LAMP2A蛋白在制备用于胃癌的癌前预警药物或试剂盒中的应用制造技术

本发明专利技术属于生物医药领域，涉及LAMP2A蛋白的医药用途。具体地，本发明专利技术涉及LAMP2A蛋白在制备用于胃癌的癌前预警药物或试剂盒中的应用。具体地，本发明专利技术涉及选自如下的(1)

【技术实现步骤摘要】
LAMP2A蛋白在制备用于胃癌的癌前预警药物或试剂盒中的应用


[0001]本专利技术涉及胃癌诊断技术，具体涉及MG5单克隆抗体及其在预警胃癌前病变癌变风险中的应用。

技术介绍

[0002]传统的血清学标志物如胃蛋白酶原(pepsinogen,PG)中PG I与PG II的比值、幽门螺杆菌(helicobacter pylori,HP)抗体、胃泌素17(gastrin
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17,G
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17)在胃癌诊断中具有一定辅助效能，但尚不能预警胃癌前疾病和癌前病变发生癌变的风险。根据CACA胃癌指南，慢性萎缩性胃炎、残胃、腺瘤型息肉、经久不愈的慢性胃溃疡等被认为是具有胃癌发生风险的癌前疾病。而胃黏膜上皮异型增生、上皮内瘤变以及不完全性大肠型肠上皮化生等是一类病理组织学改变，被认为是与胃癌临界的癌前病变。癌前疾病与癌前病变可以统称为癌前状态。
[0003][0004]而在胃癌发生发展过程中，正确评估胃癌发生风险是提高胃癌早期检出率的关键。因此，本领域迫切需要寻求能够预警胃癌前病变发生癌变风险的标志物和策略，提高胃癌前病变癌变风险的预警效能，提高胃癌早期检出率和患者预后。

