一种重组ProteinA蛋白及亲和层析介质的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种重组ProteinA蛋白及亲和层析介质的制备方法，所述的蛋白为SEQ ID NO2所定义的亲本免疫球蛋白-结合蛋白的突变体；所述亲和层析介质的制备方法包括以下步骤：S1、合成重组ProteinA蛋白的基因，S2、利用所述S1中合成的基因分别构建表达载体，S3、培养并表达纯化得到序列对应的SEQ ID的重组ProteinA溶液，S4、利用所述重组ProteinA制备得到亲和层析介质。有益效果：本发明专利技术通过对氨基酸序列重新设计，大大提高ProteinA在碱液中的化学稳定性，从而提供一种对抗体具有特异性结合作用的ProteinA，其在碱性条件下具有良好的化学稳定性，重组ProteinA亲和层析介质结合载量显著提高，可耐受0.5

【技术实现步骤摘要】
一种重组Protein A蛋白及亲和层析介质的制备方法
[0001]本申请是申请日为2021年05月11日，申请号为CN202110525261.5，专利技术名称为“一种重组Protein A蛋白及亲和层析介质的制备方法”的专利申请的分案申请。


[0002]本专利技术涉及蛋白工程
，具体来说，涉及一种重组Protein A蛋白及亲和层析介质的制备方法。

技术介绍

[0003]抗体类药物对疾病具有优异的疗效和安全性，已经在肿瘤类、心血管类，特别是自身免疫性疾病的治疗过程中逐步凸显重要作用，是目前生物类药物中增长率最高的一类药物。得益于高表达细胞系的构建、培养基的改良以及反应器规模不断扩大，单克隆抗体药物技术在过去几十年间得到迅猛发展。而单克隆抗体药物的制备过程中，抗体的纯化工艺尤为重要，其中，对抗体的捕获起着关键作用。而Protein A亲和层析介质是目前抗体捕集和纯化过程中使用最为广泛以及技术最为成熟的一种方法，70％以上的抗体药物纯化工艺都运用该项技术。
[0004]但是当前常用Protein A亲和层析介质在抗体药物纯本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种重组Protein A蛋白，其特征在于，所述的重组Protein A蛋白包SEQ ID NO 2指定的E或D结构域的突变体。2.根据权利要求1所述的一种重组Protein A蛋白，其特征在于，所述SEQ ID NO 2指定D结构域的突变体中6位，9位，26位的天冬酰胺已经突变为选自苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、精氨酸、酪氨酸、亮氨酸、异亮氨酸的氨基酸；所述SEQ ID NO 2指定D结构域的突变体中12位的谷氨酰胺已经突变为选自酪氨酸、天冬氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸的氨基酸；所述SEQ ID NO 2指定D结构域的突变体中18位、56位的谷氨酸已经突变为选自甘氨酸、亮氨酸、精氨酸、天冬氨酸、苏氨酸、组氨酸、丝氨酸、苯丙氨酸的氨基酸；所述SEQ ID NO 2指定D结构域的突变体中32位、49位的甘氨酸已经突变为选自丙氨酸、丝氨酸的氨基酸。3.根据权利要求2所述的一种重组Protein A蛋白，其特征在于，所述突变选自：N6T,N6S,N6E,N6R,N6Y,N6L,N6I,N9T,N9S,N9E,N9R,N9Y,N9L,N9I,N26T,N26S,N26E,N26R,N26Y,N26L,N26I,Q12Y,Q12D,Q12F,Q12I,E18G,E18L,E18R,E18D,E18T,E18H,E18S,E18F,E56G,E56L,E56R,E56D,E56T,E56H,E56S,E56F,G32A,G32S,G49A,G49S；且包含以下序列SEQ ID NO 23、SEQ ID NO 24、SEQ ID NO 25、SEQ ID NO 26、SEQ ID NO 27、SEQ ID NO28、SEQ ID NO 29、SEQ ID NO 30、SEQ ID NO 31、SEQ ID NO 32、SEQ ID NO 33、SEQ ID NO34、SEQ ID NO 35...

【专利技术属性】
技术研发人员：张洪，
申请(专利权)人：博格隆浙江生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：