一种用于改善阿尔茨海默病的中药提取物及其应用制造技术

本发明专利技术属于生物医药技术领域，具体提供了一种用于改善阿尔茨海默病(AD)的中药提取物，包括金银花多糖，还可包括连翘酯苷A。本发明专利技术提供的这种中药提取物由植物天然产物组成，通过神经炎症通路/肠道微生态双途径介导细胞功能，以减轻神经炎症为目标对AD进行干预，能够缓解Aβ

【技术实现步骤摘要】
一种用于改善阿尔茨海默病的中药提取物及其应用


[0001]本专利技术属于医药领域，具体涉及一种用于改善阿尔茨海默病的中药提取物及其应用。

技术介绍

[0002]阿尔茨海默病(AD)是常见的神经退行性疾病，是引起老年痴呆的主要原因之一，病理特征包括脑内细胞外β淀粉样蛋白(Aβ)的沉积形成老年斑以及细胞内Tau蛋白过度磷酸化形成神经纤维缠结受遗传、环境等因素的影响，AD表现出潜伏期长、病程久等特点，一旦发生便不可逆转，且各种治疗手段只能延缓其病程发展，不能进行根治。目前主要使用胆碱酯酶抑制剂和谷氨酸受体拮抗剂(如多奈哌齐、美金刚)、靶向Aβ单抗药物、非甾体抗炎药等治疗AD，其治疗有一定效果，但副作用明显，并且仅限于某些针对症状，不能达到最佳的预防和治愈效果。为克服化学药在治疗上的不足，具有多靶点和副作用少等特点的植物天然产物获得了广泛关注，抗AD植物药的开发已成为当前热门发展方向。
[0003]金银花是忍冬科植物忍冬(Lonicera japonica Thunb.)的干燥花蕾，在我国具有很长的用药历史，具有清热解毒、抗病毒、抗菌、抗炎、免疫增强、清除自由基、抗内毒素等功效。连翘(Forsythia suspensa)是木犀科连翘属植物，具有抗病毒、抗菌、抗氧化和抗炎等药理作用。金银花和连翘是常用药对，联用能够增强清热解毒、疏散风热的功效。除代表性方剂银翘散之外，在现有上市的中成药中，涉及金银花
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连翘药对的中成药制剂有400余种。网络药理学研究表明金银花连翘1:1配伍使用具有比单独使用更强的抗炎作用；药对中金银花、连翘的单煎、合并及混煎样品的物质基础被证实发生了变化；此外，金银花连翘药对配伍对多糖的溶出具有促进作用。
[0004]目前苯乙醇苷类化合物和植物多糖在AD治疗中的作用逐渐被证实，而多糖和酚类物质之间的分子相互作用可以影响生物利用度和有益作用。连翘酯苷A是连翘的主要成分，属于苯乙醇苷类化合物，具有保护神经、改善记忆损伤、修复神经元的功能；金银花多糖能够通过调节肠道菌群以及短链脂肪酸生成改善免疫抑制小鼠肠道免疫功能。因此，结合二者在AD治疗中可能发挥的作用及机制，通过神经炎症通路/肠道微生态双途径介导细胞功能，以减轻神经炎症为目标对AD进行干预不失为一个极具潜力的研究方向。本专利技术提供了一种中药提取物，通过神经炎症通路/肠道微生态双途径介导细胞功能，以减轻神经炎症为目标对AD进行干预。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种可用于改善AD的安全、有效的多靶点药物，以克服现有技术中AD临床治疗药物多为单一靶点的化学药物，疗效欠佳，且副作用较大的问题。
[0006]为此，本专利技术提供了一种用于改善阿尔茨海默病的中药提取物，包括金银花多糖，所述金银花多糖通过以下方法制备：将金银花粉碎后，采用超声水提法进行提取，离心取上清液，浓缩后加入乙醇静置，然后离心取沉淀，沉淀加水溶解后萃取脱蛋白，得金银花粗多
糖；将金银花粗多糖柱层析纯化，得所述金银花多糖。
[0007]具体的，上述超声水提法的提取条件为超声时间25
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35min，超声温度55
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65℃，料液比以体积质量比计为1:25
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1:35。
[0008]具体的，上述金银花多糖制备过程中加入Savag试剂萃取脱蛋白；所述Savag试剂包括氯仿和正丁醇；所述氯仿与所述正丁醇的体积比为4：1。
[0009]具体的，上述金银花多糖制备过程中将金银花粗多糖经DEAE
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52纤维素层析柱、Sephadex G
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100凝胶层析柱纯化，得所述金银花多糖。
[0010]具体的，上述中药提取物还包括连翘酯苷A；所述连翘酯苷A和所述金银花多糖的质量浓度比为1:2到1:6。
[0011]具体的，上述连翘酯苷A的制备方法为：将连翘叶粉碎后置于容器中，使用乙醇溶液浸提，然后使用树脂进行吸附、洗脱，采用反相层析法处理洗脱液，得到所述连翘酯苷A。
[0012]具体的，上述浸提过程中乙醇浓度为40
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50％，液料比以体积质量比计为25:1
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30:1，提取温度40
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60℃，提取时间20
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30min。
