【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种纸张辅助的多肽集成化绿色合成方法，属于绿色化学和有机合成。
技术介绍
1、多肽通常是指10～100个氨基酸通过肽键连接而成的化合物，其连接方式与蛋白质相同，它是生物体内天然存在的生物活性物质，从发现至今已有超过百年的历史。在生物体内发现的多肽已达上万种，其生物活性广泛而重要，能够广泛作用于内分泌系统、免疫系统、消化系统、心血管系统、血液系统、肌肉骨骼系统等。多肽作为药物应用也已超过70年，凭借其毒性低、特异性高、分子量小等独特优势而受到越来越多的关注，截止目前全球已有超过100个多肽类药物获批，这其中不乏如格拉替雷、奥曲肽、利拉鲁肽、度拉糖肽和索马鲁肽等年销售额在数十亿美元的重磅品种。
2、1963年，merrifield首次提出了固相多肽合成方法(spss)，并以此法合成了四肽leu-ala-gly-val，该法一出现就因为其合成迅速，方便，成为多肽合成的首选方法，是多肽合成化学上的重大突破。1972年，由于9-芴甲氧羰基(fmoc)在碱性条件下可以迅速脱除，carpino首先将其用于保护氨基酸的氨基端，另外，而且因其反应条件温和，在后来的多肽合成进展中迅速得到使用，芴甲氧羰基(fmoc)用作多肽固相合成中氨基酸原料的氨基保护基，它能用哌啶等仲胺分子脱除，但对酸比较稳定故可与叔丁基(tbu)、三苯甲基(trt)等半永久性保护基团搭配使用，如此一来最终的裂解在tfa中就能实现，过程比较温和，近年来，基于fmoc法的多肽固相合成得到了广泛的应用。
3、fmoc固相合成法采用的树脂不可回收，
技术实现思路
1、针对现有技术中存在的问题，本专利技术提供了一种纸张辅助的多肽集成化绿色合成方法，该方法简单高效、绿色环保、应用范围广泛，适用于多肽的高通量筛选。
2、本专利技术中一些常用的缩写具有以下含义：
3、fmoc：芴甲氧羰基；
4、dic：n，n′-二异丙基碳化二亚胺；
5、hobt：1-羟基苯骈三唑；
6、tfa：三氟乙酸；
7、dmf：n，n-二甲基甲酰胺；
8、eedq：2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1，2-二氢喹啉；
9、tibs：三异丙基硅烷
10、本专利技术的技术方案如下：
11、(a)在含有纤维素的纸张上连接linker，形成含有活泼羟基的末端以连接氨基酸；
12、(b)封闭纸张上多余的羟基；
13、(c)从多肽的c端到n端进行合成，采用fmoc保护氨基酸进行偶联；
14、(d)羧基的活化；
15、(e)fmoc的脱保护；
16、(f)多肽侧链保护基团的脱保护及多肽的裂解；
17、步骤(a)所述linker的结构如式i所示：
18、
19、其中n＝1，2，3，4，5；
20、x1＝o，nme，s，nhboc；
21、x2＝h，ome，nhboc，n(me)2，oet，oph，nhac；
22、x3＝h，or，r为烷基，例如me，et，ph。
23、(b)步骤采用乙酸酐溶液对剩余羟基进行封闭。
24、(c)步骤中氨基酸的偶合中使用的缩合剂选自二异丙基碳二亚胺、1-羟基苯并三唑、二环己基碳二亚胺、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、苯并三氮唑-n，n，n′，n′-四甲基脲六氟磷酸酯中的一种或多种。
25、(d)步骤预活化10min～30min。
26、(e)步骤采用含20％哌啶的dmf溶液脱掉fmoc基团。
27、(f)步骤采用裂解液为(90％(体积比)tfa+3％(体积比)tibs+7％(体积比)蒸馏水)脱掉侧链修饰基团及从纸张上切除多肽，用冰乙醚沉淀裂解所溶液，将沉淀冷冻干燥，即得到目标多肽。
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1.种纸张辅助的多肽集成化绿色合成方法，其特征在于，以含有纤维素的纸张为负载剂，以设计的linker为连接剂，采用改进后的固相合成方法实现多肽的高通量合成，以便于后续多肽的高通量活性筛选，具体步骤为：(A)在含有纤维素的纸张上连接linker，形成含有活泼羟基的末端以连接氨基酸；
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，(A)所述linker的结构如式I所示：
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，(B)步骤采用乙酸酐溶液对剩余羟基进行封闭。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，(C)步骤中氨基酸的偶合中使用的缩合剂选自二异丙基碳二亚胺、1-羟基苯并三唑、二环己基碳二亚胺、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、苯并三氮唑-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯中的一种或多种。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，(D)步骤预活化10min～30min。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，(E)步骤采用含20％哌啶的DMF溶液脱掉Fmoc基团。
7.根据权利要求1所述的方法，其
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，用冰乙醚沉淀裂解所得溶液，将沉淀冷冻干燥，即得到目标多肽，便于后续高通量活性测试。
...【技术特征摘要】
1.种纸张辅助的多肽集成化绿色合成方法，其特征在于，以含有纤维素的纸张为负载剂，以设计的linker为连接剂，采用改进后的固相合成方法实现多肽的高通量合成，以便于后续多肽的高通量活性筛选，具体步骤为：(a)在含有纤维素的纸张上连接linker，形成含有活泼羟基的末端以连接氨基酸；
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，(a)所述linker的结构如式i所示：
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，(b)步骤采用乙酸酐溶液对剩余羟基进行封闭。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，(c)步骤中氨基酸的偶合中使用的缩合剂选自二异丙基碳二亚胺、1-羟基苯并三唑、二环己基碳二亚胺...
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