落新妇苷刺激间充质干细胞在制备治疗糖尿病肾病的药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及肾病治疗技术领域，具体提供落新妇苷刺激间充质干细胞在制备治疗糖尿病肾病的药物中的应用。本发明专利技术提供间充质干细胞在制备肾病治疗药物中的应用，所述间充质干细胞传代培养过程中，向细胞培养液中添加5

【技术实现步骤摘要】
落新妇苷刺激间充质干细胞在制备治疗糖尿病肾病的药物中的应用


[0001]本专利技术涉及肾病治疗
，尤其涉及落新妇苷刺激间充质干细胞在制备治疗糖尿病肾病的药物中的应用。

技术介绍

[0002]糖尿病是全球最常见和增长最快的疾病之一，预计到2045年将影响6.93亿成年人，比2017年增长50％以上。宏观的以及微观的血管系统的并发症(心血管疾病、糖尿病肾病、糖尿病视网膜病变和神经病变)是导致糖尿病患者发病和死亡的主要原因，给国家的医疗支出带来了巨大的经济负担(Nat Rev Nephrol.2020,16(7):377
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390.)。
[0003]有近半的2型糖尿病患者会出现糖尿病肾病(Diabetic kidney disease，DKD)，是最常见、最具破坏性，也是治疗费用最昂贵的糖尿病并发症之一，也是引起终末期肾病的主要病因之一。并且全球患有DKD的人数预计将随着糖尿病发病率的增加而上升。DKD的定义是糖尿病患者存在慢性肾脏疾病
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其特点是尿白蛋白排泄量持续升高(尿白蛋白与肌酐比值(UACR)>30mg/g)或肾小球滤过率(eGFR)持续下降<60ml/min/1.73m2(Nat Rev Nephrol.2021,17(4):227
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244)。
[0004]在长期血糖和高滤过影响下，糖尿病肾病可出现的病理表现有：早期出现肾小球肥大、肾小球基底膜均质性增厚，中后期出现肾小球硬化伴Kimmelstiel
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Wilson结节，微血管瘤形成，明显的动脉透明样变以及纤维帽形成，以及肾小囊滴玻璃样变性等(J Am Soc Nephrol.2010,21(4):556
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63)。
[0005]虽然严格的血糖和血压控制可以延缓DKD的发生，但并不能完全阻止DKD疾病的进展，DKD仍然会不可避免的走向终末期肾病阶段。终末期肾病目前只有血液透析和肾移植两种方式，血液透析会明显影响患者的生活质量，而肾移植又存在肾源短缺的问题。DKD的发病机制也很复杂，因此，探究DKD的发病机制及寻找DKD新的潜在的治疗靶点和治疗方法，是国内外研究的热点。
[0006]间充质干细胞(mesenchymal stem cell，MSC)是干细胞家族的重要成员，间充质干细胞是塑料粘附细胞，在体外可扩增，具有来源广泛、自我更新以及分化的能力，还具有独特免疫调节和诱导免疫耐受等功能。MSC包括骨髓间充质干细胞(BMMSC)、脂肪源性间充质干细胞(ADMSC)、脐血间充质干细胞(UCMSC)、人胎盘源性间充质干细胞(PDMSC)、Wharton's jelly
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derived MSC(WJMSC)、牙科间充质干细胞(DMSC)等。国际细胞治疗学会(ISCT)提出了msc定义的最低标准，其中包括：可塑性、三谱系和分化潜力；细胞表面CD105、CD73、CD90标记表达阳性，CD45、CD34、CD14或CD11b、CD79a或CD19、HLA
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DR表达阴性；在体外培养条件下分化成成骨细胞、脂肪细胞和成软骨细胞的能力(Front Cell Dev Biol.2022,10:910592)。
[0007]最常用于治疗慢性肾脏病的细胞类型是BMMSC，因为BMMSC的MHC I和MHC II表达量低，因此可以避免被异体T细胞攻击。目前BMMSC用于治疗糖尿病肾病已被认为是一种具
有探索性手段，并且已有实验证实对糖尿病肾病具有一定的肾脏保护作用：能够减轻高糖对足细胞的损伤，减少足细胞凋亡；通过改善全身以及肾脏局部的炎症来延DKD的进展；通过减轻细胞的氧化应激抑制了肾小管上皮细胞的凋亡，起到保护肾小管的结构和功能的作用。同时还有研究表明，BMMSC可以分化为肾小球系膜细胞(Stem Cell Res Ther.2019；10(1):329；Semin Nephrol.2016,36(3):174
