自粪便提取人肠壁上皮细胞DNA的方法和试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种自粪便提取人肠壁上皮细胞DNA的方法和试剂盒。该自粪便提取人肠壁上皮细胞DNA的方法包括如下步骤：采集的粪便样本置于保存液中，所述保存液中含有核酸裂解试剂及质量分数1～10％的交联聚乙烯吡咯烷酮；取保存液中的粪便样本离心取上清液，将上清液置于一离心管中；向离心管中加入磁珠，混匀，然后施加磁场，将未吸附到磁珠上的废液排出，停止施加磁场；向离心管中加入洗涤液，使磁珠分散均匀，然后施加磁场，将未吸附到磁珠上的废液排出，停止施加磁场；将离心管中的磁珠分散并使残留的溶剂挥发；向离心管中加入DNA洗脱液，混匀，收集DNA。本发明专利技术操作简便，且允许对粪便样本常温保存的前提下保护脱落的人肠壁上皮细胞，提高DNA提取质量。提高DNA提取质量。

【技术实现步骤摘要】
自粪便提取人肠壁上皮细胞DNA的方法和试剂盒


[0001]本专利技术涉及一种自粪便提取人肠壁上皮细胞DNA的方法和试剂盒。

技术介绍

[0002]结肠直肠癌(carcinoma of colon and rectum)是胃肠道中常见的恶性肿瘤，早期症状不明显，随着癌肿的增大而表现排便习惯改变、便血、腹泻、腹泻与便秘交替、局部腹痛等症状，晚期则表现贫血、体重减轻等全身症状。结肠直肠癌的发病率和病死率在消化系统恶性肿瘤中仅次于胃癌、食管癌和原发性肝癌。
[0003]对于近期出现排便习惯改变或血便的病人应不失时机地进行直肠指诊、X射线钡剂灌肠、乙状结肠镜或纤维结肠镜检查。X射线钡剂空气双重对比造影可以显示出钡剂充盈缺损、肠腔狭窄、粘膜破坏等征象，从而确定肿瘤的部位和范围。乙状结肠镜及纤维结肠镜检查可以直接观察到全结肠及直肠粘膜形态，对可疑病灶能够在直视下采取活体组织检查，对提高诊断的准确率，尤其对微小病灶的早期诊断很有价值。直肠指诊检查是诊断直肠癌的最简单而又非常重要的检查方法，它不仅可以发现肿物,而且可以确定肿块的部位、大小、形态、手术方式本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种自粪便提取人肠壁上皮细胞DNA的方法，其特征在于，包括如下步骤：(A)采集的粪便样本置于保存液中，所述保存液中含有核酸裂解试剂及质量分数1～10％的交联聚乙烯吡咯烷酮；(B)取保存液中的粪便样本离心取上清液，将上清液置于一离心管中；(C)向离心管中加入磁珠，混匀，然后施加磁场，将未吸附到磁珠上的废液排出，停止施加磁场；(D)向离心管中加入洗涤液，使磁珠分散均匀，然后施加磁场，将未吸附到磁珠上的废液排出，停止施加磁场；(E)将离心管中的磁珠分散并使残留的溶剂挥发；(F)向离心管中加入DNA洗脱液，混匀，收集DNA。2.根据权利要求1所述的自粪便提取人肠壁上皮细胞DNA的方法，其特征在于，步骤(A)中在采集的粪便样本置于保存液中常温或低于常温保存72小时内，离心取上清。3.根据权利要求1或2所述的自粪便提取人肠壁上皮细胞DNA的方法，其特征在于，所述核酸裂解试剂选自硫氰酸胍和盐酸胍中的一种或两种的组合。4.根据要求1所述的自粪便提取人肠壁上皮细胞DNA的方法，其特征在于，所述核酸裂解试剂的浓度为1～10mol/L，所述保存液还包括：乙二胺四乙酸、氯化钠、柠檬酸钠、缓冲液及无水乙醇。5.根据权利要求1所述的自粪便提取人肠壁上皮细胞DNA的方法，其特征在于，步骤(C)中，混匀时间为10～30min。6.根据权利要求1所述的自粪便提取人肠壁上皮细胞DNA的方法，其特征在于，步骤(C)中，向离心管中加入无水乙醇和磁珠，放入颠倒混匀仪混匀10～30min，瞬时离心后将离心管置于磁场中，将离心管中的废液排出。7.根据权利要求1所述的自粪便提取人肠壁上皮细胞DNA的方法，其特征在于，步骤(D)中，向离心管中加入第一洗涤液，使磁珠分散均匀，瞬时离心后将离心管置于磁场中，将未吸附到磁珠上的废液排出；向离心...

【专利技术属性】
技术研发人员：颜菁，邵庆博，林依颖，陈皓睿，
申请(专利权)人：苏州美汇医药技术有限公司，
类型：发明
国别省市：