胞中引入包含编码归巢受体的序列的外源性mRNA分子，所述归巢受体包含：(a)白细胞唾液酸蛋白；(b)L
‑
选择素、淋巴细胞功能相关抗原1；
(c)极晚期抗原4；(d)C
‑
X
‑
C趋化因子受体3型；(e)CD44抗原；(f)C
‑
C趋化因子受体7型；(g)(a)至(f)中任一项的一部分；或(h)(a)至(g)的任何组合。26.一种向对象递送抗严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS
‑
CoV
‑
2)的疫苗的方法，所述方法包括：向所述对象施用包含一种或多种细胞内细胞器的无细胞核的细胞，所述细胞器用于在不存在所述细胞核的情况下合成或分泌抗SARS
‑
CoV
‑
2的疫苗。27.根据权利要求26所述的方法，其中所述一种或多种细胞内细胞器是内质网或高尔基体。28.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：雷莫，
申请(专利权)人：赛托纳斯治疗公司，
类型：发明
国别省市：