治疗线粒体障碍的方法技术

本文提供了通过将核酸分子离体导入造血干细胞和祖细胞(HSPC)，然后将HSPC移植入需要治疗的受试者中来治疗与线粒体功能紊乱相关的疾病或障碍的方法。所述核酸分子可以包括功能性人共济蛋白(hFXN)或者可以包括在转染到细胞中时除去内源性hFXN的三核苷酸延伸突变的基因编辑系统。的基因编辑系统。的基因编辑系统。

【技术实现步骤摘要】
个GAA重复序列，而FRDA患者中的扩展的等位基因可由90至1700个重复序列组成(SEQID NO：12)(参见图1B)。GAA重复序列扩展导致共济蛋白的表达降低，共济蛋白是一种 高度保守的线粒体蛋白，主要在富含线粒体的组织(包括神经系统、肌肉和心脏)中表达。 此外，与正常表达相比，载体(扩展的等位基因的杂合子)示出共济蛋白mRNA和蛋白质 水平降低约50％，但它们未示出任何症状。虽然共济蛋白的功能尚未完全阐明，但它是参与 Fe
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S簇装配的铁结合蛋白，而且，在不存在共济蛋白时，铁在线粒体内积累，导致有缺陷的 铁介导的生物合成过程和增加的氧化应激。
[0013]在从大肠杆菌分离的超螺旋质粒中，扩展的GAA重复序列形成分子内三股螺旋体(三 链体)，即所谓的H
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DNA。提出了示出在扩展的GAA重复序列处形成的三链体结构的几种 模型，并且最近提供了在体外病理性GAA扩展序列中嘧啶基序H
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DNA结构的直接证据。 此外，利用凝胶电泳和原子力显微镜在含有共济蛋白GAA重复序列的质粒中观察到形成称 为“粘性DNA(sticky DN本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.受试者的造血干细胞和祖细胞(HSPC)在制备用于通过将功能性人共济蛋白(hFXN)的蛋白质或mRNA或两者的囊泡从所述HSPC或由所述HSPC分化的细胞递送至所述受试者中缺乏hFXN的细胞来治疗所述受试者的弗里德赖希氏共济失调(FRDA)的药物中的用途，其中，HSPC已导入与疾病或障碍有关的功能性hFXN基因或者在HSPC中与疾病或障碍有关的功能性hFXN基因已被修正；其中，所述HSPC将被移植到所述受试者；以及其中所述HSPC分化的细胞为巨噬细胞或小胶质细胞。2.根据权利要求1所述的用途，其中通过使包含编码所述功能性hFXN基因及与其功能性连接的调节序列的多核苷酸的载体与所述HSPC接触或者通过使用基因编辑方法并使基因产物表达，将所述功能性hFXN基因导入所述HSPC或者在所述HSPC中修正所述功能性hFXN基因。3.根据权利要求1所述的用途，其中所述受试者是哺乳动物。4.根据权利要求3所述的用途，其中所述受试者是人。5.根据权利要求2所述的用途，其中载体是选自由慢病毒、1型单纯疱疹病毒(HSV
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1)、腺病毒和AAV载体组成的组的病毒载体。6.根据权利要求2所述的用途，其中所述基因编辑方法是CRISPR/Cas9。7.根据权利要求1所述的用途，其中在所述HSPC移植到所述受试者后约6至12个月内，所述移植修正神经、心脏和肌肉并发症。8.根据权利要求1所述的用途，其中离体地将所述功能性hFXN基因导入所述HSPC或者离体地在所述HSPC中修正所述所述功能性hFXN基因。9.根据权利要求2所述的用途，其中所述载体是pCCL
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FRDAp
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FXN或pCCL
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EFS
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FXN。10.根据权利要求1所述的用途，其中将功能性hFXN的蛋白质或mRNA或两者的囊泡递送包括：将含有功能性hFXN的蛋白质或mRNA或两者的线粒体、含有功能性hFXN的蛋白质或mRNA或两者的囊泡、含有功能性hFXN的蛋白质或mRNA或两者的外泌体中的任意一项或多项从所述HSPC或由所述HSPC分化的细胞转移至缺乏hFXN的细胞。11.根据权利要求1所述的用途，其中将功能性hFXN的蛋白质...

【专利技术属性】
技术研发人员：斯蒂芬妮，
申请(专利权)人：加利福尼亚大学董事会，
类型：发明
国别省市：