技术实现思路

[0005]LAMP2A(lysosomal
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associated membrane protein 2A)蛋白是溶酶体相关膜蛋白LAMP2的亚型之一，本专利技术人经过深入的研究，利用免疫组织化学技术对较大样本的临床标本检测，发现LAMP2A蛋白在胃癌前病变组织中呈阳性表达，且在胃癌前病变恶性动态进展过程中，表达阳性率逐渐升高，提示其阳性表达能够用于胃癌癌前风险检测和诊断。
[0006]同时，专利技术人在研究团队30年来一直从事胃癌标志物研发及机制研究，利用杂交瘤技术制备了一系列胃癌特异性单克隆抗体，其中，MG5
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mAb是经过筛选并验证了的胃癌特异性抗体，可用于免疫组化和血清学检测其抗原表达，在胃癌的预警、早诊中具有重要意义。进一步鉴定出MG5
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mAb的特异性抗原为LAMP2A。
[0007]本专利技术一方面涉及选自如下的(1)
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(4)项中的任一项在制备用于胃癌的癌前预警药物或试剂盒中的应用：
[0008](1)LAMP2A蛋白；
[0009](2)编码LAMP2A蛋白的核酸；
[0010](3)检测LAMP2A蛋白表达的试剂；
[0011](4)检测编码LAMP2A蛋白的核酸的表达的试剂。
[0012]所述胃癌的癌前预警是胃癌前病变病程进展风险预测。所述胃癌的癌前预警是胃癌前疾病和癌前病变发生癌变的风险预测。
[0013]在本专利技术的一个或多个实施方式中，所述检测为定量检测或定性检测。所述检测
LAMP2A蛋白表达是指检测LAMP2A蛋白表达是阳性还是阴性。检测编码LAMP2A蛋白的核酸的表达是指检测编码LAMP2A蛋白的核酸的表达是阳性还是阴性。
[0014]在本专利技术的一个或多个实施方式中，其中，当所述LAMP2A蛋白的表达为阳性和/或编码LAMP2A蛋白的核酸的表达为阳性时：
[0015]提示胃癌发生风险(风险较高)；
[0016]或者提示胃癌的癌前病变发生风险或胃癌前病变进展风险，例如提示胃癌前病变病程进展风险(风险较高)。
[0017]对于一个被检测的对象，当所述LAMP2A蛋白的表达为阳性和/或编码LAMP2A蛋白的核酸的表达为阳性时，可以结合该对象的自身情况来判断结论的类型，自身情况可以是：对象处于胃癌前病变的某个阶段(胃黏膜肠上皮化生、低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变或原位癌)、对象被怀疑具有胃癌高风险。
[0018]胃癌的发生发展按照组织学顺序为5个阶段：浅表性胃炎、萎缩性胃炎、胃黏膜肠上皮化生、低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变、原位癌。在本专利技术的一个或多个实施方式中，胃癌前病变病程进展是指从相对靠前的阶段进展至后面的某一个阶段。
[0019]在本专利技术的一个或多个实施方式中，使用的样本为被测对象的组织样本；优选地，为手术组织样本或者活检样本例如内镜活检样本。
[0020]具体实施方式，所述检测LAMP2A蛋白表达的试剂为抗LAMP2A蛋白的抗体。更具体的方案中，所述抗LAMP2A蛋白的抗体为单克隆抗体。优选的，所述单克隆抗体为本专利技术涉及的MG5单克隆抗体。
[0021]本专利技术另一方面涉及MG5单克隆抗体，所述单克隆抗体的轻链可变区的3个互补决定区序列分别为：
[0022]CDR1:QSISNN；
[0023]CDR2：FAS；
[0024]CDR3：QQSKNWPLT；
[0025]所述单克隆抗体的重链可变区的3个互补决定区序列分别为：
[0026]CDR1：GFSLSSGMT；
[0027]CDR2：WWDDDK；
[0028]CDR3：VRTRLDAMDY。
附图说明
[0029]图1.本专利技术实施例LAMP2A的表达结果；根据染色强度定义为
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、+、++、+++，+及以上即为阳性表达结果。
[0030]图2.LAMP2A在胃黏膜疾病动态进展阳性表达染色特征，表达集中于细胞胞浆中；A
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B依次为浅表性胃炎、萎缩性胃炎；C为胃肠上皮化生；D
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E为低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变；F为黏膜内癌LAMP2A表达特征(200
×
)。
[0031]图3.本专利技术实施例中病例组及对照组筛选过程。
[0032]图4.本专利技术的MG5mAb特异性识别LAMP2A。A：在胃癌细胞系MKN45、BGC823、SGC7901和AGS中免疫印迹显示MG5分子量大约为120kD；B：免疫荧光实验显示MG5呈颗粒状细胞定位，与溶酶体示踪剂共定位于溶酶体；C：免疫荧光实验显示MG5与高尔基体标志分子GOLGB1
无明显共定位现象；D：免疫沉淀(IP)和考马斯亮蓝染色(CBS)显示MG5在120kD处显著富集；E：通过质谱和UNIPROT蛋白数据库匹配鉴定MG5的候选抗原；F：质谱图比对分析MG5mAb候选抗原是LAMP2；G：商品化的LAMP2抗体可识别MG5 mAb在120kD处的IP产物；H：免疫印迹显示商品化抗体可以识别LAMP2A、LAMP2B和LAMP2C，但MG5 mAb只识别LAMP2A；I：在BGC823细胞中通过慢病毒介导的感染使LAMP2A mRNA过表达或沉默；J：WB显示MG5免疫印迹的变化与LAMP2A mRNA一致。
具体实施方式
[0033]除非另有说明，本文中的术语或方法根据相关领域普通技术人员的认识理解或采用已有方法实现。
[0034]下面将结合实施例对本专利技术的实施方案进行详细描述。本领域技术人员将会理解，下面的实施例仅用于说明本专利技术，而不应视为限定本专利技术的范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.选自如下的(1)
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(4)项中的任一项在制备用于胃癌的癌前预警药物或试剂盒中的应用：(1)LAMP2A蛋白；(2)编码LAMP2A蛋白的核酸；(3)检测LAMP2A蛋白表达的试剂；(4)检测编码LAMP2A蛋白的核酸的表达的试剂。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述胃癌的癌前预警是胃癌前病变病程进展风险预测。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述胃癌的癌前预警是胃癌前疾病和癌前病变发生癌变的风险预测。4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述检测LAMP2A蛋白表达的试剂为抗LAMP2A蛋白的抗体。5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述抗LAMP2A蛋白的抗体为单克隆抗体。6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于，所述单克隆抗体的轻链可变区的3个互补决定区序列分别为：CDR1:QSISNN；CDR2：FAS；CDR...

【专利技术属性】
技术研发人员：聂勇战，吴开春，樊代明，韩渭丽，高先春，刘坤，田祖宏，
申请(专利权)人：中国人民解放军空军军医大学，
类型：发明
国别省市：