一种黄芪多糖壳聚糖纳米复合物及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种黄芪多糖壳聚糖纳米复合物，包括黄芪多糖3

【技术实现步骤摘要】
一种黄芪多糖壳聚糖纳米复合物及其制备方法


[0001]本专利技术涉及中药制剂
，具体的说涉及一种黄芪多糖壳聚糖纳米复合物及其制备方法。

技术介绍

[0002]在新型冠状病毒疫情的影响下，人们对呼吸道健康愈发重视，中医药治疗呼吸道疾病疗效确切、历史悠久。黄芪，入脾、肺经，适用于脾肺气虚、咳喘气短者。近年来研究发现黄芪中黄芪多糖可以有效治疗和干预哮喘。壳聚糖也称脱乙酰甲壳素，是由虾蟹壳等制备的天然无毒物质，具有载药能力，生物相容性、生物降解性良好，是呼吸道用纳米复合颗粒的优良载体。
[0003]目前黄芪在治疗哮喘时多为中药汤剂组分，或制成中成药如黄芪颗粒。均存在首过消除，影响血药浓度，药物在到达支气管粘膜时浓度大大降低。
[0004]因此，提供一种新的黄芪多糖给药方式提高治疗效果是本领域亟待解决的问题。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术提供了一种黄芪多糖壳聚糖纳米复合物及其制备方法。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0007]一种黄芪多糖壳聚糖纳米复合物，包括以下重量份原料：黄芪多糖3
‑
5份、壳聚糖0.1mol/l冰醋酸溶液1000
‑
1100份、液体石蜡5000
‑
5100份、表面活性剂80
‑
100份、戊二醛1000
‑
1100份。
[0008]进一步，壳聚糖冰醋酸溶液中冰醋酸的质量浓度为0.1mol/l。
[0009]进一步25min，所述表面活性剂为Span
‑
80。
[0010]进一步所述壳聚糖冰醋酸溶液中壳聚糖的质量浓度为2％；所述戊二醛的质量浓度为25％。
[0011]本专利技术还提供了上述黄芪多糖壳聚糖纳米复合物的制备方法，包括以下步骤：
[0012](1)按上述重量份数称取各原料；将黄芪多糖，溶于壳聚糖冰醋酸溶液中，作为水相备用，以液体石蜡作为油相备用；
[0013](2)将液体石蜡和表面活性剂加入至容器内，25
‑
30min恒温水浴，500r/min下搅拌混合均匀，然后在900
‑
1000r/min恒速搅拌下将水相逐滴加入到油相中，搅拌35min后形成均匀的微乳液；
[0014](3)将戊二醛缓慢滴加至微乳液中，继续搅拌25
‑
30min后离心，弃上清液，得到沉淀备用；
[0015](4)将沉淀用洗涤剂洗涤，然后加入至水中超声分散，超声功率75％，再进行冷冻干燥，即得黄芪多糖壳聚糖纳米复合物
[0016]进一步，步骤(2)中所述恒温水浴温度为65℃，时间为25min。
[0017]进一步，步骤(3)中所述离心速率为15000r/min，离心时间为20min，离心温度为4
℃。
[0018]进一步，步骤(4)中所述超声功率为75％，超声时间为10min。
[0019]更进一步，步骤(4)中所述冷冻干燥温度为
‑
30℃至
‑
40℃，时间为4
‑
6h。
[0020]本专利技术的有益效果在于：本专利技术中黄芪多糖作为制剂中的有效成分使用，具有减轻炎症细胞脱颗粒、聚集浸润等情况，抑制气道壁厚度增加，纠正Th1/Th2失衡状态，抑制氧化应激反应的作用，从而缓解哮喘症状。本专利技术采用壳聚糖包裹黄芪多糖制备为纳米复合物，使黄芪多糖可以用于吸入剂的制备。此法安全无毒，不影响黄芪多糖的药理性质。
附图说明
[0021]图1为本专利技术实施例2中OVA诱发的A549细胞IL
‑
6和TNF
‑
a的基因表达趋势示意图。
具体实施方式
[0022]下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0023]实施例1
[0024]一种黄芪多糖壳聚糖纳米复合物
