锦灯笼多糖在制备治疗溃疡性结肠炎的药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供了锦灯笼多糖在制备治疗溃疡性结肠炎的药物中的应用，锦灯笼多糖是从常见食用水果锦灯笼中分离纯化得到的，具有来源广泛，取材便利等优点，便于工业化大量制备；本发明专利技术制备的PLP具有潜在的抗UC作用，其作用机制可能与保护结肠的完整性有关，为其在抗UC中的应用提供研究基础及理论依据；本发明专利技术通过醇沉水溶方法提取制备了PLP，该技术简化了PLP的制备流程，操作简便、成本低且纯度高，具有较好应用前景。用前景。用前景。

【技术实现步骤摘要】
锦灯笼多糖在制备治疗溃疡性结肠炎的药物中的应用
(一)

[0001]本专利技术涉及锦灯笼多糖在制备治疗溃疡性结肠炎的药物中的应用。
(二)
技术介绍

[0002]炎症性肠病(Inflammatory bowel disease，IBD)包括溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis，UC)和克罗恩病(Crohn's disease，CD)，是一种在世界范围内广泛流行的复杂难治性消化系统疾病，与免疫、炎症反应和肠道微生物群等多种因素有关，常伴有结肠粘膜和粘膜下层持续的炎性病变和纤维瘢痕，以及粘膜糜烂、隐窝肿胀等。肠粘膜屏障受损被认为是炎症性肠病的一个重要发病机制，肠上皮细胞的紧密连接对于维持肠黏膜完整性和保持肠黏膜屏障作用具有重要作用，紧密连接主要由闭锁蛋白(occludin)、claudin家族和紧密连接相关蛋白
‑
1(ZO
‑
1)等组成。目前虽然已有较为有效的治疗方法和药物，但90％以上的UC患者在疾病诊断后不久即开始口服或直肠给药5
‑
氨基水杨酸类药物，如美沙拉嗪和柳氮磺胺吡啶(SASP)。但此类药物仍然存在很多问题，如有效率低、副作用大等。进一步发掘具有显著治疗UC作用的高效、低毒和廉价的治疗药物仍具有重要的临床和现实意义。
[0003]锦灯笼(Physalis alkekengi L.var.franchetii(Mast.)Makino)，又名毛酸浆、姑茑、姑娘、菇娘儿，其花萼和果实提取物传统上广泛用于治疗炎性疾病，如咽炎、排尿困难、痰液过多、天疱疮和湿疹。其抗炎和免疫调节作用已在体外和体内以及临床研究的不同模型上进行了充分研究。锦灯笼多糖(PLP)是锦灯笼的主要成分之一，具有抗氧化、调节免疫、改善肠道菌群和治疗糖尿病等多方面药理活性。但目前为止尚未见到任何对PLP抗IBD相关的活性及其作用机制的报道。
(三)
技术实现思路