[0013]具体的，上述吸附、洗脱过程中以AB
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8大孔吸附树脂为吸附剂，先用5
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10BV的水洗脱，再用5
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10BV的30％乙醇溶液和5
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10BV的50％乙醇溶液分别洗脱，洗脱流速2
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5BV/h。
[0014]本专利技术提供的这种中药提取物可用于制备改善AD的药物。
[0015]具体的，上述改善AD的药物以金银花多糖与连翘酯苷A混合物或金银花多糖为活性成分，还包括药学上可接受的辅料。
[0016]与现有技术相比，本专利技术具有以下优点和有益效果：
[0017]本专利技术提供的这种中药提取物通过神经炎症通路/肠道微生态双途径介导细胞功能，以减轻神经炎症为目标对AD进行干预，能够缓解Aβ
25
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35
诱导的HT
‑
22细胞损伤，促进小鼠空间记忆的形成和巩固，显著缓解AD病理表征，并通过调控IL
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17信号通路相关基因的表达来缓解AD病理中的神经炎症，还可通过调节特定物种的丰度、促进有益菌增加，纠正肠道菌群紊乱来改善AD模型小鼠认知功能障碍，对改善AD有显著效果。此外，该中药提取物由植物天然产物组成，是一种安全、有效的多靶点药物，克服了单一靶点的化学药物疗效欠佳，且副作用较大的问题。
[0018]以下将结合附图对本专利技术做进一步详细说明。
附图说明
[0019]图1是本专利技术实施例2中FA和/或LP的细胞毒性以及其对Aβ
25
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35
诱导的HT
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22细胞损伤的影响；a、b和c：FA和/或LP在HT
‑
22细胞上的细胞活力的统计分析；d、e和f：FA和/或LP对Aβ
25
‑
35
诱导的HT
‑
22细胞死亡的细胞活力的统计分析。
[0020]图2是本专利技术实施例2中连翘酯苷A、金银花多糖及其混合物对Aβ
25
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35
诱导的HT
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22细胞线粒体膜电位的影响结果图。
[0021]图3是本专利技术实施例3中小鼠的空间探索实验结果；a,实验设计；b,红外轨迹记录；c,定位航行实验中小鼠找到平台所需的时间；d：空间探索实验中小鼠穿越平台所在象限的次数；e,空间探索实验中小鼠搜寻平台的游泳路径；f：空间探索实验中小鼠在目标象限内滞留的时间。
[0022]图4是本专利技术实施例3中连翘酯苷A、金银花多糖及其混合物对Aβ诱导的HT
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22细胞
及小鼠血清本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于改善阿尔茨海默病的中药提取物，包括金银花多糖，其特征在于，所述金银花多糖通过以下方法制备：将金银花粉碎后，采用超声水提法进行提取，离心取上清液，浓缩后加入乙醇静置，然后离心取沉淀，沉淀加水溶解后萃取脱蛋白，得金银花粗多糖；将金银花粗多糖柱层析纯化，得所述金银花多糖。2.如权利要求1所述的用于改善阿尔茨海默病的中药提取物，其特征在于：所述超声水提法的提取条件为超声时间25
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35min，超声温度55
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65℃，料液比以体积质量比计为1:25
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1:35。3.如权利要求1所述的用于改善阿尔茨海默病的中药提取物，其特征在于：加入Savag试剂萃取脱蛋白；所述Savag试剂包括氯仿和正丁醇；所述氯仿与所述正丁醇的体积比为4：1。4.如权利要求1所述的用于改善阿尔茨海默病的中药提取物，其特征在于：将金银花粗多糖经DEAE
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52纤维素层析柱、Sephadex G
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100凝胶层析柱纯化，得所述金银花多糖。5.如权利要求1所述的用于改善阿尔茨海默病的中药提取物，其特征在于还包括连翘酯苷A；所述连翘酯苷A和所述金银花多糖的质量浓度比为1:2到1:6。6.如权利要求5所述的用于改善阿尔茨海默病...

【专利技术属性】
技术研发人员：李卫东，李可，李宗朔，
申请(专利权)人：北京中医药大学，
类型：发明
国别省市：