多肽、多肽衍生物、多肽的可药用盐、药物组合物及应用制造技术

本发明专利技术公开多肽、多肽衍生物、多肽的可药用盐、药物组合物及应用，该多肽包括选自以下组的氨基酸序列：(1)SEQ ID NO：1；(2)SEQ ID NO：1被取代、缺失、添加或插入至少一个氨基酸残基得到的氨基酸序列；(3)将如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列进行部分氨基酸残基的突变得到的衍生多肽；或(4)与SEQ ID NO：1具有至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或95％序列同一性的氨基酸序列。本发明专利技术中，如SEQ ID NO：1所示的多肽能够促进人皮肤成肌纤维细胞IL

【技术实现步骤摘要】
多肽、多肽衍生物、多肽的可药用盐、药物组合物及应用


[0001]本专利技术属于医药
，具体涉及多肽、多肽衍生物、多肽的可药用盐、药物组合物及应用。

技术介绍

[0002]皮肤纤维化是指皮肤在受到持续性的损伤之后所发生的失去弹性、丧失活性的病变，病变之后局部皮肤组织变硬并丧失知觉，皮肤纤维化是皮肤病理性疤痕(过度肥厚性疤痕和瘢痕疙瘩)以及硬皮病等的典型临床特征。皮肤纤维化是由分子信号和细胞反应机制决定的高度协调的过程：持续性损伤和实质细胞死亡引发组织炎症、巨噬细胞活化和免疫细胞浸润，高活性可溶性介质(危险信号分子、细胞因子、趋化因子)的释放导致产生胶原蛋白的间充质细胞(如周细胞、肌成纤维细胞或Gli1阳性间充质干细胞样细胞)局部活化，募集成纤维细胞前体，进而使各种细胞类型转变为肌成纤维细胞。肌成纤维细胞过度沉积细胞外基质(ECM)蛋白，最终引起疤痕和组织硬化。因此，随着对纤维化过程研究的深入，人们逐渐认识到肌成纤维细胞有望成为纤维化抑制乃至修复的重要靶点。
[0003]目前，靶向肌纤维化细胞的药物研发仍鲜有报道。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术提供多肽、多肽衍生物、多肽的可药用盐、药物组合物及应用，以治疗皮肤纤维化。
[0005]第一个方面，本专利技术提供一种多肽，所述多肽包括选自以下组的氨基酸序列：
[0006](1)SEQ ID NO：1；
[0007][0008](2)SEQ ID NO：1被取代、缺失、添加或插入至少一个氨基酸残基得到的氨基酸序列；
[0009](3)将如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列进行部分氨基酸残基的突变得到的衍生多肽；
[0010]或(4)与SEQ ID NO：1具有至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或95％序列同一性的氨基酸序列。
[0011]第二个方面，本申请提供一种多肽衍生物，所述多肽衍生物为如上所述的多肽的修饰产物。
[0012]可选地，所述修饰包括烷基化、酰基化、氨基甲酰化、碘化。
[0013]第三个方面，本申请提供一种多肽的可药用盐，所述多肽选自如上所述的多肽或如上所述的多肽衍生物。
[0014]第四个方面，本申请提供一种药物组合物，包括多肽或多肽的可药用盐和药用载体，所述多肽选自如上所述的多肽或如上所述的多肽衍生物，所述多肽的可药用盐为如上所述的多肽的可药用盐。
[0015]可选地，所述药用载体包括水、缓冲盐溶液、生理盐水、林格氏液、乙二醇、聚乙二醇、甘油、油脂或可注射的有机酯中的至少一种。
[0016]可选地，所述药用载体包括聚乙二醇。
[0017]可选地，所述聚乙二醇的分子量为2000
‑
10000Da。
[0018]可选地，所述药物组合物还包括增稠剂、缓冲液、防腐剂、表面活性剂、抗菌剂、抗炎剂和麻醉剂中的至少一种。
[0019]第五个方面，本申请提供如上所述的多肽、多肽衍生物或多肽的可药用盐在制备用于对成肌纤维细胞凋亡具有诱导作用的药物中的应用。
[0020]第六个方面，本申请提如上所述的多肽、多肽衍生物或多肽的可药用盐在制备用于预防和/或治疗皮肤纤维化的药物中的应用。
[0021]本专利技术的多肽、多肽衍生物、多肽的可药用盐、药物组合物及应用具有以下有益效果：
[0022]本专利技术发现，如SEQ ID NO：1所示的多肽能够促进人皮肤成肌纤维细胞IL
‑
1β的分泌，进而特异性地诱导人皮肤成肌纤维细胞凋亡，从而显著抑制皮肤纤维化进程。
