替尔泊肽的固相合成方法技术

本发明专利技术公开了一种替尔泊肽的固相合成方法，属于多肽合成技术领域。本发明专利技术通过将片段22

【技术实现步骤摘要】
替尔泊肽的固相合成方法


[0001]本专利技术涉及一种替尔泊肽的固相合成方法，属于多肽制备


技术介绍

[0002]替尔泊肽(Tirzepatide)肽序列为：
[0003]H
‑
Tyr1‑
Aib2‑
Glu3‑
Gly4‑
Thr5‑
Phe6‑
Thr7‑
Ser8‑
Asp9‑
Tyr
10
‑
Ser
11
‑
Ile
12
‑
Aib
13
‑
Leu
14
‑
Asp
15
‑
Lys
16
‑
Il e
17
‑
Ala
18
‑
Gln
19
‑
Lys
20
(AEEA
‑
AEEA
‑
γ
‑
Glu
‑
eicosanedioicacid)
‑
Ala
21
‑
Phe
22
‑
Val
23
‑
Gln
24
‑
Trp
25
‑
Leu
26
‑
Ile
27
‑
Ala
28/>‑
Gly
29
‑
Gly
30
‑
Pro
31
‑
Ser
32
‑
Ser
33
‑
Gly
34
‑
Ala
35
‑
Pro
36
‑
Pro
37
‑
Pro
38
‑
Ser
39
‑
NH2[0004]2022年5月13日，FDA宣布批准礼来研发的注射降糖药物Tirzepatide(商品名：Mounjaro)，用于在饮食控制和运动基础上，改善成人2型糖尿病患者的血糖控制。Tirzepatide是一款葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)和胰高血糖素样肽
‑
1(GLP
‑
1)受体双重激动剂，可通过双重作用机制激活参与血糖控制的激素受体
‑‑
GIP和GLP
‑
1两种肠促胰素受体。它通过每周一次皮下注射给药，达到控制血糖目标。Mounjaro是FDA批准的第一个也是唯一一个GIP/GLP受体激动剂，其将2种促胰岛素的作用整合支一个单分子中，是近十年以来获批上市的首个新一类降糖药。
[0005]期临床研究显示，Tirzepatide在显著改善2型糖尿病患者的血糖水平时，还能够降低患者体重。6个月数据显示，Tirzepatide能将2型糖尿病HbA1c水平平均降低2.4％，体重减重11.3kg(12.7％)。Tirzepatide在保持疗效的同时，降低了患者胃肠道不良事件发生率。具体数据为HbA1c水平降低2％，体重减轻5.7kg。双效GIP和GLP
‑
1受体激动剂tirzepatide(LY3298176)随机、平行、开放标签、52周III期SURPASS
‑
4(NCT03730662)临床试验的顶线结果数据显示，在心血管(CV)风险升高的2型糖尿病成人患者中，与滴定甘精胰岛素相比，全部3种剂量tirzepatide在降低血糖和体重方面均显示出优越性：治疗52周，采用疗效估量(efficacy estimand)统计学分析方法，最高剂量tirzepatide(15mg，每周1次)将血糖水平(A1C)从基线降低2.58％、将体重从基线降低11.7公斤(25.8磅，13.0％)，而滴定甘精胰岛素将A1C从基线降低1.44％、体重较基线增加1.9公斤(4.2磅，2.2％)。在这一患者群体中，tirzepatide的总体安全性与胰高血糖素样肽
‑
1(GLP
‑
1)受体激动剂类别一致。胃肠道副作用是最常见的不良反应，通常发生在剂量递增期，然后随着时间的推移而减少。Tirzepatide除对2型糖尿病和肥胖症疗效显著外，对非酒精性脂肪性肝炎也显示出一定的治疗潜力。
[0006]Michael O.Frederick等人在《Organic Process Research&Development》上发表的《kilogram
‑
scale GMP Manufacture of Tirzepatide Using a Hybrid SPPS/LPPS Approach with Continuous Manufacturing》文中提到了一种固相和液相混合的合成方法，流程如图1所示。首先用固相合成法合成片段1
‑
14，15
‑
21，22
‑
29，30
‑
39四个片段。然后先将片段30
‑
39与22
‑
29以液相的形式对接，合成片段22
‑
39。然后片段22
‑
39与15
‑
21以液相的形式对接，合成片段15
‑
39。最后与片段1
‑
14以液相的形式对接合成完成替尔泊肽粗品。
[0007]但是现有固液混合法中液相对接费时费力，片段之间杂质难以去除分离，影响下一步对接。从而影响整个产品的纯度收率。现有方法中片段15
‑
21中有一个较长的支链，这个支链合成成本很大，如果把它做成片段，物料需求量将成倍扩大。

技术实现思路

[0008]为了解决原技术中因为各片段液相对接可能导致的出现杂质难以去除分离，影响下一步对接的情况。本专利技术通过将片段22
‑
29裂解全保护肽后以固相合成的方法连接到片段30
‑
39肽树脂上，合成片段22
‑
39肽树脂，这样可以通过用DMF洗涤，废弃液相的方法来排除杂质对后续反应的影响。然后将21位至15位氨基酸逐个偶联至片段22
‑
39肽树脂，得到片段15
‑
39肽树脂。将片段1
‑
14裂解全保护肽后以固相合成的方法连接到片段15
‑
39，合成替尔泊肽肽树脂。最后切割树脂得到替尔泊肽粗肽。
[0009]本专利技术的第一个目的是提供一种替尔泊肽的固相合成方法，包括如下步骤：
[0010](1)在Rink Amide
‑
AM Resin上通过固相合成法依次偶联Fmoc
‑
Ser(本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种替尔泊肽的固相合成方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)在Rink Amide
‑
AM Resin上通过固相合成法依次偶联Fmoc
‑
Ser(tBu)
‑
OH、Fmoc
‑
Pro
‑
OH、Fmoc
‑
Pro
‑
OH、Fmoc
‑
Pro
‑
OH、Fmoc
‑
Ala
‑
OH、Fmoc
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(tBu)
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(tBu)
‑
OH、Fmoc
‑
Pro
‑
OH和Fmoc
‑
Gly
‑
OH，得到Fmoc
‑
(30
‑
39AA)
‑
Amide
‑
AM Resin；(2)在2
‑
CTC Resin上通过固相合成方法依次偶联Fmoc
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ile
‑
OH、Fmoc
‑
Leu
‑
OH、Fmoc
‑
Trp(Boc)
‑
OH、Fmoc
‑
Gln(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
Val
‑
OH、Fmoc
‑
Phe
‑
OH，得到Fmoc
‑
(22
‑
29AA)
‑
CTC Resin，裂解全保护肽得到Fmoc
‑
(22
‑
29AA)
‑
OH片段；(3)将步骤(1)制得的Fmoc
‑
(30
‑
39AA)
‑
Amide
‑
AM Resin脱除Fmoc保护，然后与Fmoc
‑
(22
‑
29AA)
‑
OH片段以固相合成法偶联对接，得到Fmoc
‑
(22
‑
39AA)
‑
Amide
‑
AM Resin；(4)在步骤(3)制得的Fmoc
‑
(22
‑
39AA)
‑
Amide
‑
AM Resin上通过固相合成法依次偶联Fmoc
‑
Ala
‑
OH、Fmoc
‑
Gln(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
Ala
‑
OH、Fmoc
‑
Ile
‑
OH、Fmoc
‑
Lys(Boc)
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：顾春扬，张璐，杨斌霞，
申请(专利权)人：苏州天马医药集团天吉生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：