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一种Cre重组酶调控系统及其应用技术方案

技术编号:37451617 阅读:42 留言:0更新日期:2023-05-06 09:23
本发明专利技术公开了一种Cre重组酶调控系统及其应用,所述Cre重组酶调控系统包括ER50基因。本发明专利技术方案,通过引入4OHT诱导降解蛋白ER50构建得到Cre重组酶调控系统,本发明专利技术方案构建得到的Cre重组酶调控系统中,4OHT通过对ER50和ERT2的双重调控实现了对功能基因Cre功能更加严格的调控,降低了Cre系统背景问题。本系统的应用将为未来在细胞和动物上,进行更加严谨的基因表达时空调控,为未来细胞和动物内基因的条件性敲除提供了更为可靠的研究工具。条件性敲除提供了更为可靠的研究工具。

【技术实现步骤摘要】
一种Cre重组酶调控系统及其应用


[0001]本专利技术属于基因工程
,具体涉及一种Cre重组酶调控系统及其应用。

技术介绍

[0002]条件性基因(Conditional Gene Knockout)敲除作为基因功能获得性研究的新型手段,通过将某个基因的表达限制在特定的细胞组织或发育阶段,从而实现对小鼠基因组的时空特异性修饰。CKO技术主要是通过如Cre

LoxP系统、FLP

Frt系统等特异性重组酶系统等来实现时空特异性基因敲除。其中Cre

LoxP系统是最广泛使用的条件性基因敲除系统,通过结合Cre重组酶系统和诱导型基因表达控制系统来实现基因编辑。将LoxP序列插入目标基因DNA序列的两端,可获得含有两个LoxP位点的突变体小鼠。当这些小鼠与Cre重组酶小鼠杂交时,就可获得条性基因敲除小鼠。该小鼠模型是遗传研究的一个重要工具。
[0003]传统的基因敲除技术是对机体内的靶基因进行全部敲除,虽然为研究基因的功能提供了很大的便利,但是也存在严重缺陷,如基因敲除导致发育缺本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种Cre重组酶调控系统,其特征在于,所述Cre重组酶调控系统包括ER50基因。2.根据权利要求1所述的Cre重组酶调控系统,其特征在于,所述ER50基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。3.根据权利要求1所述的Cre重组酶调控系统,其特征在于,所述Cre重组酶调控系统依次包括下述功能元件:可诱导启动子、ER50、ERT2、Cre重组酶的核苷酸序列、ERT2、sgRNA序列,其中,ERT2序列和Cre重组酶顺序可互换;sgRNA序列靶向目的基因。4.根据权利要求3所述的Cre重组酶调控系统,其特征在于,所述可诱导启动子包括EFS启动子、Mx1或TRE启动子。5.根据权利要求3所述的Cre重组酶调控系统,其特征在于,所述Cre重组酶为Escherichia virus P1 Cre重组酶、Sphingomonas sp.ERG5Cre重组酶或Salmonella phage SJ46 Cre重组酶。6.根据权利要求3所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员:彭晓华邹庆剑陈敏吴运琴汪金玲池玉娥周小青唐成程孔雯婷林佩雯
申请(专利权)人:五邑大学
类型:发明
国别省市:

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