一种动态代谢调控大肠杆菌发酵制备α-酮异戊酸的方法技术

本发明专利技术公开了一种动态代谢调控大肠杆菌发酵制备α

【技术实现步骤摘要】
一种动态代谢调控大肠杆菌发酵制备
α
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酮异戊酸的方法


[0001]本专利技术涉及一种动态代谢调控大肠杆菌发酵制备α
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酮异戊酸的方法，属于生物工程领域。

技术介绍

[0002]α
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酮异戊酸是α
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酮酸的一种，被广泛应用于医药、化学合成、饲料领域。在医药方面，作为复方α
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酮酸片的主要成分之一，可用于治疗尿毒症。另外，α
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酮异戊酸是合成维生素B5的重要原料；在生物体内，α
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酮异戊酸是缬氨酸、异亮氨酸和亮氨酸的合成前体，对氨基酸的合成有重要作用。
[0003]目前，α
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酮异戊酸合成最常用的方法是化学合成法。化学合成法无论从工业经济发展还是环境保护的角度，均有很大的局限性：原料复杂、工艺繁杂、反应条件严苛、催化剂高昂且存在毒性。发酵法操作简单、底物成本低且环境友好，更适用于工业化生产。
[0004]现阶段，主要以谷氨酸棒杆菌为宿主菌株发酵合成α
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酮异戊酸(本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株重组大肠杆菌，对出发菌株进行了如下至少一种改造：(1)抑制ilvE基因的表达；(2)抑制pdh基因表达；(3)表达含有A71S、R76D、S78D和Q110V突变的酮酸还原异构酶(IlvC酶)；(4)过量表达pntA和pntAB基因。2.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌，其特征在于，以E.coli B0016
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050为出发菌株。3.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述抑制ilvE基因的表达包括在质粒水平表达dCas9蛋白或在基因组水平表达dCas9蛋白。4.根据权利要求3所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述在基因组水平表达dCas9蛋白包括：用T7启动子表达整合在基因组DNA上的dCas9蛋白和/或用P
trc
启动子表达用于抑制ilvE基因的sgRNA。5.根据权利要求3所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述在质粒水平表达dCas9蛋白是以质粒pACYCDuet
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...

【专利技术属性】
技术研发人员：周哲敏，周丽，袁中喆，朱滢，刘光庆，孙梓晋，杜士宇，刘贺，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：