[0025](1)称取黄芪多糖3kg、2％壳聚糖冰醋酸溶液1000kg、液体石蜡5000kg、Span
‑
8080kg、25％戊二醛1000kg；将黄芪多糖，溶于壳聚糖冰醋酸溶液中，作为水相备用，以液体石蜡作为油相备用；
[0026](2)将液体石蜡和表面活性剂加入至容器内，65℃恒温水浴，500r/min下搅拌混合均匀，然后在900r/min恒速搅拌下将水相逐滴加入到油相中，搅拌35min后形成均匀的微乳液；
[0027](3)将戊二醛缓慢滴加至微乳液中，继续搅拌30min后4℃、15000r/min离心20min，弃上清液，得到沉淀备用；
[0028](4)将沉淀用洗涤剂洗涤，然后加入至水中超声分散10min，再
‑
40℃冷冻干燥4h，即得黄芪多糖壳聚糖纳米复合物。
[0029]实施例2
[0030](1)细胞复苏
[0031]将存有A549细胞的冻存管放在温度为37℃的水浴锅中融化，在无菌操作台上用已经灭菌的洁净的吸管吸取融化好的细胞液并将其移入含5ml培养液的离心专用管中，配平后25℃、1000rcf离心3min。再重新加入5ml的培养液，将得到的悬浮细胞液移至培养瓶中继续培养。
[0032](2)细胞传代
[0033]在显微镜下观察到80％的细胞已经融合时，即可用PBS洗涤细胞，目的是清除原培养液。然后再加入消化液，轻轻摇匀，使胰酶均匀铺散在培养瓶侧壁上。在大部分细胞变圆悬浮后，立即加入培养液终止消化，将得到的细胞悬液移入离心专用管中，配平后1000rcf离心3min，随后更换新的培养液，放置在CO2培养箱中按照一定的比例传代培养。
[0034](3)分组与干预
[0035]将已经被吹散成单个细胞悬液的A549细胞移入离心管中，配平后1000rcf离心3min。把配制好的细胞悬液接种于96孔板中，保证细胞密度为1.5
×
105个/ml。然后进行随机分组和药物干预：空白对照组：不加特殊处理因素；模型组：OVA 20μg/ml；给药组：OVA 20μg/ml+实施例1制备的产品20μg/ml。所有组别加入相应药物后继续培养细胞，24h后收集细胞进行检测。
[0036](4)实验结果
[0037]实验发现实施例1制备的产品能够抑制OVA诱发的A549细胞IL
‑
6和TNF
‑
a的基因表达上调趋势，对抑制炎症因子TGF
‑
β起到上调趋势，但是这些作用都较为微弱。此外，OVA刺激对A549细胞CCR
‑
3呈现显著上调趋势，且黄芪多糖能够抑制该趋势。因此，实施例1制备的产品可能通过抑制OVA对CCR
‑
3的表本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种黄芪多糖壳聚糖纳米复合物，其特征在于，包括以下重量份原料：黄芪多糖3
‑
5份、壳聚糖冰醋酸溶液1000
‑
1100份、液体石蜡5000
‑
5100份、表面活性剂80
‑
100份、戊二醛1000
‑
1100份。2.根据权利要求1所述一种黄芪多糖壳聚糖纳米复合物，其特征在于，所述表面活性剂为Span
‑
80。3.根据权利要求1所述一种黄芪多糖壳聚糖纳米复合物，其特征在于，所述壳聚糖冰醋酸溶液中壳聚糖的质量浓度为2％；所述戊二醛的质量浓度为25％。4.一种黄芪多糖壳聚糖纳米复合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)按权利要求1
‑
3任一项所述重量份数称取各原料；将黄芪多糖，溶于壳聚糖冰醋酸溶液中，作为水相备用，以液体石蜡作为油相备用；(2)将液体石蜡和表面活性剂加入至容器内，恒温水浴25min，500
‑
600r/min下搅拌混合均匀，然后在900
‑
1000r/min恒速搅拌下将...

【专利技术属性】
技术研发人员：颜培正，孙与泽，赵晓菲，孟庆岩，刘燕，常兴，张庆祥，赵明哲，刘畅，
申请(专利权)人：山东中医药大学，
类型：发明
国别省市：