一种发酵生产羟基酪醇重组大肠杆菌的构建方法及应用技术

本发明专利技术涉及一种生物合成羟基酪醇的技术改进，具体为一种发酵生产羟基酪醇重组大肠杆菌的构建方法及应用，实现从简单碳源合成羟基酪醇的途径；将携带有质粒pRSFDuet

【技术实现步骤摘要】
一种发酵生产羟基酪醇重组大肠杆菌的构建方法及应用


[0001]本专利技术涉及一种生物合成羟基酪醇的技术改进，具体为一种发酵生产羟基酪醇重组大肠杆菌的构建方法及应用。

技术介绍

[0002]羟基酪醇(Hydroxytyrosol，HT)，又称3，4
‑
二羟基苯乙醇(3，4
‑
Dihydroxyphenylethanol)，分子量为154.164，分子式为C8H
10
O3，是一种天然多酚类化合物，具有多种生物和药理活性。羟基酪醇具有强效的抗氧作用，能够将其酚羟基的氢转移到活性氧，从而可以保护人类红细胞中过氧化氢对DNA和细胞膜的损伤，也能清除紫外线照射下产生的自由基，保护皮肤光损伤。羟基酪醇还有抗炎活性，可降低炎症相关的基因表达，有抗肿瘤作用，可以通过激活分子信号传导来促进癌细胞的凋亡和抗菌活性，还有抑制微生物活性的作用，对肠道内多种菌株具有抗菌效果。因此，羟基酪醇在化妆品、制药行业和保健食品中具有广泛的应用。目前商业化的羟基酪醇主要从天然植物中提取或通过化学合成获得。自然界中，羟基酪醇大量存在本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种发酵生产羟基酪醇重组大肠杆菌的构建方法，其特征在于，包括如下步骤，步骤一、PCR扩增获取HpaBC、LAAD基因和线性化pRSFDuet
‑
1载体片段，通过同源重组将这些片段进行融合，得到质粒pRSFDuet
‑
HpaBC
‑
LAAD；PCR扩增获取ARO10、ADH基因和pRSFD uet
‑
HpaBC
‑
LAAD载体片段，通过同源重组将这些片段进行融合，得到质粒pRSFDuet
‑
HpaBC
‑
LAAD
‑
ARO10
‑
ADH；PCR扩增获取AROG、TYRA基因和线性化pETDuet
‑
1载体片段，通过同源重组将这些片段进行融合，得到质粒pETDuet
‑
AROG
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TYRA；步骤二、将质粒pRSFDuet
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HpaBC
‑
LAAD
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ARO10
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ADH和质粒pETDuet
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AROG
‑
TYRA共同转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中，得到重组大肠杆菌BLAH，以及将质粒pRSFDuet
‑
1和pETDuet

【专利技术属性】
技术研发人员：罗茂行，吴玉玲，王甜忆，董洪钢，
申请(专利权)人：浙江熙正霖生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：