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88.)。将干细胞技术应用于治疗实验性DKD在动物模型中已经获得了很大的进展，可以成为DKD治疗的有效方案之一。
[0008]中医药是中华民族的瑰宝，中药是我们珍贵的医药宝库，中药目前也是新药研制的一个重要源泉。从天然中药植物中提取中药单体，研究其对疾病的影响，这对于进一步阐明中药的作用机理，扩大中医药在生命科学技术方面的影响有着重要意义。
[0009]目前糖尿病及糖尿病肾病的药物治疗主要是还是通过改善胰岛素抵抗，增强胰岛素敏感性等方法，但长期服用这些药物存在导致患者水肿、体重增加，甚至出现肝损害的情况。
[0010]目前有研究显示间充质干细胞对糖尿病肾病具有一定的保护作用，可缓解糖尿病肾病动物模型肾脏细胞损伤，改善微量白蛋白尿和肾脏病理损伤，其机制可能是通过直接修复肾脏细胞损伤，调节炎症和免疫反应，抗纤维化以及通过旁分泌作用来实现的。虽然骨髓间充质干细胞可以改善糖尿病肾病的症状，但当单独使用骨髓间充质干细胞时，它们存在一些问题经常未能达到理想的治疗效果，如体外培养的MSC静脉注射后在受者体内存活率低，移植后的MSC归巢率比较低，不能充分发挥MSC再生修复以及免疫调节功能等。
[0011]并且目前越来越多的观点认为糖尿病肾病是异常代谢状态所致的炎症性疾病，但是糖尿病肾病体内的严重炎症反应影响了MSC的活性，因此，如何使MSC治疗的作用进一步提高以及怎么能促进MSC更好的发挥免疫调节作用是值得深入探究的问题。
[0012]通过中药及中药单体改善MSC功能，通过细胞疗法来治疗糖尿病肾病，有可能成为副作用小，有助于患者接受，同时疗效显著的一种疗法。有鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0013]中药物预处理MSC是一种操作简便、起效迅速的方法，还可以通过改变浓度和作用时间使之发挥不同的生物学作用。但是目前关于落新妇苷对MSC有无免疫调节功能及落新妇苷预处理后的MSC是否能对糖尿病肾病发挥更好的治疗效果的研究还没有。
[0014]本专利技术提供落新妇苷刺激间充质干细胞在制备治疗糖尿病肾病的药物中的应用。
[0015]第一方面，本专利技术提供间充质干细胞在制备肾病治疗药物中的应用，所述间充质干细胞传代培养过程中，向细胞培养液中添加5
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20μg/ml的落新妇苷。
[0016]在本专利技术提供的间充质干细胞在制备肾病治疗药物的应用中，所述间充质干细胞为骨髓间充质干细胞、脂肪源性间充质干细胞、脐血间充质干细胞、人胎盘源性间充质干细胞、牙科间充质干细胞。
[0017]在本专利技术提供的间充质干细胞在制备肾病治疗药物的应用中，所述肾病为糖尿病并发症引起的肾病。
[0018]第二方面，本专利技术提供落新妇苷在提高间充质干细胞的免疫调节功能中的应用，采用5
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20μg/ml的落新妇苷作为间充质干细胞的细胞传代培养液。
[0019]在本专利技术提供的落新妇苷在提高间充质干细胞的免疫调节功能的应本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.间充质干细胞在制备肾病治疗药物中的应用，其特征在于，所述间充质干细胞传代培养过程中，向细胞培养液中添加5
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20μg/ml的落新妇苷。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述间充质干细胞为骨髓间充质干细胞、脂肪源性间充质干细胞、脐血间充质干细胞、人胎盘源性间充质干细胞、牙科间充质干细胞。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肾病为糖尿病并发症引起的肾病。4.落新妇苷在提高间充质干细胞的免疫调节功能中的应用，其特征在于，采用5
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20μg/ml的落新妇苷作为间充质干细胞的细胞传代培养液。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，采用5
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20μg/ml的落新妇苷作为间充质干细胞的细胞传代培养液，对间充质干细胞培养30
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50h，获得免疫调节功能强的间充质干细胞。6.一种间充质干细胞，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：耿晓东，洪权，迟坤，付章宁，张益帆，
申请(专利权)人：中国人民解放军总医院第一医学中心，
类型：发明
国别省市：