[0004]本专利技术目的是提供锦灯笼多糖在制备治疗溃疡性结肠炎的药物中的应用，解决目前治疗IBD相关药物匮乏的问题。
[0005]本专利技术采用的技术方案是：
[0006]锦灯笼多糖在制备治疗溃疡性结肠炎的药物中的应用。
[0007]所述锦灯笼多糖按如下方法制备获得：锦灯笼加入10～15倍质量的水，回流提取2～3次、每次1～2小时，合并提取液、浓缩，浓缩液加入3～5倍质量的乙醇，搅拌、1～4℃静置过夜，过滤取滤饼干燥，得到锦灯笼粗多糖加水溶解，然后加入二氯甲烷与正丁醇体积比3～7:1的混合溶剂，离心除去下层有机层及中间层，重复操作至蛋白除净，得到上层水溶液冷冻干燥，得到所述锦灯笼多糖。
[0008]所述锦灯笼多糖可加入药学可接受的辅料，制成下列之一的剂型：胶囊剂、片剂、颗粒剂、注射剂、缓释剂、口服液或滴丸剂。
[0009]所述锦灯笼多糖药用剂量为50～100mg/kg。
[0010]本专利技术还涉及一种锦灯笼多糖的提取方法，所述方法包括：锦灯笼加入10～15倍质量的水，回流提取2～3次、每次1～2小时，合并提取液、浓缩，浓缩液加入3～5倍质量的乙
醇，搅拌、1～4℃静置过夜，过滤取滤饼干燥，得到锦灯笼粗多糖加水溶解，然后加入二氯甲烷与正丁醇体积比3～7:1的混合溶剂，离心除去下层有机层及中间层，重复操作至蛋白除净，得到上层水溶液冷冻干燥，得到所述锦灯笼多糖。
[0011]本专利技术的有益效果主要体现在：
[0012]本专利技术提供了锦灯笼多糖在制备治疗溃疡性结肠炎的药物中的应用，锦灯笼多糖是从常见食用水果锦灯笼中分离纯化得到的，具有来源广泛，取材便利等优点，便于工业化大量制备；本专利技术制备的PLP具有潜在的抗UC作用，其作用机制可能与保护结肠的完整性有关，为其在抗UC中的应用提供研究基础及理论依据；本专利技术通过醇沉水溶方法提取制备了PLP，该技术简化了PLP的制备流程，操作简便、成本低且纯度高，具有较好应用前景。
(四)附图说明
[0013]图1为实施例1中PLP提取工艺流程图；
[0014]图2为实施例2中PLP的化学成分分析结果。(A)PLP的HPGPC谱。(B)PLP分子量分布图。(C)PLP的单糖组成图，包括鼠李糖、阿拉伯糖、盐酸氨基葡萄糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖和半乳糖醛酸等。(D)PLP的FT
‑
IR光谱。
[0015]图3为实施例3中PLP治疗DSS诱导小鼠UC的作用。(A)各组小鼠的体重变化；(B)各组小鼠的疾病指数的变化；(C)PLP有效地减轻了结肠组织的缩短；(D)不同组结肠长度的定量结果；(E)各组小鼠脾脏系数的变化；(F)脾脏系数的统计结果。每个点代表平均值
±
标准差(n＝6)。与对照组相比，##p<0.01，###p<0.001；与模型组相比，*p<0.05，***p<0.001。
[0016]图4为实施例4中PLP和SASP治疗DSS诱导的UC小鼠代表性结肠样本的组织学结果。(A)结肠段的典型组织学照片(箭头显示不完整组织、不规则腺体和许多浸润的炎性细胞的病理变化)；(B)结肠切片的形态学评分计算。与对照组相比，###p<0.001；与模型组相比，
[0017]***p<0.001。
[0018]图5为实施例5中PLP修复了DSS诱导的结肠损伤的肠屏障。(A)PLP增加了DSS诱导的小鼠紧密连接蛋白ZO
‑
1、Claudin
‑
1和Occludin的水平；ZO
‑
1(B)、Occludin(C)和Claidin
‑
1(D)的相对蛋白表达率的定量结果。每个值用平均
±
SD(n＝6)表示。与对照组相比，##p<0.01；与模型组相比，*p<0.05，**p<0.01。
(五)具体实施方式
[0019]下面结合具体实施例对本专利技术进行进一步描述，但本专利技术的保护范围并不仅限于此：
[0020]实施例1：锦灯笼多糖的制备：
[0021]1.1提取：
[0022]锦灯笼1kg置于40L煎药锅中，加入12倍量水，回流提取2小时，150目过滤；滤渣再加入12倍量水，继续回流提取1.5小时，150目过滤；滤渣再加入12倍量水，继续回流提取1小时，150目过滤，合并滤液。取滤液，减压浓缩(真空度
‑
0.07～
‑
0.1，温度65℃)至投料量的1.5倍(约1.5L)，缓慢加入4倍量的无水乙醇，并不断搅拌，4℃放置过夜，取出，过滤，滤饼干燥，得到锦灯笼粗多糖。
[0023]1.2纯化：
[0024]取步骤1.1得到的锦灯笼粗多糖，加水溶解，然后加入1/2体积的二氯甲烷与正丁醇(5:1，v/v)溶液，离心10分钟，除去下层有机层及中间层，重复操作至蛋白除净(重复操作8次)，得到上层水溶液。取上层本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.锦灯笼多糖在制备治疗溃疡性结肠炎的药物中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述锦灯笼多糖按如下方法制备获得：锦灯笼加入10～15倍质量的水，回流提取2～3次、每次1～2小时，合并提取液、浓缩，浓缩液加入3～5倍质量的乙醇，搅拌、1～4℃静置过夜，过滤取滤饼干燥，得到锦灯笼粗多糖加水溶解，然后加入二氯甲烷与正丁醇体积比3～7:1的混合溶剂，离心除去下层有机层及中间层，重复操作至蛋白除净，得到上层水溶液冷冻干燥，得到所述锦灯笼多糖。3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于所述锦灯笼多糖加入药学可接受的辅料，制成下列之...

【专利技术属性】
技术研发人员：张乔，胡兴江，吴霞，徐娜娜，赵青威，刘健，吴明兰，叶子奇，李济忱，刘剑，贺学林，郑运亮，李小冬，李卫芬，
申请(专利权)人：浙江大学医学院附属第一医院，
类型：发明
国别省市：