一种检测副溶血弧菌的双靶标引物组、试剂盒和检测体系及方法技术

本发明专利技术提供了细菌一种检测副溶血弧菌的双靶标引物组、试剂盒和检测体系及方法，涉及细菌可视化检测技术领域。本发明专利技术分别以TDH和TRH基因为靶点，基于CRISPR/Cas12a，开发了一种针对副溶血性弧菌的新型检测方法，该方法灵敏度高，特异性强，耗时短，且结果可在蓝光下肉眼判读，适于现场快速筛查或检测。适于现场快速筛查或检测。适于现场快速筛查或检测。

【技术实现步骤摘要】
一种检测副溶血弧菌的双靶标引物组、试剂盒和检测体系及方法


[0001]本专利技术属于细菌可视化检测
，具体涉及一种检测副溶血弧菌的双靶标引物组、试剂盒和检测体系及方法。

技术介绍

[0002]近年来，副溶血性弧菌(Vibrio Parahaemolyticus)已被列为导致食源性疾病最主要的细菌之一，其广泛存在于海水，淤泥以及鱼、虾、蟹、贝类等海产品中。误食携带副溶血性弧菌的海产品容易引发食源性中毒。此外，副溶血性弧菌的暴发可在短时间内导致大量养殖海产死亡，造成巨额经济损失。自1950年被首次发现于日本以来，在世界各地均出现了副溶血性弧菌的散发或暴发流行，其已经成为全球性的公共卫生问题，对人类身体健康及生命财产安全都构成了严重威胁。
[0003]传统的副溶血弧菌的检测方法主要有分离鉴定法、免疫检测法和核酸检测法。但分离鉴定法因其检测周期长、工作量大、对工作人员实验技能要求高等弊端限制了其应用范围；免疫检测法特异性强，但对试剂的选择性高且灵敏度较低；传统的PCR扩增技术由于要设置不同的温度阶段实现扩增，对实验设备要求较高，因此，其更本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测副溶血弧菌的双靶标引物组，其特征在于，以副溶血弧菌的TDH基因和TRH基因为靶标，根据所述靶标的靶点序列设计RPA引物。2.根据权利要求1所述双靶标引物组，其特征在于，所述TDH基因的靶点序列如SEQ ID NO.1所示，所述TRH基因的靶点序列如SEQ ID NO.2所示。3.根据权利要求1或2所述双靶标引物组，其特征在于，针对TDH的靶点序列设计的RPA引物组选自F1和R1的组合，或F2和R2的组合；针对TRH的靶点序列设计的RPA引物组选自F3和R3的组合，或F4和R4的组合，或F5和R5的组合；所述F1的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述R1的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述F2的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述R2的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示，所述F3的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示，所述R3的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示，所述F4的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示，所述R4的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示，所述F5的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示，所述R5的核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示。4.一种检测副溶血弧菌的体系，其特征在于，包括利用权利要求1～3任一项所述双靶标引物组扩增得到的产物，Cas12a...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨栋，李君文，姜翰集，高志贤，尹静，金敏，谭蓉，师丹阳，李海北，周树青，陈天姣，杨忠委，
申请(专利权)人：军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所，
类型：发明
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