羟基红花黄色素A的制备方法技术

本发明专利技术属于天然药物提取领域，具体涉及一种羟基红花黄色素A的制备方法。所述羟基红花黄色素A制备方法包括以下步骤：提取与浓缩；絮凝；HZ色谱3

【技术实现步骤摘要】
羟基红花黄色素A的制备方法


[0001]本专利技术属于天然药物提取领域，具体涉及一种羟基红花黄色素A的制备方法。

技术介绍

[0002]红花为菊科植物红花Carthamus tinctorius L.的干燥花。夏季花由黄变红时采摘，阴干或晒干。具有活血通经，散瘀止痛之功效。红花是一种常见的活血化淤中药，可用于治疗冠心病、心绞痛等诸多血液循环障碍。也用于治疗经闭，痛经，恶露不行，症瘕痞块，胸痹心痛，瘀滞腹痛，胸胁刺痛，跌扑损伤，疮疡肿痛。
[0003]红花中富含红花黄色素，且红花黄色素在所述红花中的比例为20％
‑
30％。羟基红花黄色素A是红花黄色素的主要药效物质。羟基红花黄色A (Hydroxysafflor yellow A)是具有单查尔酮苷类结构的化合物，是红花药理功效的最有效水溶性部位，可抑制血小板激活因子诱发的血小板聚集与释放，可竞争性地抑制血小板激活因子与血小板受体的结合，是红花黄色素的活血化瘀有效成分。具有抗凝血酶诱导的血小板聚集活性，抗炎活性，细胞保护活性，和抗肿瘤活性，以及抗血小板和抗心肌缺血的功效。同时羟基红花黄色素A也可用于制作保健和化妆品，还是很好的食品染料。红花黄色素是天然食品染色剂。由于其呈鲜艳黄色，毒性极低，着色力强，色调稳定，被广泛应用于果汁型饮料、糖果、糕点彩装等食品着色。
[0004]现有技术中虽然已经公开了羟基红花黄色素A及其分离和纯化方法，如中国专利申请CN201010606888.5公开一种羟基红花黄色素A的制备方法，该方法利用高速逆流色谱从红花中快速大量制备高纯度羟基红花黄色素A，为红花制剂及羟基红花黄色素A的药理药效学研究提供了物质基础。中国专利申请CN02132781.5公开一种羟基红花黄色素A的制备方法，该制备方法通过提取、分离醇沉、纯化制备得到羟基红花黄色素A。
[0005]然而，现有的羟基红花黄色素A产品纯度不高。从现有的红花黄色素的纯度上来看，基本都存在10
‑
20％以上的杂质物质，因此在分离之后还需要进一步继续纯化。这些杂质的结构性质均都未能定性，存在一定的质量不可控性。另外，目前的红花黄色素提取工艺还存在的流程长、能耗大、收率低、和生产成本高等问题。
[0006]本专利技术旨在提供一种羟基红花黄色素A的制备方法，采用了更加环保的浸提方法进行提取，相对于超声提取方法，显著降低了羟基红花黄色素A制备过程中的能耗水平，进而提供了一种能耗低，环保的制备方法。本来专利技术提供的羟基红花黄色素A制备方法具有工艺流程短，能耗低，环保，产品纯度高，有效降低了红花黄色素的生产成本。

