一种鸡TDRD1基因启动子区域组蛋白甲基化水平的调控方法技术

技术编号:37434963 阅读:27 留言:0更新日期:2023-05-06 09:07
本发明专利技术提供了一种鸡TDRD1基因启动子区域组蛋白甲基化水平的调控方法,属于基因编辑技术领域。本发明专利技术的方法包括如下步骤:(1)设计并扩增得到靶向鸡TDRD1基因启动子区域的sgRNA;(2)将酶切后的dCas9

【技术实现步骤摘要】
一种鸡TDRD1基因启动子区域组蛋白甲基化水平的调控方法


[0001]本专利技术涉及基因编辑
,尤其涉及一种鸡TDRD1基因启动子区域组蛋白甲基化水平的调控方法。

技术介绍

[0002]DNA甲基化(DNAmethylation)为DNA化学修饰的一种形式,能够在不改变DNA序列的前提下,改变遗传表现。所谓DNA甲基化是指在DNA甲基化转移酶的作用下,在基因组CpG二核苷酸的胞嘧啶5号碳位共价键结合一个甲基基团。大量研究表明,DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变,从而控制基因表达。为改变基因的DNA甲基化状态,一般是通过敲除TET3、添加DNMT抑制剂等方法;同样为了改变组蛋白甲基化修饰水平会采取通过影响组蛋白甲基化酶或者组蛋白去甲基化酶的水平、缺失Set1等方法,但这些方法都不能够研究特定区域表观遗传修饰对基因的影响。
[0003]2013年,齐等人将来自化脓性链球菌的Cas9的核酸酶结构域(在HNH结构域中产生H840A突变和在RuvC结构域中产生D10A突变)进行突变,以产本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鸡TDRD1基因启动子区域组蛋白甲基化水平的调控方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)设计并扩增得到靶向鸡TDRD1基因启动子区域的sgRNA;(2)将酶切后的dCas9

LSD1载体与步骤(1)的sgRNA连接,得到具有靶向性的dCas9

LSD1打靶载体;(3)将所述dCas9

LSD1打靶载体转染入细胞中,来调控鸡TDRD1基因启动子区域组蛋白甲基化水平。2.根据权利要求1所述的调控方法,其特征在于,所述鸡TDRD1基因启动子区域为

800bp~0bp的区域。3.根据权利要求2所述的调控方法,其特征在于,所述sgRNA的扩增引物包括SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2、SEQ...

【专利技术属性】
技术研发人员:靳锴李新林高晓敏薛倩韩威李碧春左其生张亚妮牛英杰孙红艳
申请(专利权)人:江苏省家禽科学研究所
类型:发明
国别省市:

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