[0023]本专利技术中，PEG化多肽可避免多肽药物的快速降解，显著延长该多肽制剂的体液循环时间
[0024]本专利技术中，PEG化多肽可局部、全身、表皮乃至体内给药，可有效用于治疗皮肤病理性疤痕或硬皮病。
附图说明
[0025]图1为紫外光谱图；
[0026]图2为TUNEL染色结果图(人原代皮肤成纤维细胞)；
[0027]图3为TUNEL染色结果图(人皮肤成肌纤维细胞)；
[0028]图4为细胞凋亡试验结果图；
[0029]图5为qPCR试验结果，其中，1为人皮肤原代成纤维细胞，2为人皮肤成肌纤维细胞；
[0030]图6为酶联免疫吸附试验(ELISA)试验结果，其中，1为人皮肤原代成纤维细胞，2为人皮肤成肌纤维细胞。
具体实施方式
[0031]以下通过特定的具体实例对本专利技术进行进一步的说明，但需要指出的是本专利技术的实施例中所描述的具体的物料配比、工艺条件及结果等仅用于说明本专利技术，并不能以此限
制本专利技术的保护范围，凡是根据本专利技术的精神实质所作的等效变化或修饰，都应该涵盖在本专利技术的保护范围内。
[0032]下面通过具体的实施例对本专利技术的方案进行举例说明。同样应理解，以下实施例只用于对本专利技术进行具体的说明，不能理解为对本专利技术保护范围的限制，本领域的技术人员根据本专利技术的上述内容作出的一些非本质的改进和调整均属于本专利技术的保护范围。下述示例具体的工艺参数等也仅是合适范围中的一个示例，即本领域技术人员可以通过本文的说明做合适的范围内选择，而并非要限定于下文示例的具体数值。
[0033]PEG化多肽，具体制备步骤为：
[0034]委托南京金斯瑞生物科技有限公司合成并纯化多肽PFIMFBA
‑
02(如SEQ ID NO：1所示)，得到的纯化后的多肽PFIMFBA
‑
02的纯度大于98wt％；
[0035]用二甲基亚砜(DMSO)将纯化后的多肽PFIMFBA
‑
02配制成10.0mg/mL的多肽溶液；
[0036]向0.5mg浓度为10.0mg/mL的多肽溶液中加入PBS缓冲液(pH为6.5，0.1mol/L)，使多肽PFIMFBA
‑
02的终浓度为2.0mg/mL，随后添加10μl浓度为62.5mg/mL的聚乙二醇5000(即PEG
‑
5K)，使多肽PFIMFBA
‑
02与聚乙二醇5000的摩尔比为1：100，得到聚乙二醇体系；
[0037]将聚乙二醇体系在4℃、300rpm转速下磁力搅拌反应12h，得到反应混合物；
[0038]随后将反应混合物加载到Serephadex G
‑
25M柱(Serigma Aldrich，USerA)上，用3.0mLPBS缓冲液(0.1mol/L，pH为7.4)洗脱柱，通过岛津凝胶色谱仪器收集PFIMFBA
‑
PEG，并利用Fisher透析袋(>5K)对收集到的PFIMFBA
‑
PEG进行24h透析，以去除任何未反应的PEG
‑
5K分子，得到PEG化多肽PFIMFBA
‑
02。
[0039]对PEG化多肽PFIMFBA
‑
02制备过程中所采用的PEG<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多肽，其特征在于，所述多肽包括选自以下组的氨基酸序列：(1)SEQ ID NO：1；(2)SEQ ID NO：1被取代、缺失、添加或插入至少一个氨基酸残基得到的氨基酸序列；(3)将如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列进行部分氨基酸残基的突变得到的衍生多肽；或(4)与SEQ ID NO：1具有至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或95％序列同一性的氨基酸序列。2.一种多肽衍生物，其特征在于，所述多肽衍生物为权利要求1所述的多肽的修饰产物。3.如权利要求2所述的多肽衍生物，其特征在于，所述修饰包括烷基化、酰基化、氨基甲酰化、碘化。4.一种多肽的可药用盐，其特征在于，所述多肽选自权利要求1所述的多肽或权利要求2或3所述的多肽衍生物。5.一种药物组合物，其特征在于，包括多肽或多肽的可药用盐和药用载体，所述多肽选自权利要求1所述的多肽或权利要求2或3所述的多肽衍生物...

【专利技术属性】
技术研发人员：庞骁霄，吴海平，李汶洋，
申请(专利权)人：重庆医科大学，
类型：发明
国别省市：