技术实现思路

[0007]为克服以上技术问题，本专利技术提供了一种羟基红花黄色素A的制备方法，通过优化的工艺提取、分离和纯化步骤而获得的羟基红花黄色素A制备方法，提供一种能够快速、低成本制备高纯度的羟基红花黄色素A的方法。
[0008]为实现以上目的，本专利技术提供的技术方案如下：
[0009]一种羟基红花黄色素A的制备方法，包括以下步骤：
[0010](1)提取与浓缩：取红花使用60
‑
90％(体积浓度)的乙醇进行提取，将提取液进行浓缩，制得浓缩液；
[0011](2)絮凝：将浓缩液使用脱乙酰基壳聚糖溶液进行絮凝，制得絮凝处理液；
[0012](3)HZ色谱3
#
树脂柱分离：将絮凝处理液经HZ色谱3
#
树脂柱分离，上样后用纯化水以0.5
‑
1BV/h的速度洗脱，收集洗脱液；
[0013](4)HZ001阳离子树脂交换：将(3)中的洗脱液使用HZ001阳离子树脂进行交换处理，上样后用纯化水以0.5
‑
1BV/h的速度洗脱，收集洗脱液；
[0014](5)凝胶柱分离：将(4)中洗脱液经过LH
‑
20凝胶柱分离，上样后用纯化水洗脱，上样洗脱速度为0.2
‑
0.4BV/h，收集洗脱液；
[0015](6)浓缩与干燥：减压浓缩至干，粉碎成细粉，乙醇50℃保温搅拌2小时，抽滤，滤饼再用乙醇浸泡洗涤2次，抽滤，后进行真空干燥，得到羟基红花黄色素A。
[0016]优选地，(1)中，所述提取使用80
‑
90％的乙醇(体积浓度)提取。
[0017]优选地，(1)中，所述提取的温度为65
‑
70℃。
[0018]优选地，(2)中，絮凝时使用的试剂为1％浓度的冰乙酸制成的含2％脱乙酰基壳聚糖的溶液。
[0019]优选地，(2)中，所述絮凝的处理过程为：先将搅拌速度降低至15
‑
60rpm搅拌下搅拌后，加入红花药材量4
‑
6％的硅藻土进行处理5
‑
10min，静置1
‑
3h。
[0020]优选地，(2)中，所述絮凝的处理过程为：先将搅拌速度降低至15
‑
60rpm搅拌下搅拌后，加入红花药材量5％的硅藻土进行处理5min，静置2h。
[0021]优选地，(2)中，所述絮凝的处理过程为在80rpm的搅拌速度状态下加入药材量3.0
‑
3.5％的1％冰乙酸制2％脱乙酰基壳聚糖溶液，继续搅拌1
‑
5分钟，降低搅拌速度至15
‑
60rpm后加入药材量5％的硅藻土搅拌5分钟，静置2小时。
[0022]优选地，(3)中，所述HZ色谱3
#
树脂柱分离，上样后用纯化水以0.5
‑
1BV/h的速度洗脱，当羟基红花黄色素A黄色色带到达柱子底部时(洗脱液用紫外检测器在403nm吸收波长下监测到强烈吸收时或洗脱液的白利度由10
°
Bx降至8
°
Bx时，或洗脱液颜色明显由浅黄色转为浅红色)开始以每份0.02
‑
0.04BV分段收集洗脱液5
‑
10份，分别取1μ点样于同一聚酰胺板于35
‑
40％的乙酸中展开，合并斑点明显的洗脱液并继续收集洗脱液至1
‑
2BV。
[0023]优选地，(3)中，所述HZ色谱3
#
树脂柱分离，上样后用纯化水以0.5
‑
1BV/h的速度洗脱，当羟基红花黄色素A黄色色带到达柱子底部时，开始以每份0.04BV分段收集洗脱液8份，分别取1μ点样于同一聚酰胺板于36％乙酸中展开，合并斑点明显的洗脱液并继续收集洗脱液至1.5BV。
[0024]优选地，(4)中，所述HZ001阳离子树脂交换，上样后用纯化水以0.5
‑
1BV/h的速度洗脱，当流出液开始变黄时开始收集，收集量为上样药液量及柱床体积之和，收集液用氨水调节pH至4.2
‑
4.7，45℃以下减压浓缩至20
‑
30℃下的相对密度为1.07
‑
1.10。
[0025本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种羟基红花黄色素A的制备方法，包括以下步骤：(1)提取与浓缩：取红花使用60
‑
90％的乙醇进行提取，将提取液进行浓缩，制得浓缩液；(2)絮凝：将浓缩液使用壳聚糖和/或硅藻土进行絮凝，制得絮凝处理液；(3)HZ色谱3
#
树脂柱分离：将絮凝处理液经HZ色谱3
#
树脂柱分离，上样后用纯化水以0.5
‑
1BV/h的速度洗脱，收集洗脱液；(4)HZ001阳离子树脂交换：将(3)中的洗脱液使用HZ001阳离子树脂进行交换处理，上样后用纯化水以0.5
‑
1BV/h的速度洗脱，收集洗脱液；(5)凝胶柱分离：将(4)中洗脱液经过LH
‑
20凝胶柱分离，上样后用纯化水洗脱，上样洗脱速度为0.2
‑
0.4BV/h，收集洗脱液；(6)浓缩与干燥：将(5)中洗脱液进行浓缩与干燥，得到羟基红花黄色素A。2.根据权利要求1所述的羟基红花黄色素A的制备方法，其特征在于，(1)中，所述提取使用80
‑
90％的乙醇提取；所述提取的温度为65
‑
70℃。3.根据权利要求1所述的羟基红花黄色素A的制备方法，其特征在于，(2)中，所述絮凝使用的试剂为1％浓度的冰乙酸制成的含2％脱乙酰基壳聚糖的溶液。4.根据权利要求3所述的羟基红花黄色素A的制备方法，其特征在于，(2)中，所述絮凝的处理过程还包括在壳聚糖溶液处理后将搅拌速度降低至15
‑
60rpm搅拌下后，加入红花药材量4
‑
6％的硅藻土进行处理5
‑
10min，静置1
‑
3h。5.根据权利要求1所述的羟基红花黄色素A的制备方法，其特征在于，(3)中，所述HZ色谱3
#
树脂柱分离，上样后用纯化水以0.5
‑
1BV/h的速度洗脱，当羟基红花黄色素A黄色色带到达柱子底部时开始以每份0.02
‑
0.04BV分段收集洗脱液5
‑
10份，分别取1μ点样于同一聚酰胺板于35
‑
40％的乙酸中展开，合并斑点明显的洗脱液并继续收集洗脱液至1
‑
2BV。6.根据权利要求1所述的羟基红花黄色素A的制备方法，其特征在于，(4)中，所述HZ001阳离子树脂交换，上样后用纯化水以0.5
‑
1BV/h的速度洗脱，当流出液开始变黄时开始收集，收...

【专利技术属性】
技术研发人员：王廷春，周清，潘梅英，方哲，马仁强，
申请(专利权)人：广州博济医药生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：